Способ получения растворимой фракции костных клеток
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1175481
Авторы: Власов, Переслыцких, Сысоев
Текст
)4 А ЕТ СССРОТНРЫТИЙ ОСУДАРСТВЕННЫИ КОМ О ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ э.,Д 4;1САНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ЬСТ РАСТВ- ОКЛЕТО, отличаюя чистоты ь животпри 12 - а затем - 60 мин ЕНИЯ НЫХ смеси, ышени ю тка чала 0 мин ние 50 Переслыцк ательски ни и Ин растени ирование мбранныхметоды. льнои и тельной Н АВТОРСКОМУ СВИ(71) Иркутский научно-исследовинститут травматологии и ортопедститут физиологии и биохимииСО АН СССР(56) Любимова Н. В. Фракционбиологических экстрактов на мефильтрах. - В кн: БиохимическиеМ.: Наука, 1980, с. 25.Слуцкий Л. И. Биохимия нормпатологически измененной соединткани. М,: Медицина, 1969, с. 20. 801175481(54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧ РИМОЙ ФРАКЦИИ КОСТ включающий охлаждение иийся тем, что, с целью пов целевого продукта, костну ных центрифугируют сна 15 тыс. Р в течение 5 - 1 при 24 - 28 тыс. д в тече при 0 - 4 С.1175481 Составитель В. КаюковаТехред И. Верес Корректор И МускаТираж 722 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и о 1 крытии113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Редактор И. Рыбченко Заказ 5247(б Изобретение относится к медицине и биологии, а именно к биохимии, и может быть использовано для изучения активности ферментов и их комплексов, например системы гликолиза, в растворимой фракции костной ткани.Целью изобретения является повышение чистоты целевого продукта.Пример 1. Бедренная кость крысы, механическии очищенная от периоста, мышц, сухожилий, вес пробы 0,141 г, холодовая комната 0 - 4 С. Пробу фиксируют во фторопластовой кювете и помещают в центрифужную пробирку, которую вставляют в предварительно охлажденный до 2 С ротор центрифуги ЦЛР. На пробу воздействуют гравитационным полем величиной 13 тыс. д в течение 7 мин при 0 - 4 С. При этом жесткий каркас кости освобождается от сопутствуюгцих клеточных элементов (клеток крови, костного мозга), о чем свидетельствует следовая активность каталазы в очищенной пробе как маркера загрязняющих клеток. Затем очищенную пробу снова фиксируют во фторопластовой кювете и помещают в пробирку, содержащую около 1 мл 0,25 М сахарозы, 0,05 М трис-НС 1 буфера (рН 7,40, измеренный прецизионным рН-метром фирмы Радиометр), 0,001 и ЭДТА. При этом нижний край пробы соприкасается с поверхностью раствора. Затем пробу центрифугируют и той же центрифуге при 26 тысд 55 мин при 0 - 4 С. После остановки ротора в буферном растворе определяют активность ЛДГ спектрофотометрически по изменению оптической плотности при 340 нм. Для 0,4 мл анализируемой пробы (соответствует 0,062 г костной ткани) изменениеоптической плотности при 340 нм (ЛЕз 4 о)составляет за 3 мин 0,080. Активность фермента (выраженная величиной измененияоптической плотности в мин на грамм влажной ткани) 0,430 ед. Оставшуюся часть пробы используют для выявления возможногозагрязнения растворимой фракции другимифракциями клетки. Загрязнения растворимой10 фракции маркерными компонентами другихфракций не обнаружено.Пример 2. Бедренная кость крысы, вес0,145 г, Образец кости обрабатывают какв примере 1 в холодовой комнате при0 - 4 С, Первое центрифугирование проводят15при 12 тыс. д в течение 5 мин при 0 - 4 С.оАктивность каталазы как индикатора загрязнения костной ткани следовая, Второе центрифугирование проводят при 24 тыс.д в течение 50 мин при 0 - 4 С. Активность ЛДГ,20 определенная в буферном растворе описанного состава, 0,408 ед. Загрязнения растворимой фракции мембранными фракциями необнаружено.Пример 3. Бедренная кость крысы, веспробы 0,140 г. Образец кости обрабатывают как в примере 1, в холодовой комнатепри 0 - 4 С. Первое центрифугирование проводят при 15 тыс. д в течение 10 мин при0 - 4 С. Активность каталазы в очищеннойпробе не определяется. Второе центрифугирование проводят при 28 тыс. Р в течение60 мин при 0 - 4 С. Активность ЛДГ 0,500 ед.Загрязнения растворимой фракции другимикомпонентами не обнаружено,
СмотретьЗаявка
3679483, 26.12.1983
ИРКУТСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ТРАВМАТОЛОГИИ И ОРТОПЕДИИ, ИНСТИТУТ ФИЗИОЛОГИИ И БИОХИМИИ РАСТЕНИЙ СО АН СССР
ВЛАСОВ БОРИС ЯКОВЛЕВИЧ, ПЕРЕСЛЫЦКИХ ПЕТР ФЕДОРОВИЧ, СЫСОЕВ ЛЕОНИД АКИМОВИЧ
МПК / Метки
МПК: A61K 35/32
Метки: клеток, костных, растворимой, фракции
Опубликовано: 30.08.1985
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1175481-sposob-polucheniya-rastvorimojj-frakcii-kostnykh-kletok.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения растворимой фракции костных клеток</a>
Предыдущий патент: Устройство для вибрационного массажа
Следующий патент: Способ получения медицинского жира из печени рыб
Случайный патент: Чугун