Способ моделирования аутоиммунного тиреоидита

(5)5 6 09 В 23 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕ К АВТОРСКОМУ С ТЕЛЬ Т ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(56) Авторское свидетельство СССРМ 1522275, кл. 6 09 В 23/28, 1986.(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ АУТОИММУН НОГО ТИРЕОИДИТА Изобретение относится к мед , а именно к эндокринологии.Цель изобретения - повышение точности способа за счет приближения модели к течению естественной патологии,Способ осуществляют следующим образом,Крыс-самцов линии Вистар получают из питомника и отсаживают на 2 недели в карантинное помещение вивария. Взвешивают. По истечении двух недель животных подвергают осмотру в присутствии ветврача, взвешивают и отбирают только здоровых животных. Крыс рассаживают в клетки по шесть штук в каждую и помещают в специально отведенные комнаты вивария. В этих комнатах животные находятся еще четыре дня до начала опыта (время адаптации). На пятый день животному внутримышечно в заднюю лапку ежедневно начинают вводить пролактин в дозах 50-70 Ед/кг. Для этого сухой "Лактин" во флаконах разводят иэотоническим раствором хлористого натрия, Концентрацию раствора рассчитывают таЫ 1642497 А 1(57) Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии. Цель - повышение точности способа эа счет приближения модели к течению естественной патологии. Зкспериментальному животному ежедневно в течение 17 - 20 дней вводят пролактин в дозе 50 - 70 Ед/кг, Применение способа позволяет повысить точность моделирования аутоиммунного тиреоидита по сравнению с прототипом за счет создания модели с сочетанием тиреоидита, инсулита и орхита,ким образом, чтобы в 0,2 мл растворителя была необходимая доза пролактина. Препарат вводят ежедневно между 10 и 11 часами в течение 17 - 20 дней.П р и м е р 1. Крыса-самец линии Вистар. Получена из питомника, находилась 2 недели в карантинном помещении вивария. Вес при поступлении в виварий 175 г. Через 2 недели осмотрена ветврачом, здорова, вес О 190 г, Отсажена в клетку и перенесена в Фь помещение, где производится опыт. На пя Я тый день животное осмотрено, признано ф, здоровым. В этот же день в заднюю лапку сО крысе ввели в 0,2 мл изотонического раствора хлористого натрия 50 Ед пролактина/кг массы тела. Инъекции делали ежедневно в одно и то же время (10 - 11 часов) в течение 17 дней. На 18-й день животное забили под тиопенталовым наркозом. Щитовидную, поджелудочную железы и семенники немедленно извлекли и фиксировали в 10-ном растворе нейтрального формалина. Иэ указанных выше органов готовили серии гистологических срезов, которые окрашивали3 1642497 Составитель А.БобровРедактор Л.Веселовская Техред М,Моргентал Корректор М.Максимишинец Заказ 1149 Тираж 299 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по йзобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 гематоксилином Майера и зозином. Для диФференциации бета- и альфа-клеток использовали хромгематоксилинфлоксиновый метод по Гомори. Излучали гистологические срезы под световым микроскопом при увеличении ХООО (масляиая иммерсия), Производили морфометрию бета-клеток поджелудочной железы и тиреоцитов щитовидной железы. При гистологическом изучении щитовидной железы наблюдалось уменьшение высоты тиреоидного эпителия: 4,3 + 0,1 мкм у подопытного животного и 9,7 + 9,4 мкм у контрольного, которое получало изотонический раствор хлористого натрия. В некоторых тиреоидных фолликулах, особенно располагающихся в очагах лимфоцеллюлярной инфильтрации, выявлялось разволокнение их стенки, В паренхиме щитовидной железы обнаруживалась диффузная лимфоцеллюлярная инфильтрация с формированием лимфоидных фолликулов с центрами размножения, В этих участках наблюдалось также разрастание грубой волокнистой соединительной ткани. В очагах лимфоцеллюлярной инфильтрации выявлялись клетки Ашканази. Площадь лимфоцеллюлярной инфильтрации составляет 72 железы. Гистологическая картина соответствует аутоиммунному тиреоидиту тиреоидиту Хасимото у человека),В островковом аппарате поджелудочной железы этого животного наблюдалось угнетение бета-клеток, диаметр бета-клеток 8,3 - 0,1 мкм по сравнению с 14,3 + 0,4 мкм у контрольного, В некоторых бета-клетках (около 60;) отмечены явления дистрофии, у контрольных животных подобных дистрофических изменений в инсулинпродуцирующих клетках островков не выявлено, Кроме того, в островках наблюдаются лимфоциты и плазматические клетки, а также единичные макрофаги. Лимфоцеллюлярная инфильтрация, являющаяся ведущим признаком аутоиммунного инсулита выявляется в . 70 островков.В семенниках обнаружено разрушение стенки семенных канальцев, дистрофия клеток Сертоли (сустентоцитов), а также половых клеток всех популяций, находящихся в семенном канальце, разрастание соединительной ткани, диффузная лимфоцеллолярная инфильтрация паренхимы семенника, особенно в участках разрушения стенки семенных канальцев, т.е. гистологическая кар- .5 тина соответствовала аутоиммунному орхиту, Очаги лимфоцеллюлярной инфильтрации занимают 80 площади семенника.П р и м е р 2. Крыса-самец линии Вистар. М 27. Получена из питомника, находилась 10 на карантинном режиме 2 недели. Вес припоступлении в виварий 185 г, Через 2 недели животное осмотрено ветврачом, здорово, Вес 200 г. Пролактин в дозе 70 Ед/кг массы тела вводили на протяжении 20 дней, На 21 15 день животное забито. Проведены исследо-.вания щитовидной, поджелудочной желез и семенников. В щитовидной железе подопытного животного выявлен аутоиммунный тиреоидит, Площадь лимфоцеллюляр ной инфильтрации железы 78 , В поджелудочной железе - аутоиммунный инсулит в 87 островков, а в семенниках - аутоиммунный архит, Очаги лимфоцеллюлярной инфильтрации в семенниках занимают 84 25 площади, Гистоструктура щитовидной, поджелудочной желез и семенников при указанных патологических процессах аналогично описанной в примере М 1. Данные морфометрии: высота тиреоцитов у подопытно го животного 4,1 .ф. 0,2 мкм, у контрольного9,7 + 0,4 мкм; диаметр бета-клеток у подопытного животного 7,9 4. 0,3 мкм, у контрольного 14,3 + 0,4 мкм, Подтверждена модель аутоиммунного тиреоидита в сочета нии с инсулитом и орхитом.Применение способа позволяет повысить точность моделирования аутоиммунного тиреоидита по сравнению с прототипом за счет создания модели с сочетанием ти реоидита, инсулита и орхита.Формула изобретен ия Способ моделирования аутоиммунноготиреоидита путем введения экспериментальному животному химического агента, 45 о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения точности способа за счет приближения модели к течению естественной патологии, животному ежедневно в течение 17-20 дней вводят пролактин в дозе 50 -50 70 Ед/кг.