Способ выделения яиц описторхов

СОЮЗ СОВЕТСНИХКЬЛаМ 4 ейеРЕСПУБЛИН 1386169 193 61 0 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕ ИТЕТ СССРТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ОБРЕТЕН ю ь сЦ с(53) (56) ства видов ников еские св некоторых как источ а при опис- Диссерта- к-та торхо ция н биоло 151. ОПИСАНИЕ К АВТОРСКОМУ С 016406/28-146.06.867.04.88. Бюп. Ф 13аучно-исследовательсидемиологии, микробыкционных болезней.В.Теплухин и Б.В,Ка12.015(088.8)ривеико В. В. Биологииц описторхов и рольокончательных хозяевинварионного материале в Западной Сибири.соиск. учен. степеннаук, Тюмень, 1984(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ЯИЦ ОИИСТОРХОВ(57) Изобретение относится к медицинеи ветеринарии, точнее к паразитологии.Предназначено для приготовления антигенных препаратов и получения нммунных сывороток. Цель изобретения - повышение выхода и упрощение способапутем разрушения тел описторхов,суспендированных в 5-25 мл 0,857.-ногор-ра ИаС 1. Проводят ультразвуковуюдезинтеграцию с помощью экспоненциального излучателя при частоте 44 мГц,мощности 65-70 Втсм, длительностиобработки 10-20 мин, концентрациивзвеси 1,2 описторха в 1 мп. Количество одномоментно подвергаемых обработке онисторхов 80-100 шт. Тела гельминтов разруваются полностью, целостность яиц сохраняется. 1 табл,1386 169 емя выдения, мин 300-350 Количествовыделенныхяиц Чистота вы деленных 100000 10800 1 репарат Препар чистый чистый Изобретение относится к медицинеи ветеринарии, в частности к паразитологии, и может быть использованопри приготовлении антигенных препаратов и получении иммунных сывороток.Целью изобретения является повыпение выхода и упрощение способа.Поставленная цель достигаетсяпутем разрушения тел описторхов, сус Опендированных в 5-25 мл 0,85 Х-ногораствора хлорида натрия, ультразвуковой дезинтеграцией с помощью экспоненциального излучателя при частоте44 кГц, мощности 65-70 Вт/см, длительности обработки 10-20 мин, концентрация взвеси,2 описторха в 1 мл.Количество одномоментно подвергаемых обработке описторхов 80-100 шт.При этом полностью разрушаются тела 2 Огельминтов, но сохраняется целостность яиц.П р и м е р 1. 100 описторков в50 мл 0,85 -ного раствора хлорида натрия подвергли ультразвуковой дезин , теграции при помощи прибора УЗДН в рабочем режиме: частота 44 кГц,мщность 70 Вт/см, время обработки20 мин. Ультразвуковая обработкагельминтов в данном режиме обеспечи- ЗОла полное разрушение тел паразитов,но сохранила целостность яиц описторхов. После дизентеграции взвесьяиц описторхов перенесли в пробирки и центрифугировали при 1000 об/минЗ 5в течение 3 мин. Осадок, состоящийиз целых яиц, трижды промывали0,85 -ным раствором хлорида натрияс неустановленным рН центрифугированием при 1000 об/мин в течение 4 О2-3 мин, Полученные яйца описторховдо использования хранили в 0,85-номрастворе хлорида натрия при -20 С,Одновременно из 100 описторхисоввыделяли Яйца по известному способу. 4Чистоту препаратов яиц оценивалипо наличию частей тел описторхов,устанавливаемомумикроскопически.Данные,характеризующие предлагаемы и известный способы, приведены в таблице,Из таблицы видно, что затраты, времени при использовании предлагаемого способа в сравнении с известным снизились в 10 раз, количество выделенных яиц (выход целевого продукта) по предлагаемому способу увеличилось55 практически в 2 раза.П р и м е р 2, Способ осуществляли при различной частоте - 22 и 44 кГц (значения частоты определяются фиксированными характеристикамиотечественного диспергатора УЗДН,где 44 кГц - максимальная частота),мощности 50, 60, 65, 70 и 80 Вт/см,длительности 10, 20 и 30 мин, объеме5,25 и 50 мп и концентрации взвесиописторхов 1,2 и 3 в 1 мл. Эффективность различных режимов дезинтеграции оценивали по минимальной необходимой длительности обработки, чистоте препарата яиц и целостности яиц.С учетом целесообразности обеспечения наименьшей длительности обработки, наибольших объема и концентрации взвеси описторхов следует, чтооптимальными являются следующие параметры дезинтеграции: частота 44 кГц,мощность 65-70 Вт/см, длительностьобработки 20 мин, объем взвеси 525 мл, концентрация 1-2 оп исторха в 1 мл,Таким образом, применение простого метода ультразвуковой дезинтеграции тел описторхов в выбранном режиме обеспечивает эа короткое время ипри очень небольшой трудоемкости по"лучение сравнительно больших количеств яиц гельминтов. При этом выходяиц из одного и того же количестваописторхов повышается практическив два раза.Формула изобретенияСпособ выделения яиц описторховпутем разрушения тел описторхов, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения выхода и упрощения способа, разрушение проводят с помощьюультразвуковой дезинтеграции, приэтом взвесь описторхов в количестве5-25 мл, суспендированных в 0,853-номрастворе хлорнда натрия при концентрации 1-2 описторха в 1 мл, обрабатывают ультразвуком при частоте44 кГц и мощности 65-70 Вт/см в течение 10-20 мин,