Способ определения тетрациклина

1 Ю (1 И СОЮЗ СОВЕТСКИХПО 4 ИИЕПНемаРЕСПУБЛИК 48 21/78 ИЯ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ а,)Ъ4 61 ( ф г"Фармар. Орга 1981, ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ(56) 1, Гров Д.С. ипо лабораторным мето(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕТРАЦИКЛИНА путем обработки анализируемой пробы раствором гидрокснда натрия при рН 9,5 10 с последующим фотометрированием полученного раствора, отличающийся тем,что, с целью повышения селектнвности способа, полученный после обработки анализируемой пробы гидроксидом натрия раствор предварительновыдерживают до появления красногоцвета.1081487 а б л и ц а 1 Т бе на 25 мл. Берут приготовленногораствора 0,25, 0,5, ,2,5 мл в мерные колбы на 25 мл и доводят до метки раствором едкого натра, рН которого 8,5. Оптическую плотность измеряют череэ час на ФЭКпри светофильтре М б в кювете с толщиной слоя2 см. Предел обнаружения 0,010 мг/мл Оптическая плотность А Содержание, мг/мл 0,090 0,05 0,185 0,010Изобретение относится к аналитической химии, а именно к методамколичественного определения тетрациклина, и может найти применениепри анализе лекарственных препаратов и биологических объектов.Известен способ количественногоопределения тетрациклина, заключающийся в том, что точную навеску препарата растворяют в воде, обрабатывают раствором соляной кислоты ихлорного железа. Полученный окрашенный раствор фотометрируют 1 3Недостатком способа является низкая чувствительность (0,05 мг/мл )и неселективность, так как невозможно проводить определение в окрашенных растворах и в присутствиидругих антибиотиков.Известен также фотометрическийспособ определения тетрациклина путем обработки анализируемой пробыраствором хлорамина с последующимфотоколориметрированием полученногораствора ( 2 ,Недостатком данного способа такжеявляются малая чувствительность( 0,05 мг/мл )и недостаточная селективность,Наиболее близким к изобретениюпо технической сущности и достигаемому результату является способ фотометрического определения тетрациклина, основанный на обработке анализируемой пробы раствором гидроксиданатрия при рН 9,5-10 с последующимфотоколориметрированием полученногоокрашенного раствора через 5 мин ГЗНедостатком известного способаявляется его низкая селективность,так как в этих же условиях другиелекарственные вещества (окситетрациклин, новокаин, олеандомицин,витамины) окрашивают раствор такжев желто-зеленый цвет.Целью изобретения является повышение селективности способа.Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу, заключающемуся в обработке анализируемойпробы раствором гидроксида натрияпри рН 9,5-10 с последующим фотометрированием его, полученный после обработки анализируемой пробы гидроксидом натрия раствор предварительно выдерживают до появления красного цвета.П р и м е р 1. Точную навескупрепарата (0,0125 г ) растворяют вдистиллированной воде в мерной кол" П р и м е р 2. Точную навескупрепарата (0,0125 г) растворяют вдистиллированной воде в мерной колбе на 25 мл. Берут приготовленногораствора 0,25, 0,5, ,2,5 мл в мер 5 ные., колбы на 25 мл и доводят до мет"ки раствором едкого натра, рН которого 10,5 мл и далее поступают, какв примере 1. Предел обнаружения0,08 мг/мл.10 П р и м е р 3. Точную навеску ), препарата (0,0125 г) растворяютв дистиллированной воде в мернойколбе на 25 мл. Берут приготовленного раствора 0,25, 05,2,5 млв мерные колбы по 25 мл и доводятраствором едкого натра, рН которбго 10,0, далее поступают, как впримере 1, Предел обнаружения0,005 мг/мл.20 П р и м е р 4. Точную навескупрепарата (0,0125 г ) растворяют вдистиллированной воде в мерной колбе на 25 мл, Берут приготовленногораствора 0,25, 0,5,2,5 мл в мерные колбы на 25 мл и доводят до метки раствором едкого натра, рН которого 9,5, далее поступают как в примере 1. Предел обнаружения 0,005 мг/МлП р и м е р 5. Точную навеску:препарата (0,0125 г) растворяют вЗ 0 дистиллированной воде в мерной колбе на 25 мл. Берут приготовленногораствора 0,25,0,5,2,5 мл в колбына 25 мл для трех серий, доводятдофметки раствором едкого натра, рН35 которого 9,5-10,0; выдерживают пер. вую серию 45 мин, вторую - бО мин,третью - 75 мин. Пределы обнаружения для трех серий соответственноОу 001 мг/млу 0005 мг/мл и 0,003 мг/мл.П р и м е р б. Приготовление калибровочного графика для количественных определений тетрациклина щелочью.,Точную навеску препарата(,0,0125 г ) растворяют в дистиллиро-ванной воде в.мерной колбе на 25 мл45 Берут приготовленного раствора0,25,0,5,2,5 мл в мерные колбына 25 мл, доводят до метки раствором едкого натра, рН которого 9,510,0, и далее поступают как в приме 50 ре 1.Раствор продукта реакции подчиняется основному закону светопоглощения в пределах концентраций 5 10--5 10 2 мг/мл,55 Калибровочный график для количественных определений тетрациклинащелочью приведен в табл. 1,Оптическаяплотность А 0,275 0,315 0,450 0,540 0625 0,720 Результат определения тетрацикли, на в смеси с окситетрациклином приведен в табл. 2. 0,805 0,900 Таблица 2 Метрологические характеристики: и а 10, ОМ 0,96, С2,2 Найдено препарата щЧ таЪг/млу в навеске, Опыт М100,5= 2,56Ч=1,6 0,01950 02030,0203 .0,0200 0,363 0,370 0,370 0,365 98,5101,5101,5100,0 . 2. 3. 4. Щ 2,2 16.фй ф 0,02040,2010,0197 5. 100,5 + 1,1 б,7,0,0201 8. 0,0204 0,0195 10,98,5 ф П р и м е р 8. КоличественнОе оП мп, далее поступают, как в приределение тетрациклина в смеси с но- . мере б и расчеты ведут по формуле(1) вокаином. 55Точную навеску тетрациклина Результат определения тетрацик 0,1000 г и новокаина 10 г 1 раст- лина в смеси с новокаином приведен воряют в воде в мерной колбе на ,в табл. 3. 0,015 0,020 0,025 0,030 0,035 0,040 0,045 0,050 0,373 0,368 0,365 0,368 0,374 0,362 1 П р и м е р 7. Количественное определение тетрациклина в смеси с окситетрациклином. Точные навески 0,1000 г тетрациклина и 0,5000 г окситетрациклинарастворяют.в воде в мерной колбе на200 мл. В мерную колбу на 25 мл переносят 1 мл раствора и далее поступают, как описано в примере б. Расчет 10 содержания,тетрациклина в навеске вмг проводят по ФормулеФ 25200, (1 15где В - содержание тетрациклина,мг/мп. 102,0 100,5 100,0 100,5 102,0(О, 1000 г ) и олеандомицина (010500 г)растворяют в воде в мерной колбе3 Таблица 4тШЙ Найдено препарата Метрологические ха- рактеристики 3В навеске, и = 10, с(, 0,95,мг Е 22 Опыт а(мг/мл) Х фг 100,451,23 Ч щ 1,11 98,5 99,5 2. 101,5 101,5 3. ЕЧЧ 111122 0 77 3 Го 40,368 0,364 0,370 5. 100,45 + 0,77 6. 7. 0,368 8. 0,3660,371 9,10 0,363 0,370 0,370 0,365 0,373 0,368 0,365 0,368 0,374 0,362 0,363 0,364 0,370 0,371 0,0195 0,0203 0,0203 0,0200 0,0204 0,0201 0,0197 0,0201 0,0204 0,0195 0,0195, 0,0198 0,0202 0,0202 0,0201 0,0198 0,0202 0,0201 0,0200 0,0202 102,0 100,5 100,0 100,5 102,0 е вт а 1на 200 мл, далее поступаютгкак впримере 6 и расчеты ведут по Формуле (1).Результаты определения тетрациклина и смеси с олеандомицином при, веВены в табл 4,1081487 в и Составитель ВШкилькова Редактор В. цанко Техред,К.Кузьма . Корректор М. шарохинЗаказ 1537/36 Тираж 823 Подписное ВНИИПИ ГосударственнОго комитета СССР по делам .изобретений и открытий 113035, Москва, 3-35, Раушская наб., д. 4/5а4 МФилиал В 1 П "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 В аналогичных условиях при опре- делении тетрациклина известным спо-собом фотометрированне проводят через 5 мин пОсле обработки аналчзируемой пробы. В течение этого времени раствор приобретает светлый желто-зе Леный цвет. В анализируемой пробе тетрациклина с другими препаратами, например окситетрациклином, олеандомйцином, новокаином, в растворах происходит наложение цветов и фотомет-" рируется смесь веществ. Следовательно, определить тетрациклин в присутствии других лекарственных препаратов известным способом невозможно,Таким образом, предлагаеьый способ имеет высокув,чувствительность (0,005 мг/мл) и селективность, так каК позволяет определить тетрациклин в присутствии других лекарственных препаратов.Ф