Способ окраски нервных волокон на гистологическом препарате

осится к медицине, а логическим методам ения является улучше вных структур в орга ние контраста нен ах.Способ осущесзом. ляют следующим о ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Благовещенский государственный медицинский институт и Институт физиологиии патологии дыхания СО АМН СССР(54) СПОСОБ ОКРАСКИ НЕРВНЫХ ВОЛОКОН НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОМ ПРЕПАРАТЕ(57) Изобретение относится к медицине, аименно к нейрогистологии, Целью является В кровоток органа, например легкие, перфузируют раствор, содержащий 5;-ную глюкозу, до полного освобождения сосудов от крови. Далее в те же сосуды перфузируют раствор, содержащий азотнокислый кобальт, цистеин и диметилсульфоксид, Температура раствора 10-15 С и рН 3,5-3,8,Далее орган извлекают, перевязывают сосуды и помещают в емкость с той же жидкостью на 10-15 мин, Затем в артерии органа вводят 0,3 - 0,60/О-ный раствор сульфида натрия, рН которого 7,3 - 7,4, рН устанавливают азотной кислотой, Дополнительно орулучшение контраста нервных структур в органах, Цель достигается тем, что в сосуды перфузируют раствор, содержащий азотнокислый кобальт, цистеин и диметилсульфоксид. Перфузию проводят на промытых 5 О-ной глюкозой сосудах. Температура перфузионной жидкости 10 - 15 С, рН 3,5 - 3,8. Затем в сосуды вводят 0,3 - 0,6-ный раствор сульфида натрия, рН 7,3 - 7,4. После потемнения органа его извлекают, фиксируют, готовят гистологические препараты. Способ позволяет проводить докраску препаратов любыми гистологическими красителями. На препаратах видна вся сеть нервных волокон. ган помещают в тот же состав сульфида натрия на 15-20 мин, Орган темнеет и приобретает мраморный вид, После потемнения орган отмывают от сульфида натрия 5 оьным раствором глюкозы затем фиксируют в 10 О)ь-ном растворе формалина. Срезы готовят замороженные толщиной 20 - 40 мкм.Возможна докраска препаратов любыми гистологическими красителями,П р и м е р. Легкое через сосуды перфу- зируют 5 ОД-ным раствором глюкозы, Сосуды промывают до выхода светлого раствора, Далее вводят раствор, содержащий азотнокислый кобальт, цистеин, диметилсульфоксид, при следующих соотношениях компонентов мас.,4:Азотнокислый кобальт 12,0-13,0 Цистеин 45-65 Диметилсульфоксид 1 - 2 Вода Остально1675726 ков, что также позволяет учесть этот критерий при оценке и анализе нервных структурв органе. Составитель Л,СтебаеваТехред М,Моргентал Корректор М.Кучерявая Редактор Л.Волкова Заказ 2996 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж 35, Раушская наб 4/5 Пооизволстденно-идлдтеплский комбинат "Пдтент". г. Ужгооол. чл,Гдгдоинд. 101 рН этого раствора устанавливают до 3,5- 3,8, а температура введения 10-15 С.Затем перевязывают все сосуды, извлекают легкое из грудной клетки и помещают в раствор того же состава на 10-15 мин, После в сосуды вводят раствор сульфида натрия. Легкое темнеет, приобретает мраморный вид, его дополнительно выдерживают в растворе сульфида натрия, затем тщательно промывают, помещают в формалин и готовят замороженные срезы,Срезы красят гематоксилин - эозином и исследуют под микроскопом. На срезах хорошо видна структура нервных волокон, при докраске гематоксилин"зозином в дополнение хорошо видны клеточные структуры,Способ позволяет увеличить контраст нервных структур, особенно при выявлении Их в органах. Поскольку именно в органах тяжело полностью выявить все отделы волоКон, в отличие от пленочной структуры. При окраске предложенным способом также хорошо видна плотность нервных проводни 5 Формула изобретенияСпособ окраски нервных волокон на гистологическом препарате путем импрегнации в растворе, содержащем азотнокислый кобальт, и осаждения кобальта сульфидом 10 натрия, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюулучшения контраста нервных структур в органах, импрегнацию проводят при 10-15 С и рН 3,5-3,8 раствором, дополнительно содержащим цистеин и диметил сульфоксид при следующих соотношенияхкомпонентов, мас. О ;Азотнокислый кобальт 12,0-13,0 Цистеин 44-65 Диметилсульфоксид 1 - 2 20 Вода Остальноепри этом осаждение проводят 0,3-0,6- ным раствором сульфида натрия с рН 7,3-7,4.