Способ получения а-дегидрокортизона (преднизона)

431 Союз Советских оцнелнстнческн РвопублнкО ВРЕТЕ Зависимое от авт, свидетельства Заявлено 25.Х 1,1961 ( 753087/ о, 25/02о, 25/07т, 6 С 07 с С 07 с А 611 Номнтет по делав зооретеннй н открыт прн Совете тйннкотро СССРиоритетубликовано 02.1.1967. Бюллта опубликования описания Авторыизобретения колова, В. М. Рыжки Г. К. Скрябин, Н. Н. Лестровая Заявитель СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Д-ДЕГИДРОКОРТ(ПРЕДНИЗОНА) А присоединением заявкиИзвестен способ получения Д-дегидрокортизона (преднизона) из кортизон-ацетата с помощью его микробиологического дегидрирования и омыления смесью культур СогупеЬас 1 епцгп згпр 1 ех и Вас 1 цз гпедайегцтп. 5Известен также способ получения Д-дегидрокортизона (преднизона) путем микробиологического дегидрирования с одновременным дезацетилированием ацетата кортизона с помощью смешанной культуры МусоЬас 1 епцгп 10 ИНМИ и Вас 11 цз тпедайегшгп (штамм В НИХФИ) .Предлагаемый способ получения Д-дегндрокортизона (преднизона) позволяет устранить использование спорообразующей культу ры, стандартизировать и упростить процесс ферментации, а также облегчает извлечение и химическую очистку готового продукта.Отличительная особенность способа получения Д-дегндрокортизона (предннзона) заклю чается в том, что получение преднизона ведется с помощью стерильного ферментного препарата, полученного из Вас 1 цз тперайегшп. Согласно предложенному способу, ферментный препарат получают из Вас 11 цз гпедайе пцгп путем обработки в асептических условиях бактериальной массы 10-кратным объемом охлажденного ацетона с последующей обработкой осадка охлажденной смесью ацетона и эфира (1:1), эфиром и высушиванием на 30 воздухе. Для получения Д-дегидрокортизона (преднизопа) из ацетата кортизона с помощью культуры МусоЬас 1 егшгп Яр. Ии ферментного препарата из Вас. тпедайепцш в ферментатор загружают раствор стерильного фосфатного буфера, стерильный ферментный препарат и растворенный в ацетоне ацетат кортизона. Процесс ведут при 28 С в течение 20 час, после чего добавляют суточную культуру МусоЬас 1 егшгп Яр, Ки ведут процесс еще 2 час. По окончании процесса дегидрирования образовавшийся преднизон извлекают хлороформом и перекристаллизовывают из изопропилового спирта.П р и м е р 1. Приготовление ферментного препарата из Вас. гпедайепцгп,Для получения исходной беспоровой культуры Вас. тпеда 1 Ьегшгп колбу с питательной средой следующего состава, Я,: пептон - 1, глюкоза 3, КНзРО, - 2 при рН 6,7, засеьшот одной 17 - 19-часовон колонией Вас. тпедайегшгп, выращенной на кукурузно-глюкозном агаре при 28 С, Колбу встряхивают на качалке при 28 С в течение 17 - 20 час.Для приготовления стерильного ферментного препарата бактериальную массу собирают центрифугированием и обрабатывают 10-крат. ным объемом охлажденного до 10 - 15 С ацетона, Осадок переносят на воронку Бюхнера и промывают последовательно охлажденнойПредмет изобретения Составитель С, ПыжевТекред Т. П, Курилко Корректоры; Н. В. Черетаеваи Е, Н. Гудзова Редактор Л, Ильина Заказ 1942/1 Тираж 535 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, Центр, пр. Серова, д. 4 Типография, пр. Сапунова, 2 месью ацетона и эфира (1: 1) и эфиром. Препарат подсушивают на воздухе 15 - 20 ласн и хранят в холодильнике, Весь процесс получения ацетонового препарата проводят в стерильных условиях (стерильная посуда и кварцевая лампа). Препарат сохраняет активность, по крайней мере, в течение 3 месяцев (оолее длительный срок хранения не проверялся).Пример 2. Проведение процесса дегидри. ровапия и дезацетилировапия ацетата корти- зона.В ферментер, снабженный мешалкой, барботером и обогревом и заполненный 5 л стерильного фосфатного буфера (рН 6,7), вносят 7 г стерильного ферментного препарата, после чего добавляют 0,5 г ацетата кортизона, предваригельно растворенного в 100 мл аце тона. Процесс проводят при 28 С в течение 20 час, затем добавляют 1 л суточной куль. туры МусоЬас 1 ег 1 цгп 5 р. Хи продолжают ферментацию еще 2 час. Контроль за ходом процесса осуществляют путем хроматографии на бумаге в системе формамид-бензол и проявления пятен раствором Люголя. По окончании процесса дегидрирования образовавшийся преднизоп извлекают хлороформом и перекристаллизовывают из изопропилового спирта.Получают 0,3 г преднизопа с т. пл. 230 С,полностью удовлетворяющего требованиям Британской фар:,1 акогеи 1958 г.10 Способ получения Л-дегидрокортизона(преднизона) путем одновременного микро биологического дегидрирования и дезацетилирования ацетата-кортизона с помощью культуры 1 ЧусоЬас 1 ег 1 шп 5 р. Х, отличаЮщийся тем, что, с целью устранения использования спорообразующей культуры, процесс ве дут с помощью ферментного препарата, полученного из Вас. гпеда 1 Ьег 1 цгп,