Способ получения иммуноглобулинового препарата

9) 80 (1 1) б А 61 Комитет Росси по патентам и кой Федерации варным знакам ИЕ ИЗОБРЕ 2) ОПИСАН к авторскому НИ ельств заболеваний, в том числе ротавифекции. Цель изобретенияантиротавирусной активностиСпиртовой осадок Б (111 фраэкстрагируют в растворе хлотрия, с целью удаления липопрабатывают хлороформодекстрансульфатом. Осаждениета иммуноглобулиновой фракц. в присутствии 12% полиэтАнтиротавирусная активностьпри этом увеличивается по спрототипом в 3 раза (в заявлярате титр антиротавирусных128000, в прототипе 1 : 32000). й 1(56) Авторское свидетельство СССР .Х 836831, кл. А 61 К 39/395, 1981,(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ПРЕПАРАТА(57) Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для иммунотерапии и иммунопрофилактики бактериальных и вирусных 15820 ( ) А 1395 повышение препарата.кция Кона) р истого нарогеидов об- Об м и из экстракии проводят нленгликоля, 00препарата равнению с емом препаантител 11815820 Ф о р м у л а:и 3 о б р е т е н и яСПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ПРЕПАРАТА из крови человека путем солевой экстракции спиртового осадка сыворотки крови, обработки его хлороформом и декстрансульфатом с последующим выделением целевого продукта осаждением в при сутствии полиэтиленгликоля, отличающийся тем, что, с целью повышения антиротавирусной активности целевого продукта, осаждение Фракции иммуноглобулинов проводят в присутствии 12 - ного раствора полиэтиленгликоля,Составитель В, ЛитовченкоТехред М,Моргентал Корректор М, Ткач Редактор М. Васильева Тираж Подписное НПО "Поиск" Роспатента113135, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Заказ 135 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для иммунотерапии и иммунопрофилактики бактериальных и вирусных заболеваний, в том числе ротавирусной инфекции,Целью изобретения является повышение антиротавирусной активности препарата,Способ осуществляют следующим обра;зомК солевой экстракту осадка Б (1 И фракции"Кона) ддбавлякф хлороформ, затем ЬЫстрййсульфат "Дл) осаждения фракции иммуноглобулййЪв добавляют полиэтиленгликоль(ПЭГ) до конечйой концентрации 12.П,р и м е р. 1 кг осадка Б экстрагируют в десятикратном объеме 0,9-ного охлажденного раствора хлорида натрия при постоянном перемешивании, Затем смесь доводят до десятикратного объема, хорошо перемешивают и оставляют на ночь (18 ч) при температуре 4 - 6 ОС, рН смеси 5,5 й 0,3, На следующий день смесь центрифугируют в течение 1 ч при 3000 об/мин на центрифуге с охлаждением, Осадок удаляют, в полученном экстракте определяют содержание белка, которое равно 2. Объем полученного экстракта составляет 10600 мл, К экстракту осадка Б добавляют 10600 мл охлажденного до 4-6 С хлороформа (10 по объему). Смесь медленно перемешивают в течение 2 ч при температуре 4 - 6 ОС, К смеси экстракт с хлороформом добавляют 233 мл 5 о -ного раствора декстрансульфата (конечная концентрация 0,1), Смесь энергично встряхивают в течение 5 - 10 мин и центрифугируют при 3000 об/мин на центрифуге с охлаждением до получения прозрачного центрифугата. Осадок удаляют. Обьем центрифугата составляет 8 л, содержание белка 0,4%, К 8 л экстракта для концентрирования иммуноглобулинов добавляют 50-ный раствор полиэтиленгликоля (6000 мм) до конечной концентрации 12 при постоянномперемешивании. Осадок иммуноглобулиновотделяют путем декантации и центрифуги 5 рования в течение 15-30 мин при 3000об/мин на центрифуге с охлаждением, Осадок промывают 300 - 400 мл дистиллированной воды, подкисленной до рН 5 + 0,2, притемпературе 0-2 С,10, Осадок иммуноглобулинов растворяютв охлажденном 0,9%-ном растворе хлориданатрия до содержания белка около 5-6%,рН=6,3. После растворения осадка препаратцентрифугируют 15 мин при 3000 об/мин на15 центрифуге с охлаждением для удаления нерастворимых примесей.К раствору после центрифугированиядобавляют глюкозу до конечной концентрации 2 в качестве стабилизатора. После20 стерилизующей фильтрации через миллипоровые фильтры 0,2 препарат разливают поампулам и лиофилизируют. Хранят в сухомтемном месте при температуре (6-4 )С,Срок хранения 3 г, После растворения осад 25 ка иммуноглобулинов в готовом препаратеопределяют титры антител к ротавирусу иколичественное содержание различныхклассов иммуноглобулинов, Титры антителпротив ротавируса, определяемые методом30 иммуноферментного анализа (ИФА), составляли в иммуноглобулин (1 дМ 1;64000), 1 дб64000, (1 дМ+1 д 6) суммарная активность1;128000, т.е. антиротавирусная активностьв заявляемом препарате в 3 раза выше, чем35 в прототипе (в прототипе суммарная активность 1:32000). Состав препарата; 1 дб 686,дМ 17 1 дА 15%Количество иммунологически неактив,ных примесей составляет не более 3-5%,40 что регламентировано НТД на иммуноглобулин.