Способ гибридизации дезоксирибонуклеиновых кислот

Номер патента: 1640995

Авторы: Адаричев, Дымшиц, Калачиков, Салганик

ZIP архив

Текст

(5 Ц К АВТОРСК СВИДЕТЕЛЬС СОАН ССС аричев ВА; ЕЗОКСИР асти молекулярзовано для иссх целей. Цель СО 03 СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИКГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ ССС(54) СПОСОБ ГИБРИДИЗАЦИИБОНУКЛБИНОВЫХ КИСЛОТ(57) Изобретение относится к облной биологии и может быть испольледовательских и диагностически(и) 1640995 Л 10 сггдтуо изобретения - упрощение способа. Для достижения цели используют микропористые капроновые мембраны с размером пор 0,2 мкм производства завода "Химфил" р/к "Хину Калур", на которые наносят анализируемую ДНК в оастворе, содержащем 0 - 0,1 М ИаО или ИН /Ас Мембраны облучают4ультрафиолетом в дозе 0,6- 0,8 кДж(м при длинегволны 260 нм, и инкубируют в присутствии ДНК- зонда в растворе, содержащем 0,5% ВОЗ.1640995 раствора, содержащего 1 х ЯЯС и 0,5 ЯРЯ,по 20 минут при 65 С и споласкивают 2 разав 1 хЯЯС, затем в воде.Мембрану экспонируют с рентгено 5 вской пленкой и усиливающим экраном одновременно с калибровочнымиразделениями радиоактивно меченнойДНК, иммобилизованной на капроновоймембране. Оптическую плотность авторади 10 ографа с мембраны с гибридизацией определяют на денситометре и сравнивают соптической плотностью калибровочного авторадиографа, по которому определяют количество сгибридиэовавшейся15 радиоактивно меченной ДНК.Чувствительность способа, т,е. минимальное количество специфической ДНК,определяемой в образце данным способом,составляет 0,1 - 0.5 пг ДНК мишени при ис 20 пользовании ДНК зондов, меченых до удельной активности 5 х 10 - 10 имп/мкг мин,9Таким образом, данное изобретение позволяет повысить эффективность .способагибридизации деэоксирибонуклеиновых25 кислот, а кроме того, использование в качестве гибридизационных фильтров микропористых капроновых мембран производствазавода "Химфил" р/к "Хийу Калур" позволяет расширить ассортимент микропористых30 мембран, которые могут быть использованыдля иммобилизации ДНК, обеспечить возможность в ряде случаев замены дорогосто. ящих импортных нитрацеллюлозных иликапроновых мембран на отечественные,35 получить значительный экономический эффект в экономии валюты, упростить процедуру и сократить время иммобилизацииДНК за счет перехода от эапекания в вакууме в течение 2 ч к облучению ультрафиоле 40 том в течение 20 с,56) Апа, В оспегп 1984. 138, р. 267-284,Заказ 3470 Тираж Подписное НПО "Поиск" Роспатента113035. Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 Формула изобретения 45 да, отличающийся тем. что, с целью упрощения способа, ДНК наносят на капСПОСОБ ГИБРИдИЗАцИИ дЕЗОКСИ- роновые мембраны с размером пор 0,2 РИБОНУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ, включаю- мкм в О,- 0,1 М растворе йаС или МНпАс,щий нанесение денатурированной ДНК на облучают ультрафиолетом ь дозе 0;6 - 0,8 микропористые капроновые мембраны, ин- кДж/м при длине волны 60 нм, а инкуба 50 г кубацию мембран в присутствии ДНК-эон- цию осуществляют в присутствии 0,5% ЯРЯ,Составитель Т. Забойкина Редактор Н. Тимонина Техред М, Моргентал Корректор Е. Папп

Смотреть

Заявка

04619400, 12.12.1988

Институт цитологии и генетики СО АН СССР

Калачиков С. М, Дымшиц Г. М, Адаричев В. А, Салганик Р. И

МПК / Метки

МПК: C07H 21/00, C12Q 1/68

Метки: гибридизации, дезоксирибонуклеиновых, кислот

Опубликовано: 30.12.1993

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1640995-sposob-gibridizacii-dezoksiribonukleinovykh-kislot.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ гибридизации дезоксирибонуклеиновых кислот</a>

Похожие патенты