Формула

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНАТОКСИНА BORDETELLA PERTUSSIS путем культивирования коклюшных бактерий в жидкой питательной среде, отделения супернатанта, выделения из него токсина с последующей детоксикацией формалином и сорбцией анатоксина на гидроокиси алюминия, отличающийся тем, что, с целью повышения активности целевого продукта и упрощения способа, токсин из супернатанта выделяют осаждением 3 7%-ным раствором гексаметафосфата натрия в присутствии 0,002 0,006 М растворов соляной, серной и трихлоруксусной кислот при рН 3,4 3,6, а детоксикацию токсина проводят в 8 12%-ном растворе сахарозы.

Описание

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в производстве препаратов для профилактики коклюшной инфекции.
Целью изобретения является повышение активности целевого продукта и упрощение способа.
Способ иллюстрируется следующими примерами.
П р и м е р 1. Штаммы N 305 или 475, или Тонаша Bordetello pertussis 1 фазы инокулируют на среду Борде-Жангу. Для посева на жидкую питательную среду используют второй пассаж. Для приготовления посевного материала используют жидкую полусинтетическую и синтетическую питательные среды. В матрацы, содержащие 150-200 мл жидкой среды, инокулируют посевной материал до концентрации 3-3,5 МОЕ в 1 мл и культивируют при 35оС в течение 5 сут. Супернатант отделяют от микробных клеток центрифугированием при 12000 об/мин в течение 30 мин. К 1 л надосадочной жидкости приливают последовательно 50 мл 20% раствора гексаметафосфата натрия (5%) и по 2 мл 2н. соляной и 2н. серной кислот (0,004 м) и рН жидкости доводят до 3,4 2н. трихлоруксусной кислотой. Осадок отделяют центрифугированием при 12000 об/мин в течение 60 мин и затем растворяют в 1/15 М фосфатном буфере (рН 7,5) в объеме 1/50-1/100 по отношению к объему исходной культуральной жидкости. К осадку добавляют сахарозу до концентрации 10% и формалин до концентрации 0,4% Препарат выдерживают сутки в термостате при 35-37оС и затем неделю при 4-10оС. Полученный анатоксин сорбируют на геле гидроокиси алюминия в концентрации 3,2 мг белкового азота на 2 г геля гидроокиси алюминия в 1 мл.
Сравнительное изучение протективной активности анатоксинов, полученных предлагаемым и известным способами, показало, что для анатоксина из штамма N 305 она составила в среднем 4205 международных защитных единиц (МЗЕ) на 1 мг белкового азота, для анатоксина из штамма N 475 4782, для анатоксина из штамма Тонаша 3107, по прототипу 675 МЗЕ. Время получения препарата согласно предложению составляет 12-14 дней против 35 сут по прототипу.
Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается способа получения анатоксина. Цель изобретения повышение активности целевого продукта и упрощение способа. После выращивания культуры отделяют биомассу, а в супернатант вводят раствор гексаметафосфата натрия и смесь растворов кислот соляной, серной и трихлоруксусной, и осаждают токсический материал при рН 3,4 3,6. Полученный токсин переводят в анатоксин обработкой формалином в присутствии раствора сахарозы, а затем целевой продукт сортируют на гидроокиси алюминия. Длительность способа 12 14 дней, протективная активность повышается в 5 7 раз в зависимости от штамма-продуцента.

Заявка

4029932/13, 26.02.1986

Центральный научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова

Захарова Н. С, Бажанова И. Г, Ремова Т. Н, Шмелева Е. И, Мерцалова Н. У, Сухинова Е. Е, Озерецковская М. Н, Кичатова Л. Г, Цветкова Н. В, Семина И. Э

МПК / Метки

МПК: A61K 39/10, C12N 1/20

Метки: bordetella, pertussis, анатоксина

Опубликовано: 09.08.1995

Код ссылки

<a href="https://patents.su/0-1369042-sposob-polucheniya-anatoksina-bordetella-pertussis.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения анатоксина bordetella pertussis</a>

Похожие патенты