Способ определения функциональной активности фагоцитирующих клеток

,08.86.й Ленинграсного 3 дена Трудоицинский авловаТотолян гояе шеаяцоцз опцс 1 е ш 165 КЦИОНАЛЬКЛЕТОКиммуноорениесполь цитов. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(56) Ие 1 яоп К.Р., Яцз.е Р,С.,ця К,Е. - СЬешогахя цпс 1 ея аяа пею апй зЬпр 1 е шегЬод Гогггпу сЬешогах 1 я апд яропгапедпЦгаг 1 оп оГ Ьцшап ро 11 шогрЬ1 ецсосугез апй 1 попосугея.шцпо 1 ору, 1975, 155, 9 6, с1656.(57) Изоблогии. Це ки упрощен изования ц Готовят чашки Петри со стандартными лунками в агарозной среде. При спонтанном осаждении эритроцитов в растворе желатины получают лейковэвесь. Готовят рабочую концентрацию лейкоцитов 5 10 кл/мв среде 199. Клетки вносят в лунки. Затем чашки инкубируют в течение 6 и 24 ч. После этого клетки фиксируют раствором формалина. Удаляют агарозу. Чашки отмывают, высушивают. Спонтанную миграцию оценивают при микроскопии, измеряя зону миграции с помощью окуляр-микрометра, Величину спонтанной микрации (СМ) клеток крови больных и первого из доноров сравнивали щФ со СМ клеток второго донора. Принимают СМ клеток второго донора равной 1,0. Высчитывают индекс спонтан Сф ной миграции по отношению величины СМ клеток больного к величине СМклеток донора;Изобретение относится к мецицине, в частности к иммунологии.Целью изобретения является ускорение и упрощение способа за счет использования цельной взвеси лейкоВеличину спонтанной миграции (СМ) клеток крови больных и одного из доноров сравнивают со СМ клеток второго донора, принимая миграцию клеток второго донора равной 1,0. Высчитывают индекс спонтанной миграции (ИСМ) путем деления величины СМ клеток больного на величину СМ клеток донора.П р и м е р 1. Больная У 41 года, диагноз бронхиальная астма Составитель В.Решетняк Техред И.Попович Корректор М.Максимишинец Редактор М.Циткина Заказ 4714/48 Тираж 778 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 цитов,Способ осуществляют следующимобразом,Готовят чашки Петри (40 мм) состандартными лунками в агарознойсреде, состоящей из 250 мг агарозы(ЧССР), 23,0 мл дистиллированнойводы, 3,0 мл 10%-ного концентратасреды 199, 3,0 мл сыворотки человекаи 0,6 мл 7,5%-ного раствора бикарбоната натрия (расчет на 10 чашек).Лейковзвесь получают спонтаннымосаждением эритроцитов в растворежелатины. Готовят рабочую концентрацию лейкоцитов 5 10 кл/мл в среде199Клетки вносят в лунки, послечего чашки инкубируют при 37 С вувлажненной атмосфере воздуха, содержащей 5% СО, в течение 6 и 24 ч,После инкубации клетки фиксируют45%-ным раствором формалина 15 мин,удаляют механическим путем агарозу,чашки отмывают под струей теплойводы и высушивают. Спонтанную миграцию оценивают при микроскопии(МБС,56-кратное увеличение), измеряя зону миграции с помощью окулярмикрометра. 54388 2инфекционно-зависимая, средней степени тяжести, фаза ремиссии,При обследовании; ИСМ гранулоцитов 2,9, мононуклеаров 1,5; лейкоцитов (б ч) 5,0, лейкоцитов (24 ч)1,8.Таким образом, как в способепрототипе, так и в предлагаемом способе выявлена существенная стимуля 1 О ция миграционной активности клетоккрови.П р и м е р 2, Больная Ш, 25 лет,диагноз бронхиальная астма атопическая, средней степени тяжести,15 фаза ремиссии.При обследовании: ИСМ гранулоцитов 0,21; мононуклеаров 0,3, лейкоцитов 0,25 (инкубация 5,5 ч); лейкоцитов 0,4 (инкубация 23,5 ч).20 Таким образом, при обследованииобеими способами выявлено угнетениемиграционной активности всех видовклеток.П р и м е р 3, Донор К, 25 лет,25 практически здоровый человек.При обследовании: ИСМ гранулоцитов 0,9; мононуклеаров 1,0, лейкоцитов 6,5 ч 1,05, лейкоцитов24,5 ч 0,95.30Формула изобретения Способ определения функциональнойактивности фагоцитирующих клетокпутем инкубирования гранулоцитови мононуклеаров крови под агарозойс последующей оценкой результатов ихспонтанной миграции, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, из крови 40 выделяют взвесь лейкоцитов, затеминкубируют ее в течение б+0,5 ч иопределяют миграцию гранулоцитов, далее инкубируют пробу дополнительно18+0,5 ч и определяют спонтанную миграцию мононуклеаров.