Способ выращивания растений in viтrо

ИЗОБРЕТ ИС АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ%39довательский зональный тва нечерноземной поло 2) В.А.Высоцкий и 3) 581,143,6(088.8).Упадышев НИЯ РАСТЕНИИ биотехнолоо в процессе я различных я является ти питательится зова оже ете анно Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в процессе клонального микроразмножения различных культур.Цель изобретения - уменьшение инфицированности питательной среды и растений, ускорение и упрощение процесса.П р и м е р. В небольшой объем бидистиллированной воды добавляют макро- и микроэлементы по рецепту Мурасиге-Скуга, мг на 1 л раствора: ИН 4 МОз 1650, ККОз 1900, СаС 12 2 Н 20 440, М 9 Я 04 370, КН 2 Р 04 170, ЕеЯ 04 7 Н 20 27,8, йа 2 ЭДТА 2 Н 20 37,3, НзВОз 6,2, МпЯ 04 4 Н 20 22,2, ЕпЯ 04 7 Н 20 8,6, Ю 0,83, Иа 2 Мо 04 2 Н 20 0,25, СцЯ 04 5 Н 20 0,025, СоС 2 6 Н 20 0,025, Затем в этот же раствор вносят сахарозу в количестве 30 г/л, витамины в количестве мг/л: миоинозит 100, тиамин, пиридоксин, никотиновая кислота - 0,5, аскорбиновая кислота 1, регулятор роста - индолилмасляная кислота в концентрации 0,5, после чего ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИРИ ГКНТ СССР(57) Изобретение относ гии и может быть испол клонального микро разм культур, Целью изоб уменьшение инфициро ной среды и растений, ускорение и упрощение процесса, Поставленная цель достигается тем, что готовят питательную среду и на ее поверхность наносят защитный слой, в качестве которого используют парафин. Толщина слоя 0,09 - 0,12 мм. Причем слой парафина наносят перед автоклавированием, после которого осуществляют высадку тканей и органов растений и их дальнейшее культивирование, Способ позволяет снизить инфицированность питательной среды с 27)ь до О, что дает возможность высаживать эксплантаты в нестериальных условиях и значительно снижает затраты на осуществление способа и ускоряет процесс, 1 з.п, ф-лы, 2 табл,объем раствора доводят до нужной величины, устанавливая рН 5,5 - 5,6, В приготовленный раствор вносят г/л агар-агара и прИ нагревании добиваются его растворения, Питательную среду разливают по сосудам, в которые вносят навески парафина. Количество парафина зависит от радиуса сосуда и толщины защитного слоя, При радиусе сосуда 2,5 см и требуемой толщине защитного слоя 0,09 - 0,12 мм навеска парафина составляет 160 - 210 мг на 1 сосуд, Затем сосуды закрывают, автоклавируют при давлении 0,9 атм (температура 119 С) в течение 15 - 20 мин и оставляют до затвердения агара и параина. Парафин, имея плотность 0,88 г/см, располагается на поверхности питательной среды и формирует защитный слой.После этого осуществляют высадку эксплантов в нестерильных условиях. Высадка побегов актинидии по предложенному способу полностью исключает инфицироввние1685323 Таблица 1 аблица 2 среды, в то время как при высадке по известному способу инфицированность составляет 27,3. (см, табл,1).Как видно из табл.1, использование парафинового покрытия, исключая инфицирование среды, не ухудшает развитие растений.Оптимальная толщина слоя. парафина колеблется в пределах 0,09 - 012 мм (см.табл.2). Более тонкий слой не обеспечивает равномерного покрытия среды, а более толстый затрудняет посадку зксплантов. Кроме того, наличие слоя, превышающего 0,15 мм по толщине, приводит к его растрескиванию при посадке, нарушая, таким образом, целостность поверхности защитного слоя.В табл.2 показана эффективность посадки зксплантов в нестерильных условиях при различной толщине защитного слоя.Предлагаемый способ выращивания растений и чтго позволяет осуществлять высадку частей растений в культуральные сосуды в нестерильных условиях. Это значительно расширит применение метода культуры тканей и даст воэможность получить гораздо больше посадочного материала, 5 Формула изобретения 1. Способ выращивания растений ич 1 тго, включающий приготовление питательной среды, автоклавирование, нанесение 10 защитного слоя на поверхность питательной среды, последующую высадку на нее тканей или органов растений и их культивирование, о т л и ч а ю щ и й с я тем,.что, с целью уменьшения йнфицированности пи тательной среды, ускорения и упрощениепроцесса, в качестве защитного слоя используют слой парафина толщиной 0,09- 0,12 мм. 20 2. Способ по п,1, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что защитный слой парафина наносят на поверхность питательной среды перед автоклавированием.