Способ определения теофиллина в плазме крови

, СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК А 1 М 334 ИЕИ БРЕ ЕНИ 0-14(56) Тгц 1 и ЕКгам 1,С.ТЬеорйуИ 1 пеТ 11 егарец 1, 1 Бюл. % 39 ий медицинский ин оров и Э.Я.Морозо 088.8).ВСагг 1 г.С.1., В Оцап 01 а 11 че Езс 1 и В 1 ооб. - ,1. рйа 947, М 91, р, 185. тИтува Ьеп Н.М п 1 аг 1 оп о васо 1, ех СПОСО В ПЛАЗ ПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕОКРОВИ Л ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССРОПИСАН К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ Изобретение относится к медицинеменно к клинической биохимии. Целью изобретения является повыш ие точности и ускорение способа, Способ осуществляют следующим обром Плазму крови осаждают смесью вода - серная кислота - вольфрамат натрия в соотношении 1:1:1, центрифугируют, центрифугат обрабатывают последовательно растворами хлорамина Б и щелочным раствором тимола, нагревают и фотометрируют полученный окрашенный раствор при 1=458 нм,Способ быстро выполним, используемые реактивы доступны и дешевы. Точность способа составляет 0,77%, прототипа 9,60. Нижняя граница определения 2 мкг теофиллина на 2 мл плазмы крови.Способ является избирательным, основанным на высокоспецифической химической реакции. Определению теофиллина не мешают кофеин, кофеин-бензоат натрия, теобромин, дипрофиллин, мочевая кислота, мочевина, аллоксан, пуриновые и пирими(57) Изобретение относится к медицине, точнее к клинической биохимии. Способ включает обработку плазмы крови смесью вода - серная кислота - вольфрамат натрия, центрифугирование пробы, обработку центрифугата хлорамином, щелочным раствором тимола и фотометрирование при =458 нм. Способ обладает высокой чувствительностью (0,2 мкг/мл), простотой и доступностью выполнения (время определения 25 мин) и может быть использован в клинико-биохимических исследованиях, контрольно-аналитических лабораториях. 2 табл. диновые основания и их нуклеозиды и нуклеотиды, барбитураты, этилендиамин, ряд других лекарственных препаратов.П риме р, К 2 мл плазмы крови прибавляют 2 мл дважды перегнанной воды, перемешивают, прибавляют 2 мл 2/3 й серной кислоты и снова перемешивают. После этого по каплям прибавляют, перемешивая, 2 мл 10 ф -ного раствора вол ьф ра мата натрия. Смесь хорошо перемешивают и центрифуги руют 10 мин при 6000 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, отмеривают 6 мл и переносят в пробирку, прибавляют 3 мл 10%-ного водного раствора хлорамина Б, перемешивают и оставляют в штативе. Через 2 - 3 мин прибавляют 1 мл 0,4%-ного водного раствора тимола в 15%-ном растворе гидроксида натрия, смесь перемешивают и помещают в водяную баню на 20 мин при 60 С. Окрашенные растворы охлаждают и измеряют оптическую плот:. зсть при 458 нм, например, на ФЭКМ (светофильтр 1 ч. 4, кювета толщиной слоя 20 мм) относительно раствора сравнения, который представляет смесь реактивов; 2 мл 2/3 й серной кислоты,Та,бл и ца 1 е . Х - среднийЯх - стандартн Е 0,95 ТОЧНОСТЬ О Еот - относитель еления; реднего результата; ультат опредотклонениееделения;я дисперсия и меч ан 2 мл 10-ного вольфрамата натрия, 2 мл воды и т.д., как указано, Количественную оценку концентрации теофиллина проводят по калибровочному графику, для его постро;вния в пробирки вносят различные объемы. стандартного раствора теофиллина с содержанием 1 - 80 мкг (при определении тера 1 певтических доз теофиллина в крови ,достаточно интервала 1 - 30 мкг), доливают 1 водой до 6 мл и проводят определение, как описано. При нахождении содержания теофиллина в анализируемой пробе вычитают величину 0,07 (поправка на оптическую плотность контроля - плазмы крови беэ теофиллина) от измеренного значения оптиче-СКОЙ ПЛОТНОСТИ.Результаты определения теофиллина в :, модельных водных растворах и статистиче, :ская обработка приведены в табл.1.Предлагаемый способ позволяет опре,делять от 1 до 80 мкг теофиллина в 10 мл 1 конечного объема. Время определения до 25 мин (при 45 мин по прототипу).Способ прост и доступен в выполнении, ;. позволяет проводить серийные анализы.По разработанному способу было взято , несколько различных образцов донорской крови, из которой центрифугированием от;: деляли плазму, в отдельные пробы которойдобавляли разные количества теофиллина,а далее поступали, как описано, Данные приведены в табл.2.Метрологическая характеристика указывает на хорошую воспроиэводимость и 5 точность результатов определения теофиллина.Расчет содержания теофиллина Х в 1 млплазмы крови проводят по формуле где Сх - концентрация теофиллина (мкг), найденная в анализируемой пробе по ка либровочному графику.формула изобретения Способ определения теофиллина вплазме крови путем последовательной обработки анализируемой пробы химически ми реагентами и фотометрированиемполученного окрашенного раствора, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения и повышения точности способа, осаждение плазмы крови проводят смесью вода - 2/3 И 25 серная кислота - 10-ный раствор вольфрамата натрия в соотношении 1:1:1, а обрабатывают центрифугат хлорамином, затем щелочным раствором тимола, нагревают и фотометрируют при А = 458 нм.30 и цдля вероятности 95). Т.аблица 2