Василева-Тонкова

Номер патента: 1392093

Опубликовано: 30.04.1988

Авторы: Безбородов, Безбородова, Василева-Тонкова

МПК: C12N 9/22

Метки: внеклеточной, выделения, гуанилрибонуклеазы, наrziаnuм, тriсноdеrма

...фракции концентрируют ультрафильтрацией через мембрану УМи диализуют против 0,01 М трис-НС 1 буфера рН 7,7, Затем раствор фермента вносят в колонку с ДЭАЗ- целлюлозой (4 х 16 см), уравновешенную тем же буфером, со скоростью 100 мп/ч и промывают 100 мл исходного буфера, Вся активность фермента находится во фракциях, выходящих из колонки. После подкисления до рН 5,0 0,5 М уксусной кислотой раствор фермента, вносят со скоростью 60 мл/ч в колонку с КМ-целлюлозой (2 х 7 см), уравновешенной 0,01 М ацетатно-аммиачным буфером, рН 5,4. Фермент элюируют 0,5 М ацетатно-аммиачным буфером того же рН, Получают 7 мл раствора фермента с удельной активностью 2860 ед/А ь =1 и степенью очистки в 6000 раз с выходом по активности 50%.П р и м е р 2. 27 л...