Способ определения токсичности сыворотки крови

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРпО делАм изОБРетений и ОтнРытийОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯН АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(56) 1. Патент США Р 3944381, кл. 23-230 В 1976.2. Авторское сввдетельство СССР 9 740233, кл, С 01 Ы 33/46, 1980.(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ СЫВОРОТКИ КРОВИ путем измереЯО 1018015 А 3(59 С 01 И 33 48 А 61 В 10 00 ния степени воздействия исследуемой сыворотки на форменные влементы крови здорового донора, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью ускоре" ния и упрощения способа, для исследования используют эритроциты, инкубируют их с исследуемой и контрольной сыворотками, затем отделяют эритроциты от сыворотки центрифугированием, определяют величины времени фильтрации опытных и контрольных эритроцитов через мелкопористый фильтр и по их соотношению оценивают степень токсичности исследуемой сыворот-, ки."Рипаж 87 3 Подписное БИИИПИ Государственного комитета СССР го делам изобретений и открытий 1.3035,. Москва, Ж, Раушская наб, д, 4/5 оЗаказ 3529/42 Филиал ППП Патент,. г ужгород, ул, Проектная, 4 Изобретение относится к медицинеи может быть использовано для определения токсических свойств сывороткикрови при различных заболеваниях.Известен способ определения токсичности сыворотки крови путем культивирования ее на биологическом тест -материале с последующим измерениемстепени воздействия исследуемой сыворотки на тест-культуру 1 ).Известен также способ определения ;Отоксичности сыворотки крови при поражении печени, включающий культивирование исслед емой сыворотки с лейкоцитарной пленкой в питательной среде,содержащей плазму крови человека икролика в соотношении 2,5.1. и измерение величины зоны миграции зрелыхлейкоцитов 21.Однако известный способ являетсядлительным (более суток) и трудоем 2 Оким.Цель изобретения - ускорение иупрощение способа,Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу определения ток:ичности сыворотки крови пу-.тем измерения степени воздействияисследуемой сыворотки на форменныеэлементы крови здорового донора, дляисследования используют эритроциты,Г 1инкубируют их с исследуемой и контрольной сыворотками затем отделяютэритроциты от сыворотки центрифугированием, определяют величины времениФильтрации опытных и контрольныхэритрОцитов через мелкопОристый фильтр 35и по их соотношению оценивают степень токсичности исследуемой сыворотки,Способ осуществляют следующим образом, 4 Свежезаготовленную цитратную кровь донора центрифугируют при 200 с( з течение 15 мин, Плазму, обогащенную тромбоцитами, отсасывают а осадок эритроцитов дважды отмывают в Физиологическом растворе с последующим центрифугироваьием при 2000 д в течение 10 мин, Б клинике в опытах используют эритроцить. донорской крови 1 группы (резус - отрицательнье) или донорские эритроциты той же группы и резус принадлежности что и испытуемая кровь. Б экспериментах и"пользуют эритроциты того же видадлвотного, что и испытуемая кровь,1,5 мл эритроцитов дснора смешивают с 1,0 мл испытуемой сыворотки иинкубируют при 37 С в течение 1,5 ч,После этого взвесь эритроцитов центрифугируют при 200 с( в течение 15 мин,плазму отсасывают, а эритроциты отмывают в Физиологическом растворе путем однократного центрифугированияпри 2000 (З в течение 10 мин.Способность эритроцитов в деформации определяют путем измерения времени их фильтрации через мелкопористые фильтры известным методом,.Степень токсичности испытуемойсыворотки оценивают по отношению времени фильтрации интактных эритроцитов, инкубированных с испытываемойсывороткой, к времени фильтрациитех же эритроцитов, инкубированныхс сывороткой здорового донора. Время Фильтрации нормальных контрольных эритроцитов составляет в среднем(-7,5 мин (7,1 б+0,43 мин).Способ позволяет определять токсичность сыворотки крови за 2,5-3 ч.П р и м е р 1, Больная Ч. получила ожог площадью 27% поверхности тела, из них 3-й степени - 12, 4-йстепени - 0,5 В; ожог дыхательных путей, На 10-й день после Ожога степеньтоксичности сыворотки крови больной,определенная предложенным способом,составила 5,3,.П р и и е р 2,. Экспериментальный ожог 3-й степени на площади 20 Ъповерхности тела у крысы. Через сутки после ожога степень токсичностисыворотки крови - 1 57.Таким образом,. предложенный способ позволяет значителвно проще ибыстрее по сраьнению с извесФным из.:ерять степень токсичности сывоооткикрови, а оценить не изученное ранеедействие токсинов на эритроциты, Приэтом способ может быть использован,.в частности, для обнаружения и колиественного определения токсическихвеществ, образующихся при ожоговойболезни, а также оценки эффективности ее лечения. Кроме того, предлагаемый способ может применяться для определения токсичности крови и придругих заболеваниях (поражениях гече;и, почек и пр,),