Способ определения надежности иммунитета растений

(57) Изобретение относится к общим вопроса; биологии и может использоваться для коНТРОЯ фУК 1;ОнаЛЬНСГО СОСТОНИЯ И Отбора высоконадсжньх сортся. Цель - ускорение способапсвы ение его тсчности.Пророс-к растсний с подрезанными в воде корями в: держивают в сосудах с водопроводной ао-Ой в темноте в течсчис 12 - 24 ч.После этого спытн 1 е растения инфицируют выдерхкгванием в вод).ом растворе суспензии патогена. затем переносят обратно в та;.)ова, Хо г бб 13,1 Оаааа) Изобрсам теоретмо)1 с) бы;и селскц 1КЦ)он Э. ЬН етение относ) ся к общим гопичссо, и пр; хладной биолог;ЭГГ 1 Н, ;, ПО ОТОРОУГ) К , , 0 З) Г 01 а СУДЯТ ПС П иСи ти от со 111 х ПГ)одуктов, э 0 0 УСОЧИГО;ТИ - ПО Пронскоет путаниЯ 11 УС ГОЙЧИВОС)И 01 ь т н 011 Г) с а к Ц 11 и Вол " по 1 уюа-нОсти Г)ас) с 11 1 111)ДЛНОСТ 1 М- л,ПГ) л 1 л 1 унитста требуется количссти)/н 10 ,."Н Ч 1 л 11М:Р Спо сг)","., . ,ч У ТГ, 1".Зо Г-)-УДеС ЫЕ)1, го Л) ЕТГ 1.,ОЬ ГТ;ГГ;рца воду и периодпчгски и"меря)от в навесках листьев котрельных и опыгных растений кон);ентрз ию 00,"Ораст гори;ых антиокси дантов в течение 5 - о ч п)осле зсргжения, Строят графичегку О к;. Ивую зависимости Л А/1, где Л Аг А;,.Ак - разность в конЦентРаЦ)и антиосДатов; Ао и ) к - количсство ант 1;Оксдантов в опытных и :онтрольных растени)х, Зиксируот исходноа содергис антиоксидантов до заражения, измеряют величину тангенса угла накло) а кривой ЛА/т в течение первого часа после зарах;ения и диапазон времени компенсации убыли ан гиоксидгнтов для устойчивых растений. Высокой надежи:- стью иммунитета Обладают растения с наибол шьи всличинои исхОднОГО сод д;:.Зн)1 Я антиоксидантое и Отрицательным значением величины тангенса угла наклона кривой ЛА/т. а низкой надежностью иммунитета - с наимень.ей величиной исходного уровня антиокс)дантов и г)оложительным зачсн; - ем величины тангенса угла наклона кривой.3 ил., 5 табл. мой пропорциональнодержания флуорссцру НССПЕЦИфи ССКОй 1 ОРОЗ обратнои заис 10 стн, ца из-за слс асния по и уостьи) сп,ности в ) а с) с) ) 1 1 з па Ог о 1, Ра К 1 С 1 СТИ, ,СЗ 1 С) )1110 П; Э Г 0110 М; Е Т 01С му)тета. В пцсн; 1 лдг н,.РЯДУ Г, УГ. Ойч 1,ос г,ю: СУт О, )Р) )Г,./Ейсс )1,.с ,-р..сссЬй С,Т. И " Г, с)( ч,ОЕНГ(1 О Гор,) ч."еьх растре(:. г.;, )с :.:.; 1.; сг)Г;с.1 с 1)яЛ 1 яа - ДО С, " т 1 (;,С,рО НО-Т, г с: .:сИфЕ .,:; я с)О ( 1; Огс,И,Е,сГс О Г с ЛЕНИЯ ОЛЬКО ОД )(О КРИТЕ).И - Усто -:. Ос., сИ,ЦЕ;ь иЗОб тег - ", с. иС . )",и Г(оо.1 е егп ть Гностс спр ле)(1 с.,)Трох )ГОЛсост",О - .и.Х К ;т 0. .;.СТИ . (1 ,1 Ста; Х,ИЗ(ЕСЛОГ;С 3 . .и, Ус ГОИ( ЬОСТИ Ооа. Г)ПОСТИ,,цНТРЗЦИ,); 1 С 10 Р/,)Л Е )ЕЧЬН.И5 Ч; НЗ (,с)1 Г.З - КИНЕТКЛ 1;.),сЕНИЯ ЛА4рс)СТЕН)й ХЛОП ТНИ".3 С;) а - р.с, С 1:сигеннь(х на тоех раенх агрос. ах безСТГсГ 0/И, ОТак, Ч С,) /Ь" Я ОЧГ 0- НОГ: усо,; Л ГО ССДГа 1 ЕдИЧНЬ ,р Ер"яУСТО,с,"О-ТИ,;Г,Ссь -С 3 - 5 Ч, ), ",ОРОГтэ,. ,.) ),0(:)С) р:И с,ГСпоССР)С Е)З),1,Р.ОХРЕОИ ДР,-ссС. . аИи . с Ь; ", ,И с. Х С С .О О П ОЕ С Л , ; , , .;,1 с; рГ: "., , С .;", с) - Н С : С . ) О С Т И,ОЦ")"И Нр" РГЬ (сс1.) .1 сисЬ ) Ь .ОКО., ".) . П О ру (1 , д р;(Ла,г,)От Р.".ССНИЯ С Н,"50 ЛЬ.( Сй ЕЕЛИЧ ОйИСХОД)(О 0 "Г); .",ТЯ:арня ОН ГИОкс ) ас ГОЯ ИОГ):ЬсСТЕЛ Нс3).)ЧИ) .СЛИЧИЫ ТНг"нса угла 1;.,:ло(,я кисо Л А/1, а нэхо 1а еостьз - с),.е)(1,;е) г, л О. исХСДОГО УРСС)Я НТ,)ОСИДОТОСГОРО;КИтельь )( 3 с,ен)Ои а-.:ли (:.Нь т;ге;са уга1Г) );О 1с К рР О1,Г;: ;,;).й СДОСО 5 ОТЛИЧЛ"ТСЯ От ИЭвосто О слц,",Г)(,ик): сп:стус)иь. (; роро; .- ки роотсис Огреха )(Ии я задено г (ид; 1.Ит. г." (г- ду собой; тог;л в.растепня С (01 ЛОЛЬ(вг:, Г,Л;.-. Сг И ОГО Сг.,лг.рж(НИГ аН (гг".; Ггоа И Отр(;г.,(телььгл.;гач ;,"; н(:лицнц та (генг.: угла 5НЛКЛОНа г.1 ИСзгг (-г А/(, а Н. г.Й На,г КНОС 1 Ь,0 С Наи(01(ЬГ"1 .,ЛИЧН 011 1 СКОЛ НОГгзУРОВНЯ ВНт; СССИг(ВНТО; И Г,ОЛСг 1(.ИТЕЛЬНЫМЗНВ(ЕНИЕ. ВЕгГ"(ИН 1 ТВНГОНСЗ УГЛВ НЗКЛОНГ1(рги ВО,". 10Раее не б:го известно СГ(особа колиЧвсг(гвн(ОЛ РЦ" НИ Пс РЗМЗТРОВ Нг(гг жО. ТИи,"гИт. а рзсте 1(ий. Г 1)едг(а Гав :.( ПодгХОД, В КГаргРОМ ПО КИНЕТИКЕ ПССЛСДСЙСТВИЯВтс ена гпредвидяОт три критерия; жизнеспособна".т(л, реактивности, устой(и. Ости иСтЕ;1 Е(Ь НВДЕ 1 гК (ОСТИ ИМ(УЛТЕТЗ, ЯСЛЯЕтСЯновым,1" О и м е Р 1, Иг".пьтьгвзют рзстснияхлопчагника сорта 108 - ф 2-(,есячного воз- ,ОРВСта, ОЬ(;агД.;ННЫЕ На фоН= И ЛЗ Р 1 Я К 7.;,уравновешенные в водопроводной Воде втемноте и насве" у в течение 30 ч. В нзсескахЛИС 1 ЬЕВ (3 - 5 ), ОтобрЭННЫХ Гврзэ Ка:г дЫЕ3 ч и заморожен;(ьгх в жид лом азоте. Опрдделяют сод;ржание водорастворимых антиоксидантов сульфгидр;льного типа,Для этого нзвеску листьев растирают вступке с жидким азото л до порошкообразного состояния и переносят " дистиллированной водой е мерную колбу на 100 мл,добавляют 2,5 мл 1 М раствора сульфосалипиловой кислоты, Содержание колбыдоводят водой до метки и оставля(от после вст 1. Яхь.сггнил на 30 мин, Пипеткой 35отбирают в коническую колбу 50 млфильтрата, 2,5 мл 4 ,А-ного раствораСу(гфОСЗГгИцИЛОВО(1 КИСЛОТЫ И 2,5 МЛ 5,ного рзст ора иодистого калия, прибавляют 10 капдль 1;-ного раствора крахмала, 40встряхивают и титрируют 0,001 н.растворомиодноватокислого калил ООз), приготовленного на 2;4-нам растворе сульфосалициЛОЬОЙ КИСЛОТЫ, дО ПОяВ;ЕНИя уетОЙЧИВОС(ИСиндй Окраск 451 оличьство еодор: с 1 воримых знтиоксидантов восстановленного глктатиона выЧИСЛЯЮт ПО фоРмУЛЕА.= -Уо) 61,4/р,где 1- обьем, к(л, 0.001 н,1 Оз, затрзченоГО н. титроьание про(1(;(о - Обьем, 1,;л, 0,001 и. К.Оз, затрачен 1(ого нз 1рова(г е контрольной пробы -по. за(ле 0 ф .;11.а 1;. ньгм обьеом ди.С Гиля(гроланнои (:Од.(; 5551,4 - КОЭ, г,Ициет ПзрЕСЧСТЗ На ВОС - 11 ГЕС З, Г.ргНГГЫЕ гНЗЛ(г ПВСГ;О(Ы В ТггОЛ.1. ОЧЕЛг(дгЮ Г(10 ,. Г гг 01 у (.ГГГГ ; .Иг.(.дг улг( г д г г г зпг гг гг (Лтг гг И гдг 1 Гг 1 (ггоОт НоситЕЛЬ( 0 С г Зб;Л Ь,. Г";: .Грь( НЗбггюг,г.-",:(,1( в ИНгерг(а(10 12 - 2-"г ч, 1;ото;:,й ИЯЛЯЕТСЯ О(1 Т(Мс (1111Г,ЛЯ Ь.гг;г "Г.КИЬ(ИЯ ЛВОд Пр Ь;0,1(ой ВОЛГг Г тЕМ(ГЭВ(, Х ус; Г, ЛХ,П риме р 2, Испьгть(в;ют проросг-;ираСТЕНИЙ ХЛОЧат(гик;г СОрта 108-С3-1;Од(.Л;. 0.0 ВО:раСта, Вырг(сгЕННЬ(Е ;агроггггНе М 250 1 г 017;г нз и(; уните Грззличн;.м конце(;трациям гр:;ба-патог.на Уегт 1 СС 1110. с 1 з 1 г В :1.ПрорОстки с и ддрезан(Ы(ли . .оде КОРЕгкГМИ УРВВг(оггЕЖгВа(ЭТСЯ В ВОДЭПРОВОДНой ВО "Е В тзгЮОТЕ 16 Ч ЗатЕМ ОПЬ;тНЬ ЕраСтЕг(Ия ПОМЕГцаЮт На 3 Ч В Под(;ЬЕ растВОры с различнг.: ксниент,.ац(;еспор гр; баМегг.ЮВЬсе 1; рл:а 2, контраль;(ыз остаютсяГг ВодЕ. ЕжЕЧаСНО ПОСЛЕ НацаЛа За 1 гажЕНИяОТОИРЗ(ОТ и, ВЕГКи КОНТРОЛг НЫХ И ОПЬ(ТНЫХрастений, замсоз кивают в жидком азоте испределяют в них содержание водора.творимьх антиоксдантов.По данным анализоВ Опытных и кОнтрольных Образцов в течение б ч после заражения определяют дифференцизльнйпоказательЬЛ= Ло-АК,гДе Аг - конЦентРаЦиЯ антиоксиДантов вопытных образ(;ах;А - концетрация антиоксидантов вк,нтрол ьых образцах.Данные по показателял ЬА= Ао-Агг привелены в табл.2.ПО величинам разности А=Ао-Ак длякаждой кснцентра(;ии патогенз строя 1 график зависимости ЛА/с (фиг,11. Из графиказависимости Л А/т следует, что 3-часоваявыдержка растений в растворе патогенз сконцентрацией 1 10 спор/мл является опзтимальной, так как вре(ля компенсации вуровне знтлоксидзнтов, т,е, критерий устойчивости составляет 3,3 ч; для концентрации10 спор/мл интервал компенсации снижагется до 1,5 ч, а для более высоких концентраций - увеличиваатся более 5 ч.П р и м е р 3, Испытываются проросткирастений хлопчатника сорта 108 - Ф 3-недельного возраста, вырзгцивание на агрофоне Нгоро р 1.0 Кт на имму(и:ег при заражении врастворе патогена-гриба ,сгт,г 1 аЫ 1 зе И сзконцентрацией 1 10 спор/мл в(,держивзнлЕМ В твг ЕНИЕ 1 - 5 Ч. ДЛя ЭТОГО ГрОрОСТКИ Сподреззнны(ли в воде корням уравновеыи 1(От в темоте в то;снис 16 затемконт.гг 1 ьнь е остзготсЯ л вол( а Опытнысрастения рзздсллю Нз 5 ч. по времени гыдерживзИя в рас 1 ьогре патоге(:з 1 - 5т и д,",.". : г,г. таи.Т10 Д 11,. СГ;Г 1л/Г",сд" 1 пй лиц 1,-, и". .",- ,го/ )ас но;1 с 0 .слГ:.:,Б 1, : и"ЕТСЯ,-1 ВССВ.;с ВЕП;-,;К; таК К;,;Дсг)жки - б 0/е- б ч сссггс;с "Уст.,. с -.ссть .;,;Ч,с;:010 с;и ". о лсост;.;:- свать 3 - 5 ч, Тамбы /сг е диффсСН 1 ИЛНаТЬ Иелс т - ;,",. Г ЭП-.ОО) "Баци Смс 1;ьше 3 ч) и боп,ей (5 ч) 1 елч 1;намикритс;11:н устоЧин:сти и сцс 1 И 1 ь надс;- ность им л тта,ак ка", продслхл-),ьость аь.1 за 1 нетики псе/ еде.;ствия вани иг от определенияя к р 11 тери устойчиеост 1, тл. .,1,с,;ивре 1нл, ко 1 гзн а В ублс, д, с,1 Гантов, то время анлиза пс" пс зара-,ен л 1.сх:- ДЯ 13 НьШЕСКВЗВ. 010, 1; гслжО::Ч. ЗТ 1,б - 7 ч, В 1,: "рема мсьша;1;:О 1:цс 1 Тра,;яПатоГСНВ ,1 .1) СГар./.") С бо.1 ЬС 1 ЬДержко (3 ч) боп.с цредцспитепьна дпя лучше дифферциации мьпоустойч 1;ныхсорт ов.П р и м е р 4. спь.1 лаСт рэстсн 11 яхлоп"тника сор ге 1:., - Ф 2-1;еся иого возраста, вы)а 11 е ыс на трех разных агрофонах: без удобрений; с 1,:сралььми)ДорсНИВМИ 2"л) Р 1 ГЗ КТ"С Оргс НИЧССКИМудобрением наьзз 5 Г т/га.1/13 средних ярусов отбираит листья счерешками, В воде подреза:от их . 9,; см ипомегцают в темноту н стака 1 а, с Водопроводной содой д я ураьновешиг ания на 116 ч.На СЛСДУСБЦЕЕ,ТРО ПОЛОННУ Ра11 й ИСпользуотя инСициро 11 а 1 Ил и помецфаОтих на 2 ч в стаканы с с;дОй суспснзией -пат гена ГС - 10 сгГ.,:/.;.:) .:, Паоле 3"сгоОб а о в воду. У 1 СхНых обр: зОВ и затЕМ Е;КЕЧаСНО П:СЛЕ На;:1 па 1; г И.1 РО.ЗН 11втсче 1 ие 5-7 чоти ". та:е, ,;,01 Трс:ьньхОпы, нх Гсс; с 1;и, в .) Г),;11 Ора,.": -Ва 10 т В;.,",;101 асс е и опр1ьсод.рх;ан;1 с во;0 ас 1,0,.;Ь 1 ых анИ 011011- дан с в.Дани 1 С 110 ОрсдСПС",Л Ас, АА=./ /в обазц"х ,С, . с/, .Со Ьзг е паэ 1ранге,;:1, лсл,г; ". р= та осп, 11 и 1;.л ,:,л Г1 О КОЛИ; СГ 1:С Но ус:й 11 нсстЬ ПОСЛС ИХОцс 1:" -.". 1 О:,;:. и ;о.".ао,нуэыи ан иО;с 1;.,а Ьн .;ОГд", А);,Осле .тапа ЛГ 1О,)1 з 1:11 стЧесо, зс исимости О-Гь;1 д"15 но, и 0 1 рлтсл и ус сич;,ости для нтсрОГО игр 1 Г в. р антса оцс;1 ин:ется 3,7 и 1,5Час; ГГСГ); Г 1 СТЬГ;НО РИТЕР 1 Гй РГ 1 К ГЗНОСти ап,еде,:ть о Отрицате/Ьнс ,; ичинс тснгсн;а упа 1 нкпо кривой н .1 не20 его о ч:са,В Ч 1;елен 1,е пс;а=атели критериев наде ж наст и и ри,едсчы н табл, 5,1,изку 0 степ ь 1 ад.,жь ости к пата-.1 упоказэл сз,;иа;г 1 - без удоо 1 ии, с;:,:уоГн)сокуО - нар.а 1 т 3 - с ор, з 11 кс 1, длкоторого спрн:,епс;о на большее значеиекр 1 ггсрил;енсеОсобнсст 1 и отр цательнос значение вели;ины тангенса угла аклона кр Бой Л А/1. Среднее30 положен;с занимает торой вариант - ЯРК,дпя которого Г;0 у егы средСе з 1 а с ис1 риторя;1 зесгСсобнаси и ст Осигельно умеренная реактивнссь,В 1 адл.5 пр. =е;.:,1 ы та 1:х.е данн. ло35,"аболсвае,.ости Биптом и уро:ксйнссти растений топ атника О трем варианта/Г опыта.РСС 1 ения нэ агрофонз с оргачико 11 3-Йвг )1;ант), ес.10101 На зна ительну с забо 40 лес;:смссть Ви Ггсм (3 - 2 с,",), да от болееВЫСОКИ Уожай ЛЗЛКа-СЫРЦа С ба;,ИШИМессм 1 коробочки л: сранснио с -1; вариантом, 1 то совладает и с оценкой над.жности имм нитста,40 11 К 1 ОбраЗОМ 1,ОЛ 1 ЧЗСЬСНоя сцен "акртерцы пс;аБег 1:ыяаить нк)ад кждогоо 1 дсль зло 1:рите; 1;я: 11 з,1 сжность им 1.унитста. сь 1;с с о 1 бГззца,Испол,зо. э с п; си; эга;.Огс) с 1 оссбзгг 1с П 0 З В Э/ 111 О ц Г 1 11 Т 1 у1.0 Н с Л Ь НГ 1 а К 111 Вно; ть р 01 и н ,-);бс с плОГенг 1 В (:.з 1 еКОБО, КТС СРИ.С:-;: Г" ТИ И 111 УнтетаОбь.,и:.,11 с Бссд; О ". )и 1:р 11 срия: ",1 зН . СЛС .Ь, , Г ." ЧСТ,С:Е" Г Ссоп те 1 Лотс 9 водно 1 сад 11 спу уел 1 ых растен; н.;.колько . стон,эет, нп гозто,у лучц ди,арен.,пруст их по пок;з; - .т. лял 1 устойчиьост и н реактивно" т;С ч 1 ха иапо;но Т 1 ил,ькуниета растений к опзделснны;" нагрузклл 1 гэтогсна позволяет выполнить цел.направленный атбо; высо- КОН деХКН 1-Х рВСТЕНИй С ОотИМВЛЬНЫл 1 И ПО- казэтел.:л.и функциональ ого состояния сел ьхозлультур. 10Оормула изобретенияСпособ определения недеяио;.ти и м,- нитета растениЙ, вклк,чалощий инфицирование рас;ений патоге Ом, псриодическо: изл,грение концснтрации водорастго,имых 15 ант 1 оксидднтоа В лис гьях кснтроль:.ых и ог:. тных растений, построение графическ;и;ри. Ой зависимости Ь Ай, где Ь.; - разнос-, концентраций антиоксида:тов в Опытных и ълг;.Ол:,ных растениях.т-время 20 после зара,кения и опрс деление показателей, по знача-И 1 о которых судят о количественных кри гсриях усто 1 чивости, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью ускорения ЕГООЧНОСти, пЕОГ цин 1 ип 1;ровалие;.В ВОДКОРНлл,"1 ; ,р4ц 1",-овьние Осун; 1гена, затол раст,нпор"Растворимых антиоксунтов ",ед .1 т в течеч д 5 6 чпосле нечаза ,ения, фиксчрулот и"х,;днре содеОжлн.лнтиоксичлнтоя до ззрахкения и изщ Р,1 т велич,ну таненсаугла наклон:-., кр.":1 П ЛАЙ в течение первого часа по:ле ил;1 циросания, при зтомвысокой назжнос ьл иммуните. а обладагот растения с нл" большей вел;1 чиной исходного сдерхзн 11 я антиоксидантоэ иОтРИЦВЕЛЬНЫМ Зл 1,1 ЧЕНИЕМ ВЕЛИЧИНЫ тЗНгечса угла наклона кривой ЛА/т, а низкойнаде,кностыо ил 1 л.итетэ - с Наименьшейвеличиной исходнгн О уровн антиоксидантов и нулевым ил н чож:1 тельньл", зна ением величины танг нса улэ наклона кривой,ЖО У ц Ъ Г)С 1 Л 91 СЛЬ И, Я 31 СЦОО , . У Г.," .,1 Ь ) Г В Н ТЛ ЕОС Иэтдйн П С,СР 1 ддьС;и 3;О; );ОТн . ,КГ),.:;ц"Л,Г 5 3111, 01