Способ активации лейкоцитов крови человека

(51)5 6 01 Й 33/4 ТЕНИ ЗОБР ПИ ВТОРСКОМУ ТЕЛ ЬСТВ ЛЕЙКО ИТОВ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Читинский государственный медицинский институт(56) Макарова В.И. и др, Влияние стрептолиэина О на фукциональную активность лейкоцитов крови человека. - Лабораторное дело,1986, Я 3, с,165-168,Изобретение относится к медицине, а именно к области гематологии и коагулологии.Цель изобретения - повышение фибринолитической активности лейкоцитов человека.Способ осуществляют следующим образом.Иэ свежезаготовленной цейратной крови человека выделяют после центрифугирования лейковзвесь, которую помещают в питательную среду и добавляют активаторы плазминогена (стрептаза, урокинаэа, террлитин) в концентрации 50 - 500 ед/мл, инкубируют 20 - 30 мин при 37 С с добавлением конканавалина А. Лейкоциты отмывают от стимулятора центрифугированием при 1500 об/мин втечение 5 мин.Активность лейкоцитов оценивают по их способности лизировать фибрин следующим методом: в лунки иммунологических планшетов помещают смесь 50 мкл 1 ф-ного раствора фибриногена с 50 мкл тромбина 1689855 А 1(57) Изобретение относится к медицине, а именно к области гематологии и коагулологии. Цель изобретения - повышение фибринолитической активности лейкоцитов человека. Способ осуществляют путем инкубации лейкоцитов человека после выделения их из свежецитратной крови в присутствии активаторов плаэминогена в дозе 50 - 500 ед/мл в присутствии конканавалина А в концентрации 50 - 500 мкг/мл, 1 табл,активностью 50 ед/мл, после 30 мин в полученный гель добавляют взвесь исследуемых лейкоцитов. Инкубируют в течение 3 ч и в надосадочной жидкости определяют содержание продуктов деградации фибрина (ПДФ) иммунаферментным мгтодом. Повышение фибринолитической активности лейкоцитов оценивают по отношению ПДФ, полученных при действии активированных лейкоцитов к количеству ПДФ из интактных лейкоцитов.В качестве стимуляторов используют активаторы плазминогена: урокиназа, стрептаза, террлитин в дозе 50 - 500 ед/мл. Наиболее выраженный эффект оказывает стрептаза, Начиная с дозировки 50 ед/мл все активаторы достоверно увеличивают фибринолитическую активность клеток, а дозировка более 500 ед/мл приводит к разрушению лейкоцитов и к снижению их общей фибринолитической активности.Лейкоциты инкубируют в присутствии конканавалина А в микродоэах 50-200 мкг/мл,/Показано, что,фибринолитическая активность лейкоцитов при инкубации с активаторами плазминогена сохраняется в течение 30 мин, добавление конканавалина А поддерживает ее до 75 мин, 5П р и м е р, Из свежей цитратной крови выделяют лейкоциты, помещают их в питательную среду 199, содержащую 50 ед/мл стрептаэы и 200 мкс/мл конканавалина А и инкубируют их, в течение 20 мин при 37 С, 10 Концентрация лейкоцитов 2 х 10 /мол. Затем клетки дважды отмывают от непоглощенного стимулятора и оценивают и фибринолитическу,о активность, которая равна 4,25 мг/мл, а у интактных - 1,92, Ин декс стимуляции равен 2,2,Фибринолитическая активность интактных лейкоцитов равна 1,84+ 0,19 мг/мл.Сравнительный анализ предлагаемого и известного способов активации лейкоци Способор ность, мг/м ПДФ Р 1 Р 2Индекс стимяяции оп=192,М. гп,Составитель Н,МарковаТехред М.Моргентал едактор Е,Пап ктор М,йароши Подписноео изобретениям и открытия5, Раушская наб 4/5 аказ ГКНТ СССР итета ва,М иэводственно-издательский комбинат "Патент",ул, Гагаоина. 101 10 ТиражИГ 1 И Государственного ком113035, Мос тов представлен в таблице, где Р 1 - достоверность различий между стимулированныщи и интактными лейкоцитами, Р 2 - достоверность различий между стимулированными лейкоцитами по известному и предлагаемому способам,Иэ таблицы видно, что предлагаемый способ позволяет повысить фибринолитическую активность лейкоцитов,Формула изобретения Способ активации лейкоцитов крови человека путем инкубации цитратной крови в присутствии стимулятора, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения фибринолитической активности лейкоцитов, в качестве стимулятора исг 1 ользуют активаторы плазминогена в дозе 5 Я - 500 ед/мл в присутствии конканавалина А в концентрации 50- 200 мкг/мл.