Способ получения аденозин-5-трифосфата
Формула | Описание | Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1720280
Авторы: Конев, Мартынова, Матус, Мельникова
Формула
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АДЕНОЗИН-5'-ТРИФОСФАТА, предусматривающий накопление биомассы дрожжей на питательной среде при оптимальных условиях роста с последующим выделением целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, полученную биомассу предварительно суспендируют в дистиллированной воде и водную суспензию дрожжей обрабатывают озоновоздушной смесью с дозой озона 5 108 - 5
109 молекул О3 на клетку до снижения активности дыхания на 20 - 50%.
Описание
Цель изобретения - упрощение способа.
Способ заключается в обработке водной суспензии дрожжевой культуры, выращенной на углеводоминеральной среде, озоновоздушной смесью с концентрацией озона 5


Количество продуцированной АТФ в каждом примере определяют использованием реакции между АТФ и люциферинлюциферазой, которая выражается следующим образом:
Люциферинлюцифераза + АТФ

Адениллюциферин O2 аденилоксилюциферин.
Интенсивность свечения флюоресцирующего продукта второй реакции в интервале длин волн 560-580 нм измеряют в течение данного периода времени с использованием флюориметра и полученный результат соотносят с предварительно полученной калибровочной кривой стандартных растворов АТФ, в результате чего определяют количество АТФ, вышедшей из клетки в инкубационную среду.
Обработку озоном осуществляют однократно или путем последовательных обработок. Суммарная доза озона должна составлять 5


Экспериментально установлено, что при обработке озоном в более низких дозах накопления АТФ не происходит (допороговая доза), а при обработке дозой более 5

П р и м е р 1. Кормовые дрожжи Candida utilis выращивают в колбах объемом 1,0 л с глюкозоминеральной средой следующего состава, г/л водопроводной воды: глюкоза 10,0; КН2РО4 1,0; NaCl 0,5; Ca(NO3)2 0,4; К2НРО4 0,1; MgSO4 0,7; (NH4)2SO4 3,0, при исходном рН 6,2, температуре 28оС в течение 18-20 ч с непрерывной аэрацией путем барботирования воздухом с интенсивностью потока 0,4-0,7 л/мин. Клетки собирают центрифугированием, дважды отмывают дистиллированной водой, а затем готовят 5%-ную суспензию (по сырому весу) в дистиллированной воде. Клеточную суспензию обрабатывают озоном путем пропускания озоновоздушной смеси при интенсивности потока 1,5 мкмоль О3/мин и дозе 5

П р и м е р 2. Условия роста дрожжевых клеток С.utilis и подготовка их к озонированию такие же, как и в примере 1. Однако дозу озонирования увеличивают до 5

П р и м е р 3. Хлебопекарные дрожжи Saccharomyces cerevisiae выращивают в колбах объемом 750 мл со 100 мл питательной среды на качалке (180-200 об/мин) при 30оС в течение 20-24 ч. Составсреды, г/л: (NH4)2SO4 3,3; MgSO4 0,7, NaCl 0,5; KH2PO4 1,0, К2НРО4 0,13, рН среды 7,0. В качестве источника углерода используют мелассу (2% по сахару). Клетки собирают центрифугированием, дважды отмывают дистиллированной водой, а затем готовят 5%-ную суспензию (по сырому весу) в дистиллированной воде. Клеточную суспензию обрабатывают озоном, обеспечивая дозу 3-5

Как видно из примеров, предлагаемый способ получения аденозин-5I-трифосфата озонмодифицированными клетками дрожжей дает хороший результат с наиболее широко используемыми в настоящее время промышленными культурами, а именно, кормовыми, пивными и хлебопекарными дрожжами.
Таким образом, способ получения аденозин-5I-трифосфата обладает следующими преимуществами. Он прост в осуществлении: сложная среда инкубации с предшественниками АТФ аденином или аденозином заменяется дистиллированной водой, а инициатором синтеза АТФ является озон, накопление целевого продукта происходит в воде, что упрощает его выделение и очистку.
Для получения целевого продукта таким способом не требуется дорогостоящих предшественников (аденина, аденозина).
Отработанная биомасса клеток может быть без дополнительной очистки использована для получения кормового белка, поскольку не содержит токсических добавок ( толуола) в отличие от известного, следовательно, способ является экологически чистым.
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способам получения аденозин-5'-трифосфата (АТФ) с помощью микроорганизмов. Цель изобретения - упрощение способа получения АТФ. Способ заключается в обработке водной суспензии дрожжевой культуры, выращенной на углеводоминеральной среде, озоновоздушной смесью с концентрацией озона 5


Заявка
4665302/13, 23.03.1989
Институт фотобиологии АН БССР
Матус В. К, Мартынова М. А, Мельникова А. М, Конев С. В
МПК / Метки
МПК: C07H 21/00, C12P 19/38
Метки: аденозин-5-трифосфата
Опубликовано: 30.11.1994
Код ссылки
<a href="https://patents.su/0-1720280-sposob-polucheniya-adenozin-5-trifosfata.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения аденозин-5-трифосфата</a>
Предыдущий патент: Способ калибровки солнечных фотопреобразователей
Следующий патент: Способ металлизации отверстий печатных плат
Случайный патент: Устройство для очистки поверхности воды от нефтяных и масляных загрязнений