Способ прогнозирования послеоперационных гнойно воспалительных осложнений

/68, 1989. Я ПО- ОСПАцине, в спали- вания ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ПИСАНИЕ ИЗОБ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАН СЛЕОПЕРАЦИОННЫХ ГНОЙНОЛИТЕЛЬНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ (57) Изобретение относится к мед частности к хирургии, и может быть зовано для диагностики гнойнотельных процессов, прогнози Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, и может быть использовано для диагностики гнойно-воспалительных осложнений, прогнозирования течения раневого процесса, а также для оценки эффективности лечения ран и раневой инфекции.Целью изобретения является снижение травматизации больного, при сохранении высокой точности.Способ осуществляют следующим образом.Через 24 ч после операции из вены вдве пробирки по 2 мл берут кровь и смешивают с гепарином из расчета 1 ед/мл крови. Затем в первую (контрольную) пробирку добавляют 50 мкл инкубационной среды (физиологический раствор с концентрацией глюкозы 5,55 ммоль/л, хлористого кальция течения раневого процесса, а также для оценки эффективности проводимого лечения ран и раневой инфекции. Целью изобретения является снижение травматичности и упрощение способа при сохранении высокой точности, Целью достигается за счет того, что через 24 ч после операции в крови определяют удельную активность супероксиддисмутазы до и после бактериальной нагрузки крови, рассчитывают отношение первого показателя ко второму и призначении отношения больше единицы диагностируют гнойно-воспалительные осложнения. Основными преимуществами и редложенного способа являются упрощение способа (однократное взятие крови), снижение травматизации и сокращение времени исследования при сохранении высокой точности, равнсй 880/б,1 0,9 ммоль/л и хлористого калия 4,5 ммоль/л), а во вторую (опытную пробирку для осуществления бактериальной нагрузки крови добавляют 50 мкл опсонизированных частиц микрококков, приготавливаемых. по общепринятой методике,Далее смесь в контрольной и опытной пробирках перемешивают и инкубируют 30 Ф 5 мин при 37 С. Все пробирки центрифугируют 10 мин при 2500 об/мин, Затем а полученных супернатантах определяют удельную активность СОД,в кювету спектрофотометра вносят 0,2 мл супернатанта и добавляют туда 2 мл свежеприготовленной среды, состоящей из 0,5 М Ка 2 СОз, 10 М ЭДТА (рН среды 10,2 и 1=30 С), а также для инициирования реакции - 50 мкл адреналина(310 М). Состав перемешивают и кювету помещают в ячейку спектрофотометра. Придлине волны 560 нм измеряют изменение скорости 02 - зависимого образования. Сравнивают скорости образования адренохрома в присутствии или отсутствии объемов адренохрома в сыворотке, За единицу активности принимают объем исследуемой пробы, вызывающий 50 -ное ингибирование реакции автоокисления адреналина вЬдвухволновом режиме. - - 560/650 нм вгтечение 1 мин, затем по стандартному графику определяют количество (в мл) супернатанта (Ч), вызывающее 50 -ное ингибирование этой реакции.Для подсчета удельной активности СОД дополнительно в плазме исследуемой крови биуретовым методом (5) определяют конструкцию белка следующим образом; 20 мкл плазмы разводят 1;500 фосфатным буфером, далее на 0,5 мл разбавленного раствора добавляют 0,5 мл раствора А, состоящего из 0,5 ф -ного сульфата меди, 0,1 -ного тетрата винокислого натрия, 0,5 М раствора МаОН и 107 о Ма 2 СОз и в течение 10 мин держат при комнатной температуре. Затем в эту смесь добавляют 0,2 мл 0,11 реактива Фолина в разведении 1:9 и в течении 5 мин держат в водяной бане при 55 С, Затем охлаждают во льду в течение 2 мин и измеряют оптическую платность полученных проб на спектрофотометре при длине волны 650 нм и по калибровочной кривой определяют концентрацию белка (С) в мг/мл, Удельную актив 1 ность СОД вычисляют по формуле где Ч - количество супернатанта, которое вызывает 50 -ное ингибирование описанной реакции автоокисления коантиноксидазы в присутствии СОД исследуемых проб;С - концентрация белка. Затем рассчитывают отношение СОД в первой пробирке к СОД второй пробирки и при значении отношения больше единицы диагностируют гнойно-воспалительные осложнения,П р и м е р 1, Больной К 28 лет, поступил с диагнозом; острый аппендицит с явлениями перитонита, по поводу чего в тот же день был оперирован. Рана зашита послойно, наглухо. Через 24 ч после операции в плазме крови определяли активность супероксиддисмутазы до бактериальной нагрузки (СОД 1) и после нее(СОД 2), которые были 2,2 и 23,2. Соотношение СОД 1/СОД 2 (2,2/23,2) было меньше единицы (0,1), что свидетельствовало об отсутствии в ране признаков 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 гнойного воспаления, Рана зажила первичным натяжением и больной через 8 дней после операции был выписан.П р и м е р 2, Больной В., 48 лет, поступил с диагнозом: паховая грыжа, по поводу которой был оперирован. Через 24 ч после операции из вены взята кровь, в плазме которой определена супер оксиддисмутаза до бактериальной нагрузки (СОД) и после нее (СОД 2), После исследования выяснилось, что СОД 1=0.71 эд,акт на 1 мг белка и СОД 2=0,17 ед.акт, на 1 мг белка, то соотношение СОД 1/СОДг - -4,1, что свидетельствует о наличии гнойно-воспалительного процесса, На этом основании был поставлен диагноз нагноения раны. В то же время по другим клинико-лабораторным данным признаки гнойного воспаления отсутствовали,Поставленный по нашим данным диагноз нагноения раны в дальнейшем подтвержден; через 5 дней отмечались боли, гиперемия, отечность в области раны, температура тела у больного повышена до 37,6 С. Через 1 с/т рана была раскрыта по поводу нагноения. Дальнейшее лечение нагноившейся раны проводилось по общеизвестной методике, Рана зажила вторичным натяжением, Больнои был выписан через 24 дня после операции.Предлагаемыи способ является менее травматичным и простым при сохранении высокой точности,В предлагаемом способе отсутствует этап дооперационного внутривенного взятия пробы крови, вся методика осуществляется за 1 ч 25 мин (3 ч 10 мин в прототипе), В то же время способ сохраняет высокую точность, равную 88,Формула изобретения Способ прогнозирования послеоперационных гнойно-зос алительных осложнений, включают,ий определение после операции активнс сти супероксиддисмутазы в крови больного, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью уменьшения травматизации и упрощения способа при сохранении высокой точности, активн( сть супероксиддисмутазы определяют при добавлении в пробу оксонизированных микрококков, рассчитывают соотношение активности фермента при бактериальной нагрузке и без нее, и при значении показателя более единицы, прогнозируют развитие осложнений,