Приспособление для метки клеток

Оп ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(я)м. кл. С 02 В 21/32 с присоединением заявки РЙ Ф 9 еударетеекеыВ квинтет СССР во делен изобретений и етерыткВ(088.8 Э Опубликовано 300 1,82, Бюллетень М 4 Дата опубликования описания 30 Р 1.82(72) Автор изобретения В, Н, Рейнгольд 1Институт полиомиелита и вирусных энцеф литов АИН СССР(54) ПРИСПОСОБЛЕНИЕ ДЛЯ МЕТКИ КЛЕТОК Изобретение относится к оптикомеханическому приборостроению, в част. ности к технике биологических и медицинских исследований, для приготовления электронномикроскопических препаратов путем изготовления тонких срезов и может быть использовано для механизированной отметки гравированием под контролем светового микроскопа прямоугольных рамок-меток вокруз связанных с задачей исследования участков, например единичных клеток, по поверхности пластиковых препаратов- заготовок, выполненных в форме стандартных препаратов для световой микроскопии,В технике световой микроскопии биологических объектов, в частности в гистологии и цитологии, известны устройства для отметки областей пре 20 парата, к которым исследователь желает повторно вернуться, Эти устройства представляют собой имитирующий объектив микроскопа штырь, который ввинчивается как объектив в револьверную головку микроскопа и вокруг которого вращается надетая на него и подпружиненная рубашка с алмазным резцом на торце, расположенным несколько в стороне от центра ее вращения, Обнаружив нужный участок под микроскопом, оператор замещает, объектив путем поворота револьвера на устройство для отметки, приводит это устройство в соприкосновение с препаратом и, повернув рубашку упомянутого устройства на 360, гравирует обводную метку, которая благодаря люфту рубашки получается в виде не- сомкнутой круговой петли, охватывающей слишком большой участок препарата, чтобы быть пригодной для целей электронномикроскопической техни ки Е 11Недостатками известных устройств являются отсутствие визуального контроля в процессе нанесения метки, опасность нанести механическое повреж 3 90197дение на объект исследования во времявдавливания матрицы, высокая стоимостьизготовления набора сменных матрицпо форме (квадрат, прямоугольник,трапеция) и по величине охвата маркируемой площади объекта.Известно маркирующее устройство,действующее способом вдавливания печатающей матрицы в поверхность препарата, Печатающую матрицу выполняют щкак на торцах устройств, имитирующихобъектив, так и на Фронтальной поверхности линзы объектива в виде алмазнойпирамидки 121ФДанное устройство позволяет выполнить отметку при визуальном контролечерез микроскоп, однако отметка строится путем четырехкратного вдавливания отпечатков вокруг объектива такимобразом, чтобы мыслимые линии, соединяющие противостоящие пары отпечатков, пересекались в центре объекта,т,е, отметка в этом случае являетсянедостаточно точной,ЭЗНаиболее близким к предлагаемомупо технической сущности является микроманипуляционное приспособлениеприставка к объективу светового мифкроскопа, которое имеет стяжной хомутик, укрепленный на корпусе объектива 20-кратного увеличения с рабочимрасстоянием в 1, 4 - 1,8 мм, несущуюстойку, закрепленную винтом в телехомутика и опускающуюся вниз вдольтела объектива, обойму-суппорт на нижфнем конце несущей стойки с двумя направляющими, между которыми перемещается под действием винта возвратнопоступательно в сторону оптическойоси объектива выносная подпружиненнаястальная пластинка с иглой-резцомна заостренном конце, впаянным под углом, превышающим апертурный угол объектива, и вводимым в рабочее пространство между фронтальной линзой объ-ффектива и препаратом, Данное приспособление дает возможность изучать препарат и выбирать нужные клетки при относительно высоком увеличении (от 100до 300 крат) в режиме фазового конт- фраста с тонкой цитологической характеристикой клеток, позволяет гравироватьвокруг отмечаемого объекта прямоугольную обводную рамку, величина которойпеременна и определяется величиной Ыобъекта и выполнять любые дополнительные отметки, например знаки, индивидуализирующие тип объекта, номер от 3метки и линии для коррекции последующей заточки пирамид 33 .Недостатком известного приспособпения является наличие жесткой связипо высоте между объективом и резцом,обусловленной неподвижностью несущейстойки в вертикальном направлении,Такое положение приводит к тому, чтово время гравирования отметки, когдарезец приводят в соприкосновение споверхностью препарата путем вращениярукоятки тонкой наводки микроскопа нарезкость, изображение отмечаемого объекта дефокусируется и размывается,что затрудняет точное выполнение метки.Цель изобретения - обеспечениерезкого изображения отмечаемого объекта и повышение точности выполненияотметки,Поставленная цель достигается тем,что в приспособлении для отметки клеток стяжной хомутик, установленныйна корпусе объектива микроскопа, выполнен с дополнительным посадочнымместом, в котором установлен цилиндргидравлического приводного устройства,подпружиненном на поршне которого снизуукреплена верхним концом несущая вертикальная стойка,На Фиг, 1 изображено схематическибоковое сечение приспособления дляотметки клеток; на Фиг, 2 - разрезА-А на Фиг, 1; на фиг, 3 - разрезБ-Б на фиг, 1; на фиг, 4 - боковоесечение гидравлического приводногоустройства,Приспособление для метки, клеток содержит стяжной хомутик 1, зафиксированный на микроскопном объективе 2 винтом 3, стягивающим посадочное место объектива, несущую стойку 4, укрепленную в теле упомянутого хомутика и опускающуюся вдоль корпуса объектива, суппорт 5 на нижнем конце несущей стойки, оснащенный двумя направляющими 6, между которыми перемещается под действием винта 7 возвратно-поступательно в горизонтальной плоскости в сторону оптической оси 8 объективная выносная подпружиненная пружиной 9 металлическая пластинка 10 с резцом 11 на заостренном конце; установленным под углом, превращающим апертурный угол объектива, и вводимым в рабочее пространство между Фронталь. ной линзой объектива и препаратом,В стлжндм хомутике 1 во второмстяжном посадочном месте винтом 12зафиксирован цилиндр 13 гидравлического привода рабочей камерой кверху,на подпружиненном пружиной 14 пора-не 15 которого снизу укреплена верхнимконцом несущая стойка 4, а гидравлическое приводное устройство с микрометрическим контролем подачи рабочейжидкости, соединенное с помощью гибкой пластиковой трубки 16 со штуцером17 в верхнем торце цилиндра 13 гидравлического привода, помещено на. столерядом с микроскопом,5Гидравлическое приводное устроиство содержит инъекционный медицинский шприц 18, прикрепленный сверху к массивйой подставке 19, пружину 20 вокруг штока 21 шприца с упором ее 20 в тыльный торец 22 цилиндра 23 и пуговку 2 Ч под палец на штоке, а также микрометрическую винтовую головку 25 с остаточной и нониусной шкалами, укрепленную на подставке 19 таким образом, что при повороте рукоятки 26 микрометрической головки 25 по движению часовой. стрелки подвижный стержень 2/ микрометрической головки толкает шток 21 и поршень 28 шприца 18 30 вглубь цилиндра 23, и, наоборот, при вращении рукоятки 26 против движения часовой стрелки под действием пружины 20 шток 21 и поршень 28 шприца выдвигаются из глубины цилиндра 23,Приспособление для меток клеток работает следующим образом,Устанавливают под контролем светор вого микроскопа режущий кончик резца 11 в центре поля зрения, манипулируя винтом 7 на суппорте 5 и поворотом в посадочном месте после ослабления стяжки винтом 12 цилиндра 13 гидравли- ческого привода, Поднимают суппорт 5 с помощью приводной рукоятки 26 гидравлического приводного устройства в верхнее положение, при котором видно . резкое изс бражение объекта, а резец 11 не касается поверхности препарата, Производят изучение препарата и поиск структуры, связанных с задачей исследования, Обнаружив нужную структуру, опускают с помощью упомянутой рукоятки 26 гидравлического приводного устройства суппорт 5 до прикосновения режущего кончика резца 11 с поверхностью препарата в том месте, где должна быть сделена гравировкой первая линия обводной отметки, производят, манипулируя рукоятками для пере мещения препаратовддителя и подвижного стола предметного столика микроскопа, гравирование обводных линий метки вокруг объекта, По окончании первой метки рукояткой 26 гидравлического приводного устройства поднимают режущий кончик резца 11 над поверхностью препарата и выполняют описаннь 1 м выше способом все последующие метки,Предлагаемое приспособление дляметки клеток обеспечивает выполнениегравирования отметки вокруг выбран"ного объекта исследования при резком(сфокусированном) его изображении,Благодаря этому оператор может уверенно и бь 1 стро гравировать обводныелинии отметки на расстоянии.0,5-1,0 мкм от границ объекта, в товремя как известное устройство в условиях размытого дефокусированного)изображения из-за опасности задетьрежущим инструментом объект отметкипозволяет производить ее на расстоянии 5 - 10 мкм, т,е, на порядок дальше,Поскольку приспособление для метокклеток конструктивно сопряжено со световым микроскопом, как правило имеющимся в лабораториях электронной микроскопии биологического и медицинского профилей, и может быть изготовлено в виде приставки к нему, то,отпадает необходимость в разработкеи выпуске промышленным путем специального автономного прибора для этойцелиФормула изобретенияПриспособление для метки клеток, выполненное в виде установленного на корпусе объектива светового ми; кроскопа стяжного хомутика с укрепленным в посадочном месте последнего объективом микроскопа и несущей вертикальной стойкой, снабженной суппортом с двумя направляющими, между которыми установлена с возможностью во звратно-поступательного движения в горизонтальной плоскости выносная подпружиненная металлическая пластинка с резцом на заостренном конце, установленным под углом, превышающим901973 8 апертурный угол объектива, и вводимым 1, Аппельт Г, Введение и методы в рабочее пространство между фронталь. микроскопического исследования. М ной линзой объектива и препаратом, Медгиз, 1959, с, 303, о т л и ч а ю щ е е с я тем; что, сцелью получения резкого изображения ю 2. Авторское свидетельство СССР отмечаемого объекта и повышения точ- Г 429481, кл, 6 0 2 В 21/32, 1974, ности выполнения отметки, стяжной хомутик выполнен с дополнительным поса, Рейнгольд В.Н. Простое присподочным местом, в котором установлен собление для метки клеток культур цилиндр гидравлического привода, на 1 В тканей и клеток "толстых" срезов ткаподпружиненном поршне которого, снизу ней животного организма, залитых в укреплена верхним своим концом несу- полиметакрилате в форме плоскопаралщая вертикальная стойка, лельных пластинок". Ч ВсесоюзноеИсточники информации, совещание по электронной микроскопии. принятые во внимание при экспертизе 1 Ф Суммы, 1963, с. 107-108 (прототип).901973 Е-Р1 г.М Составитель .В. ВТехред И. Гайду ринКоррект Редактор Л, Горбун ЬЗ, Иакарен ПодписноСР еееетееееевеетееевв тввтфилиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 каз 12379/57 ВНИИПИ Госуд по делам 113035, Моск