Способ оценки действия антиаритмических факторов

СОЮЗ СОВЕТСКИХС 0 ЦИАЛИСТИЧЕСНИРЕСПУБЛИК 9) (11 А 1 В 5/00 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ ИЯс СКОМУ С ТЕЛЬСТВУ нстиесч Вагш, 1982,ДЕЙСТВИЯ АНТ ИАРИТОСУДАРСТНЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ 1 ОТКРЫТИЙ(71) Научно-исследовательский итут общей патологии и патологичкой физиологии АМН СССР(57) ИзобретенИе относится к биологии, точнее к физиологии и экспериментальной медицине, и предназначено для испытания новых антиаритмических средств, Цель изобретения - повы"шение специфичности способа. Для этого воспроизводят модель аритмии путемсоздания у подопытных крыс аостинфарктного кардиосклероэа. Для создания экспериментального кардиосклероза перевязывают .нисходящую ветвь левой коронарной артерии, Через 1,5-2 меспо наличиЮ белого рубца с очерченными краями (масса 85-90 мг, масса левого желудочка 760-820 мг, масса крысы 350-400 г) определяют постинфарктный кардиосклероз. Затем определяют электрическую стабильностьсердца у животных и электрический порог фибрилляции желудочков (ПФЖ) .Величину ПФЖ оценивают как минимальную силу тока в мА, при которой возникает фибрилляция. Одновременно сЭКГ и артериальным давлением регистрируют силу тока, вызывающего фибрилляцию, Нарушение электрической стабильности сердца - снижение ПФЖ иэкстрасистолия, возникающая в условиях постинфарктного кардиосклерозапри раздражении блуждающего нерва,устранимы традиционным антиаритмическим препаратом - лидокаином,а также ранее применяемыми антиаритмическими средствами, например, антиоксидантом ионола, немедикаментознымивоздействиями - адаптацией к периодическому действию высотной гипок- .сии или коротким стрессорным воздействиям. Предлагаемая модель является адекватной, пригодна для оценкипрямого терапевтического действияновых медикаментоэных и немедикаментозных антиаритмических факторов.2 табл,вой силы тока, составляющей 0,22- 0,28 В, последовательно с интервалом в 5 мин оценивают ответ на раздражение величиной в 2,3 и 4 порога. При этом регистрируют ЭКГ и артериальное давление в сонной артерии с помощью регистратора.Затем определяют электрический порог фибрилляции желудочков (ПФЖ). Для этого проводят торакотомию и с помощью электростимулятора, запускающегося от зубца К ЭКГ, раздражают сердце преждевременными одиночными прямоугольными импульсами длительностью 10 мс через коаксиальный электрод, введенный интракардиально в верхушку правого желудочка. Величи. ну ПФЖ оценивают как минимальную силу тока (мА), при. которой возникает фибрилляция, В этих экспериментах одновременно с ЭКГ и артериальным давлением регистрируют силу тока, вызывающего Фибрилляцию. На основе этого методического подхода показано, что нарушение электрической стабильности сердца, а именно снижение порога фибрилляции иэкстрасистолия, которая возникает вусловиях постинфарктного кардиосклероза при раздражении блуждающегонерва, могут быть устранены с помощьюантиаритмического препарата лидокаин,с помощью новых, ранее не применявшихся антиаритмических средств, например, антиоксиданта ионола, и наконец с помощью немедикаментозныхвоздействий, таких как адаптацияк периодическому действию высотнойгипоксии или коротким стрессорнымвоздействиям,Таким образом, предлагаемая модель реагирует на эффективные антиаритмические Факторы так же, как больное сердце человека, т.е. является адекватной и, вместе с тем, в отличие от существующих моделей, пригодна для оценки прямого терапевтического действия новых медикаментозных и немедикаментозных антиаритмических факторов, применяемых Ь форме курсовых воздействий, причем эффект этих факторов заведомо не завиДля оценки электрической стабильности сердца у животных с постинФарктным кардиосклерозом и параллельно у контрольных животных проводят опыты, которые состоят в том, что под нембуталовым наркозом (50 мг/кг) вначале оценивают реакцию1324640 гИзобретение относится к биологии,а именно к Физиологии и экспериментальной медицине, и может быть использовано для испытания новых антиаритмических средств. 5 ра ЭСЛ, После определения порогоЦель изобретения - повышение специфичности способа за счет использования селективной модели стабильнойаритмии и возможности оценки антиаритмического действия нефармакологических факторов.Способ осуществляется следующимобразом.Модель аритмии воспроизводят путемсоздания у животных постинфарктногокардиосклероза, который через1,5-2 мес после перевязки коронарнойартерии характеризуется наличием вмиокарде четко ограниченного соединительнотканного рубца и такими традиционными, количественно оцениваемыми нарушениями электрической стабильности сердца, как снижение в 2-3 разаэлектрического порога фибрилляции ипоявление значительной эктопическойактивности, т.е. выраженной экстрасистолии при торможении активностисинусного узла.Необходимость выдерживания животных в течение 1,5-2 мес связана 30с тем, что в течение этого срокаформируется плотный соединительнотканный постинфарктный рубец. При меньших сроках выдерживания рубец сформирован не в полной мере, а выдерживание в течение сроков, превышающих2 мес нецелесообразно в связи сразвитием у животных возрастных изменений,Для создания экспериментального 40кардиосклероза ,у животных (крыссамцов линии Вистар) перевязываютнисходящую ветвь левой коронарнойартерии. После этого животные находятся в клетках, в обычных условиях вивария, Через 1,5 мес постинфарктный кардиосклероз определяют поналичию белого рубца с очерченнымикраями, весом 85-90 мг, при весе ле"вого желудочка 760-820 мг и весекрыс 350-400 г.1324640 Таким образом, предлагаемая модельприменима для оценки действия новыхфармакологических факторов, которыепотенциально могут обладать антиаритмической активностью,П р и м е р 2. В табл.2 показановлияние адаптации к гипоксии и адаптации к коротким стрессорным воздействиям на электричесКую стабильностьсердца при постинфарктном кардиосклерозе.Данные представленные в табл.2свидетельствуют о снижении электрического ПФЖ и повышении эктопическойактивности при постинфарктном кардиосклерозе (через 2 мес после операции)и показано, что постепенная адаптацияживотных к периодическому действиювысотной гипоксии или повторным коротким стрессорным воздействиям устраняет эти нарушения электрическойстабильности сердца.В этих экспериментах адаптациюк коротким стрессорным воздействиямначинали через 30 дн после созданияэкспериментального инфаркта миокардаи проводили путем фиксации животныхв положении на спине в течение 15 дн:в 1 день на 15 мин, 2 день - 30 мин,3 день - 45 мин и остальные 12 дней -по часу. Такая адаптация повысилаэлектрический порог фибрилляциисердца до нормального уровня 6,30,5 мА и уменьшила количество экстрасистол в 2 разаАдаптацию к гипоксии проводили вбарокамере, начиная с 15 дня послесоздаиия экспериментального инфаркта:1-2 день на "высоте" 1000 м надуровнем моря в течение 2-х часов,далее каждые 2 дн высоту увеличивалина 1000 м до достижения уровня5000 м. После этого ежедневно увеличивали время пребывания в барокамерена 1 ч и доводили его до 6 ч. Всегоживотные получили 45 гипоксическихвоздействий, Такая адаптация приводила у животных с постинфарктным кардиосклерозом к увеличению порога фибрилляции до 5,3 мА и к 4-кратномууменьшению количества экстрасистолпри раздражении блуждающего нерва.Предлагаемый способ позволяетоценить не только предупреждающеено и прямое антиаритьжческое действие как фармакологических препаратов,применяемых одноразово или в видекурса, так и антиаритмический эффект сит от их антистрессорного и антиишемического действия.1П р и м е р 1. В табл.1 показано влияние лидокаина и ионола на электрическую стабильность сердца при 5 постинфарктном кардиосклерозе. Данные представленные в табл. 1, свидетельствуют о том, что у контрольных животных электрический ПФЗ составляет 6,4-0,2 мА, а экстрасистолия при10 брадикардии, вызванной раздражением блуждающего нерва, ограничивается отдельными случайными экстрасистолами, т.е. практически отсутствует. У животных с постинфарктным кардио 15 склерозом (через 1,5 мес после операции) того же возраста и веса электрический ПФЖ снижен в 2-2,5 раза, Брадикардия, возникающая при раздражении блуждающего нерва, сопровождается выраженной экстрасистолией. В среднем при равном времени раздражения блуждающего нерва у животных с постинфарктным кардиосклерозом возникли 62 экстрасистолы, а в контроле они отсутствовали. Введение животным одного из наиболее эффективных антиаритмических факторов .лидокаина в дозе 1 мг/кг под язык30 в растворе за 30 мин до опыта приводило к выраженному антиаритмическому эффекту, который проявлялся .в том, что порог фибрилляции повысился до 4,2-0,3 мА, а количество экстрасистол уменьшилось в 2 раза. Ранее не пременявшийся в качестве антиаритмического препарата антиоксидант ионол (2,6-ди-трет-бутил-метил-фенол), вводившийся животным регоз в40 суточной дозе 60 мгГкг в течение 4 дн до опыта, обладал не менее выраженным антиаритмическим действием чем лидокаин, и соответственно при-., вел к увеличению порога фибрилляции и уменьшению эктопической активности сердца. Таким образом, предлагаемая модель реагирует на традиционЭный антиаритмический препарат (лидо- каин) уменьшением вероятности фибрил 50 ляции сердца и количества экстрасистол, т,е. в принципе так же, как сердце человека, страдающего аритмиями, Во-вторых, раким же действием обладает ранее не применявшийся для подавления аритмий антиоксидиант ионол, антистрессорный и антиишемический эффект которого в данном случае не играет роли.1324640 Таблица 1 Порог фибрилляции, мА Группаживотных Контроль(п=10) 6,410, 2 0 Постинфарктный кардиосклероз (и) 2,9+О, 2 62+12 Постинфарктный кардиосклероз + лидокаин (п) 321-4 ф 4,2 т 0,3 Постинфарктный каридосклероз +ионол (и) 6,3+0,2 23,+5 Достоверно по сравнению с постинфарктным кардиосклербзом.Ф 1 Достоверно по сравнению с контролем. дозированной адаптации организма кфакторам внешней среды, Антиаритмический эффект указанных факторовреализуется на предлагаемой моделивне связи с их антистрессорным илиантиишемическим действием и подцает.ся строгой количественной оценке,т.е. является селективным. формула изобретения Способ оценки действия антиаритмических факторов путем применения этих Факторов на животных с моделью аритмии и выявления восстановления ритма сердца, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения специфичности способа эа счет использования селективной модели стабильной арит мии и возможности оценки антиаритмического действия нефармакологическихФакторов, в качестве животных используют лабораторных крыс, у кото рых создают экспериментальный постинфарктный ка 1)диосклероз путем перевязки левой коронарной артерии с последующим определением выраженностикардиосклероза по массе рубцовой 10 ткани через 1,5-2 мес после перевязки, у этих крыс оценивают снижениеэлектрического порога фибрйлляциисердца и повышение его зктопическойактивности при раздражении блуждаю щего нерва, после этого применяютантиаритмический фактор и оцениваютего действие по степени восстановления порога фибрилляции и эктопическойактивности,Среднее количество экстрасистолна 1 животное за 2 мин стимуляцииблуждающего нерва силой тока,равной 3 порогам1324640 аблица Порог фибрилляции, мА Группа животных Контрольи0 6,4-0,2 62+12 2,9-0,2 16+1 5,4+0,5 33+3 6,3+0,5"Достоверно по сравнению с постинфарктным кардиосклерозом..Достоверно по сравнению с контролем. Редактор О.Головач Заказ 2987/3 Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород,ул, Проектная, 4 Постинфарктныйкардиосклероз +иПостинфарктныйкардиосклероз +адаптация к гипоксии Постинфарктныйкардиосклероз +адаптацияк стрессу Среднее количество экстрасистол на 1 животное за 2 минстимуляции блуждающего нервасилой тока, равной 3 порогам Составитель Н.ГуляеваТехред И.Попович Корректор Л, Пилипенко Тираж 595ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5