Шахнабатян

Способ отбора мутантов бактерий, неспособных к синтезу нуклеаз

Загрузка...

Номер патента: 1495379

Опубликовано: 23.07.1989

Авторы: Грошев, Шахнабатян, Шестаков

МПК: C12N 15/00

Метки: бактерий, мутантов, неспособных, нуклеаз, отбора, синтезу

...И-метил-И-нитро-М-нитроз огуанидином клетки Е. со 11. высевают на индикаторнув среду, содержащую, г/л: толуидиновый синий 0,16; МаС 1 5,0; ДНК 0,3; трис,05; бактотриптон 5,0; дрожжевой экстракт 3,0; МЯЯ 04 х НО 2, 46", глюкоз а 4, 0; агар 20 "Дифко" (Боо 1 е) 15,0, рН 7,6-7,8, и инкубируют 18 ч при 37 С, Поверхность твердой среды заливают хлороформом и инкубируют 3 мин, Хлороформы сливают, чашки подсушивают до полного удаления 25 хлороформа в приоткрытом виде 5 мин и и затем инкубирувт дополнительно 18 ч при 37 С. Регистрируют вокруг колоний клеток, синтезирующих дезоксирибонуклеазы, розовые зоны на темно синем фоне индикаторной среды, Вокруг колоний клеток мутантов, дефектных по синтезу этих ферментов, розовые зоны не...