Способ выявления микобактерий туберкулеза в биологических пробах

(504 С 0 И ИСАНИЕ ИЗОБРЕТ 57 Изобре цине, точнее кретения - повыш ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(56) Т 1 еСя С., Неер 1 Р. Вакгег 1 озЕорзЬег ТцЪегЕе 1 Ьаг 11 еппас 1 п 7 е 1 з цпйМешЬгапй 11 гег ацз йеш 1,).опог ЬехгцЬегКц 1 озег Меп 1 пкгСдз Мей 1 ггп 1 зсЬеК 13.п)Лс, 1950,45, 4.(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ МИКОБАКТЕРИЙТУБЕРКУЛЕЗА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ПРОБАХ ние относится к медифтизиатрии. Цель изобение. точности способа 3путем лучшей дифференцировки микобактерий от других видов непатогенных микроорганизмов в среде, дополнительно содержащей глицерин, 96-градусный спирт и карболовую кислоту. Для этого мембранный фильтр, через который пропускают образец смешанной культуры микобактерий туберкулеза и Е.со 11, окрашивают подогретым дс 60 С карбоьловым фуксином Циля с содержанием следующих реактивов, мл: основной фуксин 0,2-0,5 г, глицерин 0,002- 0,005; этиловый спирт 2-5, карболовая кйслота 1-25, вода до 100. После обесцвечивания 2 Е-ной азотной кислотой и отмывки водой препарат докрашивают 0,01 П-ным р-ром метиленовой сини, При скопин фиксируют кол-во микробактерий туберкулеза и клеток Е.со 1 д в 100 полях зрения.1328732 Формула изобретения Составитель М.ПознякТехред М.Ходанич РедакторП.Гереши Корректор Г.Решетник Заказ 3479/47 Тираж 776 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к медицине,а именно к фтиэиатрии.Цель изобретения - повышение точности способа эа счет лучшей диффе 5ренцировки микобактерий от другихвидов непатогенных микроорганизмовв среде, дополнительно содержащейглицерин, 9 С градусный спирт и карболовую кислоту. 10П р и м е р 1. Мембранный фильтр,через который пропускают образец смешанной культуры микобактерий туберкулеза и Е,со 11, окрашивают подогретым до 60 С карболовым фуксином Циляс содержанием следующих реактивов,мл; основной фуксин 0,3 г, глицерин0,003, этиловый спирт 3,3, карболовая кислота 1,7, вода до 100. Послеобесцвечивания 2%-ной азотной кислотой и отмывки водой проводят докрашивание 0,017 -ным раствором метиленовой сини.При скопии фиксируют 100 микобактерий туберкулеза и 50 клеток Е,со 11 25в 100 полях зрения.П р и м е р 2, Мембранный фильтр,через который пропускают образец смешанной культуры микобактерий туберкулеза и Е.со 11, окрашивают подогретым до 60 С фуксином Циля со следующим содержанием реактивов, мл: основной фуксин 0,5 г, глицерин 0,005,этиловый спирт 5,0, карболовая кислота 2,5, вода до 100. После окрашива 35ния мембрану обесцвечивают 27-нойазотной кислотой, отмывают водой идокрашивают 0,02 -ным раствором метиленовой сини.При скопии фиксируют 20 микобактерий туберкулеза и 10 клеток Е.со 1 дв 100 полях зрения, т.е. из-за темноокрашенного поля количество просчи.танных клеток более низкое, чем впримере,1,П р и м е р 3Мембранный фильтр, через который пропускают образец смешанной культуры микобактерий туберкулеза и Е.со 1, окрашивают подогретым до 60 С фуксином Циля со следующим содержанием реактивов, мл: основной фуксин 0,2 г, глицерин 0,002,этиловый спирт 2,0, карб новая кислота 1,0, вода до 100. После обесцвечивания 2,5%-ной азотной кислотой и отмывки мембраны водой проводят допрашивание 0,014%-нымраствором метнленовой сини.При скопин фиксируют 20 микобактерий туберкулеза и 30 клеток Е.со 11, т,е. из-за низкой концентрации красителей не все клетки прокрашены. Способ выявления микобактерий туберкулеза в биологических пробах путем концентрации клеток на мембранном фильтре, окрашивания в подогретой среде, содержащей фуксин, с по" следующим обесцвечиванием мембраны, микроскопированием и выявлением микобактерий туберкулеза по наличию окрашенных клеток, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа за счет лучшей дифференцировки микобактерий от других видов непатогенных микроорганизмов, среда дополнительно содержит глицерин, 96 градусный спирт и карболовую кислоту при следующих соотношениях компонентов, мас.7.:Фуксиносновной 0,2-0,5Глицерин 0,002-0,00596 градусный.спирт 2-5Карбоноваякислота 1-25Вода Остальное а обесцвечивание фильтра проводят в 2-2,5 .-ном растворе азотной кислоты, при этом до микроскопирования микобактерии докрашивают 0,014- 0,02%-ным раствором метиленовой сини.