Способ консервирования крови

(51) М Кл А 61)с 27/10 Государственный коннте Совета Мнннстров СССР во делан изобретений н открытий(45) Дата опубликования описания 3 Л 2. ейндорфер ( Иностранцыон Майкл Брэйк и Фред Ге 2) Авторы изобретен Иностранная фирма71) Заявитель, Американ Хоспитал Саплай Корпорейшн (США) СОВ КОНСЕРВИРОВАНИЯ КРОВ(54) Изобретение относится к области гематологии.Известен способ консервирования крови путем добавления к крови консервирующих растворов, содержащих антикоагулянты.Однако такой способ не обеспечивает длительного хранения крови.,С целью увеличения срока хранения крови,по предложенному способу добавляют также дигидрооксиацетон в количестве 20-100 мр 1 на 1 л крови.В качестве антикоагулянтов используют раствор антикоагулянта цитрата декстрозы (АЦД) и раствор антикоагулянта цитрата фосфата декстрозы (ЦЩ 9 . Антикоагулянт цитрата декстрозы является стерильным раствором лимонной киолоты, цитрата натрия и декстрозы в воде, пригодной дляинъекции. Лимонная кислота и цитрат натрия обеспечивают ионы цитрата для предотвращения коегуляции крови, а декстроза служит главным источником знергии для красных кровяных клеток . В санкционированных рецептурах АЦД 1,84 г декстрозы предусматривается на 500 мл цельной крови. Декстрозу в атом растворе рассчитывают на основе моногидрата декстрозы, но декстрозу могут добавлять в безводной форме при использования 1,68 г безводной декстрозы на 500 мл крови.Раствор антиноагулянта ЦФДявляется стерильным, пригодным для инъекций водным раствором лимонной, кислоты, цитрата натрия, бифосфата натрия и декстрозы. Лимонная кислота и цитрат натрия обеспечивают ионы трата для предотвращения коагции. Девстроза является моногидратной, ее смешивают в количестве, соответствующем 1.,79 г на 500 мл крови, или 1,63 г, если ее добавляют в виде . безводной девстрозы.При использовании водных антивоагулянтных растворов сахара (а именно АЦД и ЦФД для подмешивания к свеже- собранной крови врове-антивоагулянтные растворы хранят под охлаждением, но без замораживания (при температуре 1-6 С). При таких условиях хранения ирасные кровяные клетки остаются жизнеспособными до 21 дня.Дигидроовсиацетон вводят в раствор антивоагулянта первоначально с целью увеличения или поддержания содержания 2,3-дифосфоглицерат (ДФГ) в свеже- собранной крови. йгидроовсиацетон не является токсичным, он безопасендля вливания в количествах, необходимых для этой цели.Дигидрооксиацетон можно иопользо= вать в комбинации с аденином или пируватом (соль или э 41 ир пировино= градной кислоты) или инозином. Желаемая комбинация добавов ввлючает дигидрооисиацетон с аденином и пируватом, или дигидрооксиацетон с аде- нином, инозином и пирувато. При таких комбинациях вав уровни АТФ, тав и уровни 2,3-диосфоглицерат могут улучшаться в течение 1-21 дня хранения или может увеличиваться время хранения от 1 до 3 недель (общее время хранения 28-42 дня при 1-68)Для сбора и консервации крови применяют санкционированные виды контейнеров, стеклянные или пластмассовые вонтейнеры.Раствор антииоагулянта внутри контейнера содержит антивоагулирующее вещество для предотвращения воагуляции крови и источнив сахарной энергии для красных кровяных влетов . Ис-. точником сахарной энергии красных кровяных влетов является декстроза,но могут использовать фрувтозу, ман-./л растворантивоагулян75 мл) 0,5 лВРОВИ 5-1005-1000,1-200,1-1,0 3,45-6910,8-51,80,09-18,00,11-1,10 ДИГИДРООИнозйнПируватАденин иацет атрия Могут использоваться д ниии ионов пирувата . Прим ся пирувиновая (пировиног лота, рН растворов антиио жет быть около 5 для АЦД ИРД: Однако для более шир вала может применяться рН угие исто еромрадна вляет ) вис та мо интер. имер возу, галаитозу. Количество применяемой деистрозы может быть 1,7-1,9 г на 500 мл крови, Но можно применять де=. гидроовсиацетон в достаточной концентрации вав дополнительный или альтернативный источник энергии для красных кровяных клеток.Блок сбора и вонсервации должен содержать 5-10 ммолей дегидрооисиацетона на 1 л крови. Если контейнер объемом на 500 мл крови, то неооходимо вводить раствор антииоагулянта не более, чем 50 мл дегидрооксиацетона. Там где дегидроовсиацетон используется для поддержания 2,3-Д 4 Т и обеспечивается источник сахарной энергии, то дегидрооисиацетон применяют в количестве 30 мМ на 1 л крови.Но содержание девстрозы или экьивалентого сахара в растворе антивоагулянта может снижаться. Поэтому воличество сахара ограничивается до 2,0 г моногидрата декстрозы на 1 л крови, дегидроовсиацетон вводят в количестве 20100 мМ на 1 л крови.Дегидроовсиацетон может использоваться в комбинации с инодином, пируватом или аденином. Подходящие количестьа этих веществ приведены в табдо 9 (особенно выше 7), Дегидроонси ацетон добавляют к свежей крови немедленно после сбора свежей крови .Одновременно с отбором нрови и немедленно после введения ее в контейнер с ней смешивают от 5 до 50 мМ дегидроонсиацетона на 1 л крови.Дегидроонсиацетон должен быть растворен в стерильном растворе, таком кан стерильная вода или водный раствор антикоагулянта, содержащий денстрозу или другие ингредиенты. Смесь нрови с дегидроонсиацетоном затем хранят при температуре ниже 10 С, а именно от 1 до 6 С, она может храниться в течение 21 дня.В конце этого периода времени нровь будет содержать значительно больше 2,3-ДФР, чем кровь, сохраняемая при тех же условиях, но без дегидрооксиацетона . Кровь может храниться дольше 21 дня, причем она будет лучше по качеству в отношении содержания 2,3-27 Т, чем кровь, сохраняемая стандартным способом (применение антиноагулянтных цитрат - денстрозовых растворов или антиноагулянтных цитрат-фосфат-денстрозовых растворов ).П р и м е р 1. Безводную лимонную кислоту (7,3 г), дигидрат цитрата натрия (220 г), моногидрат денстрозы (24,5 г ) и дигидрооксиацетон (12,0 г ) растворяют в пригодной для инъекций воде (800 мл), раствор доводят водой до 1 л и фильтруют через фильтр с размером пор 0,8 мМ. Раствор в полости или сосуде для крови в отношении 75 мл раствора на 500 мл крови, подлежащей сбору, стерилизуют в автоклаве при 116 С в течение 20 мин.П р и м е р 2 . Дигидрат цитрата натрия (31,0 г), моногидрат бифосфата натрия (0,041 г), гептагидрат двуосновного фосфата натрия (0,344 г), моногидрат декстрозы (25,5 г.) и дигидроонсиацетон (12,9 г) растворяют в пригодной для инъекций воде (800 мл) и раствор доводят водой до 1 л и стерилизуют фильтрацией через фильтр с размерами 0,22 мкм. Применяя асептичес,5кие методы, раствор помещают в стерильную полость или сосуд для нрови(причем 70 мл раствора добавляли на1 о каждые 500 мл крови, подлежащей сбору).П р и м е р 3. Используют те жеприемы, что в примерах 1 и 2, но нводному раствору добавляют 51,8 г аденина.П р и м е р 4. Используют те жеприемы, что в примерах 1-3, но н водному раствору добавляют 9 г пируватанатрия.П р и м е р 5. Используют те же25 приемы, что в примерах 1-4, но к раствору добавляют дополнительно 22,1 гдигидрооксиацетона, а денстрозу недобавляют.П р и м е р 6. Используя приемы,описанные выше, дигидроацетон можновводить в другие антиноагулянты,АЦД или ЦЯЩ-аденин.Использование АЦД и Ц 9 Дс адениномможет продлить время хранения до4 о 35-42 дней, исходя из выживания эритроцитов са иихф , но при этом уровни ДГРГ слегна уменьшаются по сравне 45нию с АЦД и ЯРД. Обычный уровень аденина равняется 0,5 мМ на литр нрови.АЦД (или ЦЩ рН 6-8 с адениномили без него. Сохранение рН выше 6501или 7 (щелочной рН 7-9) способствуетподдержанию ДРГ. Уровень АТф падаетв течение первой недели (или двух не 55 дель) хранения,Добавка пирувата помогает предотвратить падение АТф. Обычным уровнемпирувата является 0,1 мм на литр крови, это поддерживает уровень ДУГ натри недели.Инозин поддерживает уровни ЛЧТ65примерно на 4 недели. Концентрацияинозина равняется 10-15 мМ на 1 лкрови. Инозин при более низком уровне7 оможет также добавляться к крови после493059 Составитель СМЭЛЮТИНЯРедактор АеБЕР Техрефсдуру 1 ПИНа Корректор ВЛИЕИТЯ Изд./ДЯ Тираж 559 Подписное Заказ ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, М(-35 Раушская набд. 4/5ППП Патент" Москва, Г, Бережковская наб 24 2-3 недель хранения. Аденин может добавляться в начале хранения,Инозин и.пируват, действуя совместно, поддерживают ДФ 1 уровни на 5 недель.П р и м е р 7. ЦФД-аденин-аскорбат-дигидрооксиацетон,Дигидрат цитрата натрия (30,8 г),безводная декстроза (23,2 г), дигидрооксиацетон (14,7 г), аденин (0,55 г),аскорбиновая кислота (8,1 г) и моногидрат бифосфата натрия (2,22 г) растворяют в пригодной для инъекций воде(800 мл) и раствор доводят водойдо 1 л, его стерилизуют фильтрациейчерез стерильный фильтр (0,22 мкм).Используя асептические методы, 70.млраствора помещают в стерильные полостидля сбора 500 мл крови, Полости упаковывают в металлические банки под азотом. Рецептуры для стерилизации нагревом без разрушения аскорбата и дигидрооксиацетона разделяют на две части,которые устойчивы к авток.лаву. Передвытягиванием крови две части вновьсоединяют, используя пластмассовыеполости, соединяемые пластмассовымитрубочками. Одна из этих полостейнаходится в ведущей трубке линии емкостью 15 мл. Другая является полосты для сбора крови емкостью 500 мл. Дигидрат цитрата натрия (38,3 г), 1аденин (0,68 г), аскорбиновая кислота(11,1 г) и моногидрат бифосфата натрия(2,76 г) растворяют в пригодной дляинъекций воде (800 мл) и раствор доводят водой до 1 л; 56,4 мл помещают 1 с в полость для крови емкостью 500 мл.Раствор для наполнения 15 мл ведущей трубки приготавливают путем растворения безводной декстрозы (105,6 г)и дигидрооксиацетона (0,69 г) в пригодной для инъекций воде (800 мл);раствор доводят водой до 1 л;рН 2 с 3,8-4,2. 15,4 мл помещают в полостьи выдерживают в автоклаве 20 мин при116 С, затем охлаждают в воде и поме щают в металлическую банку под азотом.Комбинация аскорбиновой кислоты идигидрооксиацетона повышает или подзодерживает содержание 2,3-Д 1 Ф красныхкровяных клеток до удовлетворительнойстепени.35 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСпособ консервирования крови путем 1 добавления к крови консервирующего раствора, отличающийся тем, что, с целью увеличения срока хранения крови, добавляют также дигидрооксиацетон в количестве 20-100 мМ на литр крови.