Штамм аф591 вируса гриппа, используемый для получения противогриппозной инактивированной вакцины

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН К АВТОРСКОМ ЕТЕЛЬСТВ(53) 615.372(0888 (56) Авторское свид У 1056636, кл. С 1 тельство СССР Б 7/00, 1983. ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ юл. У 11(71) Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины, Ленинградский научно-исследовательский институт вакцин и , сывороток и Московский научно-исследовательский институт вирусных препаратов(54) ШТАММ А/Ф/59/1 ВИРУСА ГРИППА,ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВОГРИППОЗНОЙ ИНАКТИВИРОВАННОЙ ВАКЦИНЬ(57) Штамм А/Ф/59/1 вируса гриппаГКВ У 1872 (Государственная коллекция вирусов Института вирусологииим. Д.И.Ивановского), используемыйдля получения противогриппозной инактивированной вакцины.5 10 Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в области приготовления противовирусных вакцин.Целью изобретения является штамм А/Ф/59/1 вируса гриппа, предназначенный для получения противогриппозных инактивированных вакцин,Для этого эталонный штамм А/Фи -липпины/2/82,непригодный для производства вакцин вследствие низкойактивности репродукции в куриныхэмбрионах (инфекционный титр не превышает 7,0 1 я ЭИД 50/0,2 мл и гемагглютинирующий титр в пределах1".64-1:128), рекомбинируютс лабораторным штаммом - донором свойств,высокой репродуктивнасти в куриныхэмбрионах А/РК/8/59/1, Лабораторныйштамм А/РК/8/59/1 является халодоадаптированным вариантом известногоштамма А/РК/8/34 и характеризуетсявысокими показателями репродукции.ов куриных эмбрионах при 34-36 С (инфекционный титр 10,0 18 ЭИД 50/0,2 мли титр накопления гемагглютинина1:2048), температурочувствительнастью репродукции (при 40 С инфекцианоный титр снижен на 8,0 1 я ЭИД 50) ипониженным уровнем патогенности длякуриных эмбрионов,Технология получения рекомбинантного вакционного штамма включаетсовместное культивирование в куриных эмбрионах эпидемического и лабо-раторного штаммов, приводящее кобмену генетической информации между ними. В результате клонированияпредельными разведениями выделенклон А/Ф/59/1, обладающий комбинацией полезных признаков, а именноантигенными свойствами современного,возбудителя А/Филиппины/2/82 и репродукционной активностью лабораторного штамма.Репродукционная активность штаммаА-Ф/59/1 в куриных эмбрионах послеОих инкубации при 35 С в течение48 ч характеризуется инфекционнымтитром вируса 9,5 - 10,5 1 яЭИД 50/б,2 мл и гемагглютинирующимтитром 1:1024. Рекамбинантный клон А/Ф/59/1 унас 1 ледовал также от лабораторного штамма высокий уровень температура- чувствительности и низкий уровень патогенности для куриных эмбрионов (4,0 1 я ЛД 50).Антигенная структура - Н 3%2, В перекрестной РТГА штамм взаимодействует с антисывороткой к вирусу А/Филиппины/2/82 до гомологичного титра, сыворотка к штамму А/Ф/59/1 также реагирует с эпидемическим штаммом А/Филиппины/2/82 до гомологичного титра, В реакции подавления нейраминидазной активности со штаммом взаимодействует имунная сыворотка СДС(Не У 2) до титраЧ1:128 и не взаимодействует антисыворотка к штамму А/РК/8/59/1.Штамм А/Ф/59/1 чувствителен к-ингибиторам нормальной кроличьей сыворотки, ингибирующей вирус дотитра 1:640,Морфология штамма А/Ф/59/1. Полимарфная структура, типичная длявируса гриппа,Штамм проявляет стабильность основных генетических свойств на протяжении пяти пассажей на куриныхэмбрионах.П р и м е р. Группе из десяти куриных эмбрионов вводят в аллантоисную полость вирус А/Ф/59/1, взятыйв объеме 0,2 мл при концентрации1 ЭИД 50 Эмбрионы инкубируют прио34 С в течение 48 ч. В аллантоиснойжидкости, отобранной от каждого куриного эмбриона раздельно, гемагглютинин выявлен в разведении 1:2048в трех пробах, 1:1024 в пяти пробахи 1,512 в двух пробах, Инфекционный титр вируса в трех пробах достигает 10,5 18 ЭИД 50/0,2 мл, в пятипробах 10,0 1 я ЭИД 50/0,2 мл и в двухпробах 9,5 1 Р ЭИД 50/0,2 мл.Равноценной группе куриных эмбрио.нов в той же дозе и объеме вводят родительский вирус А/Филиппины/2/82. Из д сяти проверенных проб аллантоиснай жидкости в трех геммагглютинин содержится в титре 1-: 128, в шести пробах - в титре 1:64 и в одной - в титре 1;32. Инфекционный титр вируса во всех пробах не превышал7,0 1 Р ЭИД 50/0,2 мл,Штамм соответствует по антигенной структуре актуальным эпидемическим вирусам, чта позволяет создатьболее эффективную защиту против современного гриппа А при использовании штамма в качестве инактивираван,ной вакцины,