Способ диагностики иммунодефицитного состояния

)АГОСПАТЕНТ ССС АТЕНТНО АНИЕ ИЗОБРЕ МУ СВИДЕТЕЛЪСТВУИ К АВТ1 способа. Сущность изобретения: исследуют фагоцитарную активность лейкоцитов у больного одновременно с контрольным лицом (донором) с заранее установленным уровнем фагоцитоза по отношению к среднему его уровню в контрольной группе здоровых людей. В качестве показателя фагоцитоза дополнительно определяют от- ношение суммы объектов, поглощенных ак тивными фагоцитами, к общему числу неактивных и малоактивных фагоцитов и результаты исследования у больного выражают в процентах к показателям контрольноголица, пересчитанным на средний уровень показателей в контрольной группе, 1 табл. медицин- , Н.М,Ваования в .В.МеньУН Еспрессостояточно к а ится к медицине и ано для выявления ной защиты и в качеенному иммунологио но(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ИМфИЦИТНОГО СОСТОЯНИЯ(57) Использование: медицина, экагностика иммунодефицитных с1 Цель изобретения - повышение Изобретение относ11 может быть использовнедостаточности иммун1 ястве показания к углубл,ческому исследованию, .Цель изобретения заключается в повы: :шении точности способа,Это достигается тем, что в группе доно, ров при одномоментном исследовании уста,навливают нормативное значение фагоцитарного показателя в процентах от 1 его среднего значения в группе и отбирают ;лиц, которые служат эталонами среднего ,уровня фагоцитоза у здоровых людей, исследование у больного производят одновре 1 менно с лицом, служащим эталоном, по , показателю последнего рассчитывают сред,;ний уровень фагоцитарного показателя, ре.зультат исследования у больного выражают в процентах к этому уровню и при величине полученного показателя ниже его норматив- а ного значения диагностируют недостаточ- Ор ность иммунной защиты. Кроме того, в качестве показателя определяют отношение суммы объектов, поглощенных активными фагоцитами, к общему числу неактивных и малоактивных фагоцитов, ОдПредлагаемый способ отличается от из- ф вестного следующими признаками.В предлагаемом способе устанавливают норматив уровня фагоцитарного показателя и оценку результатов исследования у больного осуществляют по этому нормативу. Величина нормативного показателя не зависит от методики исследования и условий его осуществления.Исследование у больного проводят дновременно с лицом, служащим этало м5 10 15 20 45 50 55 норматива среднего уровня фагоцитарногопоказателя, и уровень фагоцитарного показателя у больного оценивают по отношениюк эталону,В качестве показателя фагоцитоза дополнительно определяют отношение числаобьектов, поглощенных активными фагоцитами к общему числу неактивных и малоактивных фагоцитов.Способ осуществляют следующим. образом.Для исследования фагоцитарной активности лейкоцитов цельную кровь, стабилизированную любым антикоагулянтом,смешивают с равным объемом взвеси любых подходящих бактерий (концентрациявзвеси - 0,5 - 1 млрд. микробных тел на мл)или эритроцитов из антигенных эритроцитарных диагностикумо 9 (концентрация -50-60 млн. мл), выдерживают в термостате20 мин. Изготовляют мазки и окрашиваютих по Романовскому-Гимзе, При микроскопировании мазка его площадь условно делят. на три части и в каждой из нихучитывают по трети от общего числа подсчитываемых лейкоцитов. Определяют фагоцитарную активность 100 изолированнорасположенных нейтрофильных лейкоцитов, Определяют процент фагоцитирующихклеток и число объектов, поглощенныхкаждым фагоцитом. Рассчитывают числообьектов в среднем на каждую из 100 сосчитанных клеток (Фагоцитарный индекс,или число 1, Фагоциты распределяют по сте-пени активности на три группы: неактивные(нулевые), малоактивные (с поглощениемодного обьекта) и активные(с поглощениемдвух и более обьектов), Подсчитывают сумму обьектов, поглощенных активными фага цитами, и делят ее на общее числонеактивных и малоактивных фагоцитов (индекс активности фагоцитов - ИАФ).Для установления нормативного значения фагоцитарного показателя у взрослыхлюдей и отбора эталонов среднего уровняфагоцитоза одномоментно обследуют группу здоровых люлей (доноров) в возрасте 18 -55 лет числом не менее 15. У каждогообследованного определяют величину фагоцитарного индекса (ФИ) и индекса активности фагоцитов (ИАФ), вычисляют среднюювеличину каждого показателя и показателикаждого донора выражают в процентах ксредней величине соответствующего показателя. Самый высокий и самый низкий относительные показатели служат крайнимиграницами норматива уровня фагоцитоза уздоровых взрослых людей, По многочисленным исследованиям авторов изобретения иматериалам литературы крайние границы норматива фагоцитарного индекса составляют 45-171Из обследованных лиц выбирают таких, которые могут служить эталонами среднего уровня фагоцитоза, В качестве таковых берут лиц с относительным уровнем фагоцитарного псказателя, близким к 1000 или выше него,При диагностическом исследовании определяют фагоцитарную активность лейкоцитов одновременно у больного и лица, служащего эталоном. По результатам исследования эталона рассчитывают средний уровень фагоцитарного показателя в натуральном выражении. Данные исследования у больного выражают о процентах к этому рассчитанному среднему уровню и сопоставляют с нормативным значением показателя, Выход показателя за пределы нижней границы показателя указывает на недостаточность иммунной защиты, а превышениеверхней границы .норматива указывает нареактивное повышение фагоцитарной активности лейкоцитов,Для проведения диагностического исследования у детей предварительно формируют норматив фагоцитарного показателядля соответствующей возрастной группы.Для этого обследуют 20 здоровых детей соЗ 0 ответствующего возраста с одним-двумя лицами. служащих эталонами среднего уровняфагоцитарного показателя у взрослых, Порезультатам исследования у эталона рассчитывают средний уровень фагоцитарногоЗ 5 показателя для взрослых и по отношению кнему рассчитывают в процентах величиныфагоцитарного показателя у каждого ребенка, Устанавливают норматив верхнего,среднего и нижнего уровней показателя,40 Диагностическое исследование у больного ребенка проводят одновременно. с лицом-эталоном. Вышеописанным приемомрассчитывают в процентах величину фагоцитарного показателя у ребенка и сравнивают ее с нормативным показателем этой группы детей.П р и м е р 1. Диагностическое исследование у взрослого больного туберкулезом.Для определения норматива уровня фагоцитоза и создания эталонов его уровня обследованы 19 доноров в возрасте от 22 до 45 лет.В качестве объекта фагоцитоза взяты эритроциты из сухого эритроцитарного диагностикума из шигелл Зонне, Эритроциты прокрашены насыщенным раствором анилинового красителя черного цвета, отмыты от избытка краски, приготовлена густая взвесь эритроцитов в физрастворе. После отстаивания взвеси в течение 30 мин взя 1 а, верхняя часть взвеси. лишенная конгломе; :ратов эритроцитов, Взвесь разведена физ, раствором до концентрации зритроцитов 50 ,:млн/мл.Кровь доноров стабилизирована гепа; рином из расчета 25 Л 1 Е/мл, Кровь в обьеме ; 30 мкл смешана с равным объемом взвеси ; эритроцитов. Все пробы одновременно по, мещены в термостат на 20 мин при перио: дическом встряхивании пробирок спробами. С помощью устройства для изго; товления мазков на предметных стеклах , .:сделана серия маленьких мазков размером18 х 3,5 мм перпендикулярно к длиннику : :стекла. В мазках определен фагоцитарныйиндекс и индекс активности фагоцитов,Результаты определения фагоцитарно, :го индекса: средняя величина - 0,83, мини-мальная величина - 0,41 (49% от средней : :величины), максимальная величина 1,20(145% от средней). Нормативная величина . :;фагоцитарного индекса - 49 - 145%,Результаты определения индекса ак: тивности фагоцитов: средняя величина -0,80, минимальная 0,21 (26% от средней), : максимальная 1,46 (182%). Нормативное : значение ИАФ - 26-182%.Больной туберкулезом, 42 лет, обследован одновременно с донором, служащим : эталоном, с относительными величинами . :ФИ 112% и ИАФ 120% от среднего значе ния в вышеприведенной группе доноров.При исследовании получены следующие результаты: у больного ФИ - 0,16 и : ИАФ - 0,08; у лица-эталона ФЧ - 0,88 и ИАФ - 1,41. Расчет по данным эталона среднего уровня фагоцитарных показателей для здо: ровых людей: 100% от ФЧ 0,88 составляет 0,79 и 100% от ИАФ 1,41-1,18. Рассчитан ные к этим величинам относительные уров: :ни составили для ФЧ 20% и для ИАФ 6%. : По результатам исследования сделано за. ключение о наличии у больного выраженнойнедостаточности иммунной защиты к нетуберкулезным микробам.Предлокенным способом обследованы 38 больных туберкулезом. У 5 из них выявлена недостаточность иммунной защиты с относительной величиной ФЧ 13 - 36% и ИАФ - 3 - 14%. У 6 больных установлена стимуляция фагоцитоза с относительными величинами ФЧ 167-288% и ИАФ 190-.318%П р и м е р 2. Пример диагностического исследования при бронхолегочной патологии у детей.Девочка в возрасте 1 г,4 мес, с диагнозом: острая респираторная инфекция; двусторонняя очаговая бронхопневмония, 30 П р и м е р 3, Пример диагностического. исследования в динамике заболевания, 35 40 таблице. 50 55 5 10 15 20 25 При предварительном определении нормативных показателей у 20 здоровыхдетей в возрасте 1-2 года с эталоном уровня фагоцитоза были установлены следующие показатели в процентах к среднему уровню здоровых взрослых людей: среднее значение ФЧ 84% и его нормативное значение - 46-137%, среднее значение ИАФ 86% и его нормативное значение - 18 - 228%.Ребенок обследован одновременно с лицом-эталоном с относительным уровнем ФЧ - 130% и ИАФ - 121%, Результаты исследования у больной; ФЧ - 0.24 и ИАФ - 0,02, соответствующие показатели у эталона - 1,20 и 1,48, Расчет по эталону среднего уровня здоровых людей дает показатели ФЧ - 0,92 и ИАФ - 1,22. Выраженные в процентах данные больной дают относительную величину ФЧ - 26% и ИАФ - 2%. У больной выраженная недостаточность иммунной защиты, особенно по критерию ИАФ,При обследовании предлагаемым способом 92 детей от 1 мес, до 3 лет с различными формами бронхолегочной патологии (обструктивный бронхит, острая и хроническая пневмония) выявлена недостаточность иммунной защиты у 61 ребенка (66% положительных результатов) Девочка в возрасте 3 мес 27-й деньзаболевания. Диагноз: ОРВИ, двухсторонняя пневмония с затяжным течением, Проведено исследование в динамике заболевания одновременно с постоянным. лицом эталоном с относительными значениями показателей ФЧ - 132% и ИАФ -120%. Результаты исследования представлены в По результатам исследования было сделано заключение о выраженной недостаточности иммунной защиты при первом исследовании и заметном снижении уровня показателей при втором исследовании в сравнении с показателями при выздоровлении,При исследовании в динамике 19 детей с бронхолегочной патологией было установлено снижение показателей относительно периода выздоровления у всех детей.Формула изобретения Способ диагностики иммунодефицитного состояния, включающий приготовление мазков крови с последующим учетом величины фагоцитоэа в сравнении с контролем,отличаю щийс ятем,что,с целью повышения точности способа, в качестве фагоцитарных объектов используют эритроциты, окрашенные анилиновым красителем,1837231 Индекс активности фагоцитов фагоцитарный индекс День за- болева- ния Больная Средний уровень здоро- вых Эталон Средний уровень здоро- вых Больная Эталон абс,во к среднему уров- ню вк среднему уровню взрослых абс,взрослых взрослых взрослых 0,97 1,88 1,89 19 40 0,21 0,63 0,98 24 54 70 1,16 2,26 2,27 0,88 1,17 1.40 0,04 0,36 0,72 1,16 1,54 1,84 27-й44-й2 мес,после выздоровленияСоставитель В; КаплинТехред М,Моргентал Корректор А. Обручар Редактор Заказ 2863 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственноо комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 и производят двойной контроль, для чего общее число неактивных и малоактивных предварительно формируют группу доно- фагоцитов, затем по результатам исследоров, определяют в ней границы крайних вания донора рассчитывают среднюю везначений показателя в процентах к его личину фагоцитарного показателя для средней величине, а величину фагоцитоза.5 группы доноров с последующим расчетом учитывают одновременно в мазке пациен.- в процентах результата исследования у пата и в мазке донора, при этом регистриру- цивнта относительно этой средней величиют число активных, малоактивных и ны, и при значении показателя ниже его неактивных фагоцитов во всех мазках, мйнимального уровня" вгруппедоноровдиподсчитцвают сумму объектов, поглощен агностируют иммунодефицитное состояных активными фагоцитами, и делят ее на ние,