Способ окрашивания нейронов

Номер патента: 1104376

Автор: Майский

ZIP архив

Текст

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1104376 9) П 1) 01 И 1/28 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 54) (57) МеМ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(71) Ордена Трудового Красного Знамениинститут физиологии им. А. А. Богомольца(56) 1. 1 Меигозс 1. ЕеЙ., 1979, ч. 12,5,р. 235 - 240.2. Нз 1 осЬегп. апд Су 1 осЬегп., 1966,ч. 14,2, р. 291 - 302. СПОСОБ ОКРАШИВАНИЯ НЕИ при люминесцентном исследовании га с помощью пероксидазы хрена, ийся тем, что, с целью дифференци аски структур нейрона, дополнироводят окрашивание В бис-бензифосфатном буфере при рН 2,0 - 2,5 5 - 30 с. РОНОВткани моотличающации окртельно пмиде нав течение.1Изобретение относится к медицине.Известен способ окрашивания нейронов с помощью люминесцентного красителя бисбензи мида 11 .Наиболее близким к предлагаемому техническому решению является способ окраши вания нейронов при люминесцентном исследовании ткани мозга с помощью пероксидазы хрена 12.Однако дифференциацию окраски структур нейрона невозможно проводить указанными способами, поскольку свечение окрашенных флюорохромами структур нейронов слабое, аксонный транспорт красителей осуществляется на короткие расстояния в мозге животных.Целью изобретения является дифференциация окраски структур нейрона.Поставленная цель достигается тем, что согласно способу окрашивания нейронов при люминесцентном исследовании ткани мозга с помощью пероксидазы хрена дополнительно проводят окрашивание в бис-бензимиде на фосфатном буфере при рН 2,0 - 25 в течение 15 - 30 с.Способ осуществляется следующим образом. Из фиксированной в глютаральдегиде и формалине ткани мозга изготавливают на замораживающем микротоме срезы толщиной 20 - 30 мкм. Производится гистохимичес кая окраска срезов для выявления пероксидазноактивных структур. Срезы после короткой промывки в холодном фосфатном буфере (0,1 М; рН 7,2) с добавлением 10% сахарозы переносят на 15 - 30 с в подкисленный соляной кислотой (до рН 2,0 - 2,5) водный раствор натрия фосфорнокислого одно 043762замегценного (О,1 М), который также содержит 10% сахарозы. Без промывки срезы натягивают на предметные стекла и высушивают, Производится обычными методами обезвоживание, просветление срезов и заключение их на предметных стеклах в нелюминесцирующую среду (эпон - 812).Орииер. Из фиксированной в глютаральдегиде и формалине ткани мозга изготавливают на замораживающем микротсме сре 10 зы толщиной 20 мкм. Производится гистохимическая окраска срезов для выявления пероксидазноактивных структур 2. Срезы после короткой промывки в холодном фос фатном буфере (0,1 М; рН 7,2) с добавлением 10% сахарозы переносят на 15 с в под 15 кисленный соляной кислотой до рН 2,0 водный раствор натрия фосфорнокислого одно- замешенного (0,1 М), который также содержит 10% сахарозы. Без промывки срезы натягивают на предметные стекла и высушивают, обезвоживают, просветляют срезы2 О и заключают их на предметных стеклах внелюминесцирующую среду (эпон - 812).Наблюдение меченных пероксидазой хрена и флюорохромом клеток производится в темном поле и свете люминесценции. Одновременное двухцветное свечение клеток - золотистое (цитоплазмы) и зеленое (ядра) - указывает на двойное их мечение ферментом и люминесцентным красителем.Такой же эффект налюдают в случае,если используют фосфатный буфер при рНЗо 2,5 и в течение 30 с.Предлагаемый способ по сравнению сизвестными способами окраски нейронов флюорохромами обладает большей чувствительностью и позволяет дифференцировать структуры нейрона.Составитель В. Фролова Редактор Н.Лазаренко Техред И. Верес Корректор С. Черни Заказ 501 0/29 Тираж 823 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП Патент, г, Ужгород, ул. Проектная, 4

Смотреть

Заявка

3369509, 11.12.1981

ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ИНСТИТУТ ФИЗИОЛОГИИ ИМ. А. А. БОГОМОЛЬЦА

МАЙСКИЙ ВЛАДИМИР АЛЕКСЕЕВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 1/31, G01N 33/48

Метки: нейронов, окрашивания

Опубликовано: 23.07.1984

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1104376-sposob-okrashivaniya-nejjronov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ окрашивания нейронов</a>

Похожие патенты