Штамм бактерий мyсовастеriuм fортuiтuм, используемый для изготовления преципитирующей сыворотки

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК ОА 38)3 С 12 й 1/20 К 39 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕ ИДЕТЕЛ ЬСТВУ ВТОСКОМ ст а один из иэве я для изготов ро ки, обретения 1 опц 1 шв В Однако ни не использует ирующей сывЦель и МусоЬастег 1 ив ых штаммов ия преципиштамм 93 используе ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМРИ ГКНТ СССР(54) ШТАММ БАКТЕРИЙ МУСОВАСТЕВ 1 ОМ ГОВТО 1 ТОМ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ПРЕЦИПИТИРУОЩЕЙ СЫВОРОТКИ(57) Использование: микробиология, серо- логическая диагностика туберкулеза - получение сыворотки для идентификации микобактерий. Сущность изобретения; штамм МусоЬастег 1 цв Фогтсов ГИСК В 34 выращивают на среде Линниковой - Могилевского при 37 С в течение 3 - 4 недель.Бакмассу отделяют, промывают дистиллированной водой. Инактивируют фенолом, замораживают и разрушают на бактериальном прессе при давлении 25 атм и температуре (-40) - (45)С, Разрушенную Изобретение относится к медицинской и ветеринарной микробиологии, представляет собой новый штамм МусоЬастег 1 ов 1 огто 1 тов, отличающийся антигенными свойствами, и может быть использовано для изготовления преципитирующей сыворотки,Известны штаммы микобактерий МусоЬастег 10 в 1 огтцтов, обладающие культурально-морфологическими и биохимичебактериальную массу промывают дистиллированной водой, фильтруют и оставшуюся массу используют в качестве антигена для иммунизации продуцентов. Выделяют сыворотку общепринятым способом. Обработка клеток микобактерий (разрушение на бактериальном прессе, удаление водорастворимых компонентов протоплазмы) позволяет получить отмытые клеточные стенки и, тем самым, повысить содержание видовых антигенов в препарате для иммунизации лабораторных животных. Сравнительно короткий цикл иммунизации большим количеством антигенного материала обусловливает первичный ответ животного именно на видовые антигены и обеспечивает получение сыворотки, содержащей антитела к М. 1 огто 1 тов, Незначительное количество родовых антител к родовым антигенам микобактерий в реакции диффузионной преципитации в агаре не обнаруживается иэ-за ограниченной чувствительности этой реакции, Особенности штамма, методы получения антигенного материала для .иммунизации животных, при- емов.самой иммунизации и применение РДП в агаре исключают необходимость адсорбции сывороток. скими свойствами, характерными для мико- бактерий данного вида, выделенные в США и Франции и хранящиеся в коллекциях этихмый для изготовления преципитирующей Антигенные свойства. При введении сыворотки, кроликам вызывает образование преципиШтамм МусоЬастегцв огтцтце выде- тирующихантителвтитре 1;16-1:64(вРИД). лен из лимфоузла коровы, положительно ре- П р и м е р 1. Получение антигенного агирующей на туберкулин, в 1988 г. Штамм 5 материала,МусоЬастегце Фогттце М 293 депониро- Штамм МусоЬастегцгп 1 огтцтцгп Ь 293 ван в коллекции Государственного научно- засевали на жидкую синтетическую среду исследовательского института Линниковой-Могилевского и выращивали стандартизации и контроля медицинских и при 37 С в течение 3-4 нед. Бактерийную биологических препаратов имени Л, А. Та массу отделяли на стерильном бумажном расевича под ч. 34. фильтре, промывали дистиллированной воМорфология. Клетки имеют вид палочек дой, заливали на 18-24 ч 2 ф 6-ным фенолом, длиной 1,0 мкм. Окрашиваются по Граму, по повторно. отмывали дистиллированной воЦилю-Нильсену окрашиваются в красный 15 дой, помещали в коллодиевые пистоны на480 - 520 мг с последующим замораживаниКультуральные характеристики.На. ем при - 40-45 С и разрушением на бактеплотной яичной среде Левенштейна-Йенсена риальном прессе при давлении 25 атм и при 37 ОС вырастает за 3 - 5 дней, на карто- температуре -40-45 С. Разрушенную бакфельно-глицериновой среде Павловского 20 терийную массу заливали десятикратным вырастает за 5-8 дней, Размножается при объемом стерильной дистиллированной во - 42 С, не растет при 45 ОС Оптимум роста ды и выдерживали в холодильнике при тем-37 С. пературе 3 - 5 С в течение 40-48 ч,На жидких питательных средах растет Суспенэию фильтровали через стерильный на поверхности в виде сухой. плотной плен бумажный фильтр. Оставшуюся массу иски кремового цвета, среда остается про- пользовали в качестве антигенного материэрачной, Через 4-8 нед, роста среда аладля иммунизации животных,окрашивается в светло-коричневый цвет П р и м е р 2. Получение преципитирупри сохранении прозрачности, ющей сыворотки.Физиологические свойства,. Растет на 30 Кроликов весом 2,0 - 3,0 кг иммунизироплотной питательной среде Левенштейна- вали антигенным материалом штамма Йенсена с добавлением 5 хлористого на- МусоЬастегцгп 1 огтцтца М 293, получентрия или салицилата натрия. Расщепляет с ным, как в примере 1, Антигенный материал образованием кислоты инозит, не фермен- вводили в количестве 50-100 мг в 0,8-1,0 мл тирует рамнозу, абариноэу, сорбит, маннит, 35 неполного адъюванта Фрейнда внутрикождульцит. Утилиэирует цитрат и малонат на- но в три разных места еженедельно в течетрия. Имеет активные ферменты: уреазу, Р ние 3 - 5 нед. Полученная сыворотка -галактозидазу, нитратредуттаэу. бесцветная, слегка опалесцирует, В РИД вИзучение нуклеотидного.состава ДНК агаре образовывала линии преципитации проводили методом тепловой денатурации 40 при разведениях 1:16-1:64 с экстрактами в ЗЯС с применением формальдегида. штаммов МусоЬастегца Тайц 1 цт, полученГЦмол у штамма МусоЬастегце 1 огштцв ных из ГИСК им. Л. А. Тарасевича(2 штамма) йг 293 составил 65,1. и свежевыделенных от крупного рогатогоУчитывая, что нуклеотидный состав скота (2 штамма), а также с экстрактами ДНК примерно одинаков не только у видов 45 штамма МусоЬастегца 1 огцюп % 293 и не рода МусоЬастегцгп, но иу близкородствен- образовывала линий преципитации с эксных родов (Косагса, ЙЬобососсцз и др. ро- трактами штаммов других видов микобактедов актиномицетной линии) и составляет рий (М. тцЬегсцозз, М, Ьочз, М. ачцгп, М.62-73 О ГЦ, проведено изучение жирных згпедгпатз, М, рЫе, М. Капзаз),кислот методом сопиролитической газовой 50 Экстракты микобактерий для реакции хроматографии, Определенный таким обра- диффузионной преципитации в агаре готоэомсоставсоответствуетвидовомусоставу вили растиранием 20-30 мг бактерийной МусоЬастегца Фогтша. массы со стерильным стеклянным песком вПосле заражения морских свинок бак,2-0,3 мл дистиллированной воды, подщетерийной массой в количестве 1,0-1,5 мг 55 лоченной 0,1 н. ИаОН до рН 9;5-10,0, внутримышечно животные в течение 3 мес Ф о р м у л а и э о б р е т е н и я остаютсяздоровыми,на вскрытии патолого- Штамм бактерий МусоЬастегцпз анатомическая картина микобактериоза от оацтцв ГИСК М 34, используемый для изготовления преципитирующей сыворотки,