Инактивированная вакцина против синдрома снижения яйценоскости-76 птиц

(5)5 С 12 й 7/00 К 39/ ОЛИСА ЗОБРЕТЕН ТЕ К ННАЯ ВАКЦИННИЖЕНИЯ ЯЙ О ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССРГОСПАТЕНТ СССР)(71) Всесоюзный научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства, Ленинградский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови и Институт химической физики АН СССР (72) О.Ф,Хохлачев, Р,Н,Коровин, А,В,Беля, ев, В.Д.Сергеев, В.А,Бакулин, А,И.Шанская, С,М.Пучкова, Г,Я,Гдалевский, С.В.Трошечкина, Р,Г.Костяновский, Э,И,Будовский и Г,К,Кадоркина(73) Всесоюзный научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства(56) ВаЬепбае чЧ, е 1 а, ТЬе гезотз оЮ йеб газ сопбоссеб аЭ ап пастчасеб часепе адапм т)е едд бгор зупбгогпе 76 (ЕОЯ 76) - Ачап Райооду, 1980, чо. 9, 1, р.р. 77 - 91,Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и может быть использовано при изготовлении вакцины против синдрома,снижения яйценоскостии для профилактики указанного заболевания.Целью предполагаемого изобретения является повышение иммуногенной активности, стабильности и надежности инактивации вакцины против ССЯ, а также уменьшение трудозатрат при ее введении.Поставленная цель достигается тем, что в известной вакцине и способе ее получе-. ния, включающей в себя инактивированный вирус ССЯи адъювант, в качестве вакцинного используют штамм мВ 8/78", в качестве адъюванта - жировую эмульсию на(57) Использование: биотехнология. ветеринарная вирусология, в частности изготовление вакцины против синдрома снижения яйценоскости - 76/ССЯ/ для профилактики указанного заболевания. Сущность изобретения: вакцина включает в себя инактивированный посредством бисф-этилениминоэтилоксамида вирус ССЯштамма иВ 8/78" и масляный адъювант на основе соевого масла и соевого лицитина при определенном соотношении компонентовВакцина является не реактогенной, безвредной для привитой птицы, титр, антител при этом достигает 8.1 - 9,1. логг. основе соевого масла и соевого лецитина, ав качестве инактиватора инфекционности -бис-В -этилениминоэтилоксамид,Сопоставительный анализ заявляемого решения с прототипом показывает, что за-; О являемая вакцина отличается от известной твм, что исповввуют штамм вируса ССя.уб )ув "В 8/78", до сих пор для изготовления вак-р цин не использовавшийся, а не мВС". При этом результаты комиссионных испытаний заявляемой вакцины в сравнении с противопоставляемой показывают ее более высокие антигенные (в 4,5-9,0 раз) и иммуногенные качества (См, Акт комиссионных испытаний от 27,05.89 г,).Инактивацию вируса в заявляемой вакцине производят посредством бис-Р -этилениминоэтилоксамида, что гарантируетполное отсутствие в вакцине остаточной инфекционности, а также невозможность репарации генома вирусной ДНК (8). Тогда как ввакцине Ноби-Вак ЭДС 76 этот процесс возможен, так как инактивацию производят посредством формалина. Кроме того, водныерастворы формалина нестабильны, что затрудняет стандартизацию инактиватора (б),Использование в заявляемой вакцине вкачестве адъюванта жировой эмульсии наоснОве соевого масла и соевого лецитинаследующего состава (в мас,%): 15Соевое масло 9,0 - 11,0Соевый лецитин . 1,0 - 1,5Сорбит 4,0-6,0Вода остальноедает по сравнению с прототипом, где используется адъювант нераскрытого состава, обладающий вязкой консистенцией итемпературой застывания, близкой к комнатной, преимущества более быстрого введениявакцины и точного соблюдения ее дозы. 25Примеры конкретного выполнения.Исходную вируссодержащую жидкостьполучают на развивающихся. утиных эмбрионах 10-12-суточного возраста, зараженных вирусом ССЯштамма "В 8/78" в 30аллантоисную полость. с последующим инкубированием при температуре 37,0 +0,5 ОСв течение 96 - 120 ч,Для инактивации вируса в вируссодержащчю жидкость добавляют бис-,В-этиленимино-. 35этилоксамиддо конечной концентрации его вреакционной смеси 0,01 М и компоненты перемешивают при температуре 37,0 + 0,5 С втечение 20 - 24 ч. Затем остаточный инактиватор нейтрализуют тиосульфатом натрия, который добавляют до конечной концентрации0,03 М и смесь выдерживают в течение 2 часовпри температуре 20,0-22,0 С, Контроль инфек.ционности осуществляют путем трехкратныхпоследовательных пассажей на развивающихся утиных эмбрионах 10 - 12-суточного возраста,Для инактивированного вируса определяют титр гемагглютинирующей активностив реакции гемагглютинации с 1%-ной суспензией куриных эритроцитов, после чеговирус суспендируют в физиологическомрастворе с рН 7,2 до величины титра 4096гемагглютинирующих единиц (ГАЕ)/0,2.Суспензию инактивированного вируса 55стандартной активности перемешивают вравном объеме адъюванта в течение 15 минпри 20,0 - 22,0 С до получения гомогеннойэмульсии,Полученную инактивированную вакцину применяют для иммунизации против ССЯцыплят в возрасте 110-120 дней путем однократной внутримышечной инъекции в дозе 0,5 мл на птицу,Иммунитет наступает через 14 дней и сохраняется в течение всего продуктивного периода,Предлагаемая вакцина против синдрома снижения яйценоскостиптиц по сравнению с вакцинами, имеющими известный состав, обладает следующими преимуществами;Имеет более высокую антигенную и иммуногенную активность(См, Акт комиссионных испытаний от 27,05.89 г.);Полная инактивация вируса в вакцине позволяет предотвратить возможное распространение заболевания в птицехозяйствах страны при вакцинации;Используемый для приготовления адъювант способствует ее высокой стабильности и иммуногенной активнЬсти;Применение вакцины в птицехозяйствах страны дает воэможность использовать высокопродуктивные, но чувствительные к вирусу ССЯптиц породы, как, например, Хайсекс-браун. Яйценоскость при этом повышается на 15,2 яйца на несушку за продуктивный период, а количество снесенных бесскорлупных яиц уменьшается на 5,5%,ф ор мул а и зо бр ете н ия Инактивированная вакцина против синдрома снижения яйценоскостиптиц, включающая инактивированный вирус синдрома снижения яйценоскости птици адъювант, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения иммуногенной активности и стабильности, в качестве инактивированного вируса синдрома снижения яйценоскости птициспользуют инактивированный бис-этилениминоэтилоксамидом вирус с титром до инактивации 1024-4096 ГАЕ/0,5 мл, а в качестве адъюванта - эмульсию, включающую соевое масло, соевый лецитин, сорбит и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:суспензия инактивированного бис-этилениминоэтилоксамидом вируса синдромаснижения яйценоскостиптицс титромдо инактивации1024 - 4096 ГАЕ/0,5 мл 50соевое масло 4,5-6,5 соевый лецитин 0,5-0.75сорбит 2-3вода остальное,