Патенты с меткой «гибридизационного»

Номер патента: 1620938

Опубликовано: 15.01.1991

Авторы: Венер, Зубов, Кнорре, Коваленко, Лукин, Свердлов, Туркин, Турчинский, Щербо

МПК: C12Q 1/68, G01N 33/543

Метки: анализа, гибридизационного, проведения

...1,1 ЭС 1. Раствор биотин;лировзнной ДНК хранят при -20 С,25 г) Гибридизация,Нейлоновые фильт ы с нанесенной наних, НК переносят в .Зшки Петри с 3 млпредГибридизационнОГО раствора (1 мл нз1 см ), содержащего (на 10 мл) 2 мл воды,30 5 мл формзмида, 1 мл 10%-ного додецилсульфзта натрия 1 ДСН), 2 мл 59%-ного декстрансульфэта, 0,5 мл 1 М трис-НС 1, рН 7,5,и 0,58 г Г 1 ЭС 1. Инкубирчат 10 мин при 42 ОС.Затем добавляют 120 мкг (из расчета35 40 мкг/мл) ДНК спермы лосося и 0,6 мкгбио.ги нилированной ДН К из расчета0,2 мкг/мл), которые и редварител ьн о денатурируот 10 мин при 100 С. Гибридизацию ведут при 42 С в течение 16 ч при40 постоянном перемешивании, По окончаниигибридизации фильтры отмывают два разапо 5 мин раствором 3 мл), содержащим0,3 М...

Номер патента: 1664831

Опубликовано: 23.07.1991

Авторы: Артюшин, Забережный, Коромыслов

МПК: C12N 15/35, C12Q 1/08

Метки: ppv4, выявления, гибридизационного, днк, зонда, используемая, качестве, м13ppv, парвовируса, плазмидная, рекомбинантная, свиней

...аналогично примеру.Проводят трансформацию клеток Е.соИ )м; отбирают клоны, устойчивые к ампициллину и имеющие нарушенную активность ф -галактозидазы, выделяют плазмидную ДНК из 12 клонов и проводят ее расщепление рестриктазами РзО и Есой. Отбирают клоны, содержащие плазмидные ДНК, которые при данном анализе образуют фрагменты размерами 2,1 и 2,7 т.п.н. Данные клоны используют в качестве продуцентов ДНК рРЧ 191,Б) Выделение фрагмента ДНК парвовируса свиней из ДНК плазмиды рРЧ 191 и встраивание ее в ДНК плазмиды рВВ 322.ДН К плазмиды рРЧ 191 и РВВ 322 обрабатывают рестриктазами Рзт 1 и ЕСоВ 1, проводят фенольную экстракцию и переосаждение этанолом и лигирование, как описано в примере 1,После трансформации клеток Е,СоИ С отбирают клоны,...