Способ моделирования эластолиза бронхолегочной системы

.)фчп следоваских метод иматологии ескои активности в легки Изобрете рования до стрируемоодел ние сокращае 2-3 ч, а при срокиразвито 1-2 г, Век )3 и рег ут, п эласт воляет рего процесса зоп ную истрироватьктивность. е Ю ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ САНИЕ ИЗО ТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(54) СПОСОБ МО БРОНХОЛЕГОЧНОЙ (57) Изобретен ментальной мед животному в пр инородное тело ходит 12-14-кр 1 ЕЛИРОВАНИЯ ЭЛАСТОЛИЗА СИСТЕМЫие относится к экспери цине. Лабораторному освет трахеи вводятЧерез 24-48 ч происатный рост эластолити 1394226еИзобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к моделированию патологических процессов, и может быть использовано для моделирования эластолиза бронхолегочной системы у лабораторных животных,Цель изобретения - приближение модели к естественной патологии за счет активации эластолитических ферментов Ы к.чо.Способ осуществляют следующим об 5 10 разом.Лабораторное животное наркотизируют и после фиксации через прокол иг лой в просвет трахеи в стерильных условиях вводят инородное тело (капроновая нить) так, чтобы оно частично обтурировало просвет одного из главных бронхов или находилось на уровне 20 бифуркации трахеи. Фиксацию проксимального конца нити осуществляют к мышечной ткани в районе, места прокола трахеи. Через 24-48 ч происходит 12-14-кратный рост эластолитической 25 активности в легких. В сроки до 24 ч проведение исследований нецелесообразно, так как это время необходимо для развития эластолиза и изучения влияния на его развитие применяемых 30 факторов,П р и м е р. Белой беспородной крысе массой 200 г под эфирным наркозом в стерильных условиях обнажают участок трахеи и делают прокол инъек ционной иглой, Через отверстие в просвет трахеи вводят капроновую нить диаметром 0,2-0,3 мм и длиной 2,5-3,0 см. Через 24-48 ч животное забивают путем кровопускания, выделяют легочно-сердечный комплекс и производят бронхоальвеолярный лаваж путем 8-10-кратного промывания легких физиологических раствором в объеме 10 мл. После центрифугирования смыва 45 при 5000 об/мин в нем производят измерение эластолитической активности по расщеплению синтетического субстрата и-нитрофенилового эфира И-бутилоксикарбонил-Ь-аланина (БАНФЭ).Для его осуществления в термостатированной кювете спектрофотометра (25 С) смешивают 0,1-1,0 мл бронхоальвеолярного секрета с 0,05 М натрийфосфатным буфером (РН 6,5) до ко нечного объема пробы 2,9 мл. Пробу вьдерживают в течение 5 мин., после чего к ней добавляют 0,1 мл 0,01 М раствора БАНФЭ (6,2 мг БАНФЭ раство ряют в 2,0 мл ацетонитрила). Прирост оптической плотности измеряют на спектрофотометре СФпри 347,5 нм против контрольной пробы, содержащей только реактивы, делая отсчеты через 1-2 мин в течение 8-10 мин. Из линейного хода кривой накопления продукта реакции во времени находят прирост оптической плотности ЬАвф, пробе за 1 мин.Эластазоподобную активность (ЭПА) вычисляют по формулеь Азефов546ЭПАК 1 Формула и з о б р е т е н и я. Способ моделирования эластолизабронхолегочной системы путем активации эластолитических бронхолегочныхферментов лабораторного животного,отличающийся тем, что, сцелью приближения модели к естественной патологии за счет активации эластолитических ферментов п что, втрахею вводят инородное тело и выдерживают 24-48 ч,где К - Объем, мл, или количествобелка, мг, бронхоальвеолярного смыва, взятого для анализа;546 - коэффициент пересчетаЬА, нмоль гидролизованного БАНФЭ,Результаты выражают в нмоль/мл илинмоль/мг белка смыва за 1 мин.У ПОДОПЫТНОГО ЖИВОТНОГО Ь А 4составляет 0,0214 ед. ОП/мин, объемсмыва равняется 0,5 мл, следовательно, ЭПА 23,37 нмоль/мл.мин, что в14 раз превышает норму, которая поданным контрольной группы составляет1,62+0,27 нмоль/мл мин/см, акт лабораторных испытаний.При проведении моделирования затраты времени сокращаются с 3-5 дн.при осуществлении известного способадо 2-3 ч при осуществлении предлагаемого способа, а при развитии регистрируемого процесса с 1-2 мес, по известному до 1-2 сут по предлагаемомуспособу,Предлагаемый способ позволяет также приблизить модель к моделируемомупроцессу, поскольку активация суммыэластолитических ферментов, участвующих в развитии эластолиза бронхолегочной системы, осуществляется ьп ч. -чо и в конечном результате регистрируется, эластазоподобная активность,