Способ определения лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза

+25 научноркулезаая, А.А.К сс вательнеев и Н.Ха рава СССР М 568 от ределения лекарственДЕЛЕНИЯ ЛЕКАРСТВОСТИ МИКОБАКТЕедицинской спользовано носится жет быт 00 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(71) Центральныйский институт тубе(54) СПОСОБ ОПРВЕННОЙ УСТОЙЧРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА(57) Изобретение омикробиологии и м Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть исйользовано при индивидуальном подборе лекарственных препаратов для лечения туберкулеза.Цель изобретения - ускорение способа.Способ осуществляют следующим образом,Способ определения лекарственной устойчивости микобактерий турберкулеза заключается в том, что в питательную среду Левенштейн-Иенсена или среду Попеску Т.Т. вносят ГчайОз или КМОз, а затем те или иные лекарственные препараты. Культуру микобактерий туберкулеза, выделенную от больного, в определенном количестве засевают на плотную питательную среду, разлитую в пробйрки, и выдерживают в термостате. Через 8 - 14 дней в одну из контрольных пробирок добавляют йодистый крахмал с серной кислотой в количестве 2 - 3 при индивидуальном подборе лекарственных препаратов для лечения туберкулеза, Цель изобретения - ускорение способа, Исследуемый материал высевают в пробирки с плотной яичной средой с различными лекарственными препаратами в каждой пробирке и 1 об,азотнокислого калия или натрия. Посевы инкубируют в течение 8 - 14 дней, после чего добавляют смесь равных обьемов йодистого крахмала и 10%-ного раствора . серной кислоты. При наличии окрашивания через 1 - 3 мин после добавления смеси культуру относят к устойчивой, а при отсутствии окрашивания к чувствительной к лекарственным препаратам. капель. В случае положительной нитратредуктазной реакции в контроле реактив добавляют в пробирки со средами, содержащими лекарственные препараты, и в течение 1-3 мин по результатам окрашивания учитывают устойчивость микобактерий туберкулеза к этим препаратам.Окрашивание указывает на устойчи-. вость культуры к препарату, отсутствие окрашивания - на чувствительность.П р и м е р. Перед введением противотурберкулезных препаратов и свертыванием среды Левенштейна-Иенсена или Попеску Т.Т, в нее вводят ИаГчОз(ККОз) из расчета 1 мл 10%-ного раствора на 100 мл среды, Остальные процедуры проводятся в соответствии с описанной методикой. На 10 - 14 день в контрольную пробиркуэакапывают две капли равного объема йодистого крахмала с 10-ным раствором серной кис1661218 Составитель Г. СмирноваРедактор М. Стрельникова Техред М.Моргентал Корректор И, Муска Заказ 2097 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул, Гагарина, 101 лоты. В случае окрашивания поверхности питательной среды и реактива в красный или зеленый цветреактив закапывают в пробирки с испытуемыми препаратами и учитывают окрашивэние поверхности среды и реактива в течение 1 - 3 мин,При отрицательной нитратредуктазной реакции в контроле пробирки оставляют на дальнейшее выращивание до появления начального различимого роста, В контроле отсутствие положительной нитрэтредуктазнойреакции может быть вызвано плохим ростом культуры на плотной среде или ростом культуры, не обладающей нитратредуктазной активностью.Из полученных результатов следует, что частота устойчивости известного и предложенного методов практически одинакова, а сроки определения предлагаемого способа сокращены в 2 раза. Отмечается высокое совпадение результатов определения устойчивости предложенным способом по сравнению с известным,По положительному результату реакциинитратредуктазы в контрольной пробирке в 100 случаев сделано предварительное заключение о видовой принадлежности куль туры.Формула изобретения Способ определения лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза путем посева исследуемого материала на 10 плотную яичную питательную среду с лекарственным препаратом с последующим инкубированием посевов и учетом результатов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения способа, инкубирование посе вов осуществляют в присутствии раствораазотнокислого калия или натрия в количестве 1 об. ф в течение 8 - 14 дней, затем добавляют смесь равных объемов йодистого крахмала и 10 -го раствора серной кислоты 20 и при наличии окрашивания культуру относят к устойчивой, а при отсутствии окрашивания - к чувствительной к лекарственному препарату.