Способ получения витогепата

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 82 гтЯ 2 и)т А 61 К ЗМ 407 ГОСУДАРСТВЕН ЮЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССРГОСПАТЕНТ СССР)(21) 4921368/14 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВИТОГЕПАТА (22) 25.03.91 .: (57) Использование; в медицинской промыш- (46) 15.06,93. Бюл. М 22 лекности для получения противоанемическо-(71) Всесоюзный научно-исследователь- го препарата из печени крупнорогатого ский и проектно-конструкторский инсти- Скота, Цель - интенсификация способа. тут микробиологических производств и Сущйость изобретения: при обработке Производственное объединение "Белмед- обвзжирвнного водною концентрата высо-препараты" : :. ла сорбент разделяют на две равные части, (72) АкС,Чехольский, И.Я.Казакевич; 3.8,8 о-,вводят первую часть и перемешивают в течелосатов, ВМ.Царенков и А.А;Фиазнович . Фее 13-2 ч. Вводят вторую часть и переме- (56) Промышленный регламентнапрочизводг-" : шивают в течеййе 1,5-2 ч. Положительйый ство витогепата. Утвержден 28,09,84 г, ПО . эффект: проЦесс сокращается в среднем на "Белмедпрепараты".: .: 12-13 ч, 1 табл. Изобретение относится к медицинскойч.ваниееготэфйромги обработкуактивирован-. промышленности в частности к способам .ным углем в качестве Сорбента при объемом получения лекарственных препаратов изсоотношении высола исорбента 4,5:1, отде-материалов млекопитающих животных, и : . лениесорбентаипромываниеегоэтиловым может найти применение в производствеспиртомпри 79-80 С,фильтрацию элюата лекарственного средства "витогепатн из пе- и выпаривание фильтрата, отличается чени крупного рогатого скота, ,. тем, что при обработке высола сорбен- ьтом, сорбент разделяют на две равные (рЦелью изобретения является ускорение частивводят первую часть и перемешипроцесса получения препарата.за счет со- вают в течение 1,8-2 ч, затем вводят кращения времени проведения стадии ад- вторую часть и перемешивают в течение сорбции. 3,5-2 ч.Указанная цель достигается тем, что .: Этот или тождественныйспособ получезаявляемый способ получения витогепа-.ния витогепата" ке описан в патентной, ната, включающий гомогенезацию печени,: учно-технической литературе и других экстракцию гомогената фосфатнммоуфе, источниках инФормации. ром, разделение на твердую и жидкуюфазы, высаливание жидкой фазы сер- Отличительный, по сравнению с протонокислым аммонием с последующетй типом, прйэйак не содержится в аналогичфильтрацией, обработку высола атило-йых и других технических решениях. вым спиртом, выпаривание до полученияИзобретениепозваляетэиачительносоводного концентрата высола, обезжири- кратить процесс поглучеиися витогепата.Заявляемый способ получения витогепата осуществляют следующим образом.Печень крупного рогатого скота дефростируют и гомогенезируют, Гомогенат помещают в реактор для экстракции,которую осуществляют двумя объемамифосфатного буфера с рН 7,5-8,0, при. 1200 С в течение 2 - 3 ч. Затем центрифугированием от экстракта отделяют жмых, который подвергают повторной экстракции. Фосфатным буфером при тех же условиях. Обе порции экстракта обьединяют иподвергают высаливанию сернокислымаммонием в количестве 500 - 600 г на 1 лэкстракта при рН 5 - 6. Раствор фильтруют,с фильтра снимают осадок-высол, которыйподвергают пятикратной обработке 65 ф- ным этиловым спиртом при 60 С в течение1 ч, Спиртовой экстракт высола от пятиэкстракций обьединяют в реакторе и отстаивают в течение 12 ч, после чего выпаривают (на установке "Ротофильтр").Полученный водный концентрат высолаобезжиривают в течение 30 мин эфиром вколонне из расчета 0,5 л эфира на 1 л высола. Обезжиренный водный концентрат высола обрабатывают активированным углемв качестве сорбента при объемном соотношении высола и сорбента 4,5:1. Для этогосорбент разделяют на две равные части,сначала вносят первую часть сорбента исмесь перемешивают в течение 1,5-2 ч, затем вносят вторую часть сорбента и перемешивают в течение 1,5-2 ч. Смесь Фильтруют,на друк-фильтре, выделенный уголь отмыва.ют дистиллированной водой для удалениясульфат-ионов, Отмытый уголь эл 1 оируют770-ным этиловым спиртом при 79-80 Стрехкратно. Элюат трех элюций объединяюти фильтруют, а затем подвергают вакуумвыпарке при 30-350 С и вакууме 0,090,096 МПа до 18 - 1/10 первоначальногообьема элюата,Проведение стадии адсорбции двумячастями сорбента с перемешиванием смесив течение 1,5 - 2.ч позволяет сократить срокипроведения адсорбции и тем самым ускорить процесс получения витогепата по сле-дующим причинам.В обезжиренном водном концентрате:высола содержатся как высокомолекулярные соединения (1880-4000,витамины группы В), являющиеся компонентами витогепата, так и нйзкомолекулярные примеси (72-182, аминокислоты,пигменты).При проведении адсорбции известнымспособом на сорбенте в первую очередь адсорбируются низкомолекулярные соединения, перекрывают центры сорбции и препятствуют адсорбции высокомолекулярныхсоединений, Кроме этого, при выдерживании смеси в спокойном состоянии сорбент5 осаждается и уплотняется. а сама адсорбция происходит только за счет диффузии икоэффициенты внешнего массообмена имеют низкие значения. Все эти факторы приводят к тому, что для полного выделения"0 конечного продукта требуется стадию адсорбции проводить в течение длительноговремени.Проведение стадии адсорбции двумячастями сорбента с перемешиванием в тече 15 ние 1,5 - 2 ч приводит к следующему,Первая часть сорбента в большей степени (на 300) адсорбирует низкомолекулярные соединения, а вторая часть сорбентабольше содержит высокомолекулярные сое 20 динения (см. таблицу). Кроме этого, постоянное перемешивание интенсифицируетмассаобмен по всему объему сорбента,Параметры продолжительности перемешивания обезжиренного водного кон 25 центрата вь 1 сола с сорбентом объясняютсяследующим,При перемешивании менее 1,5 ч не всеи не в полном обьеме активные веществабудут адсорбированы. Перемешивание в те 3 О чение 2 ч достаточно для окончания процесса адсорбции,Это и позволяет значительно сократитьстадию адсорбции и соответственно весьпроцесс получения витогепата,35 Изобретение поясняется конкретнымпримером получения витогепата в промышленных условиях.П р и м е р. 820 кг печени крупногорогатого скота дефростируют, гомогенези 40 руют на промышленной мясорубке и загружают в реактор для экстракции, которуюосуществляют двумя объемами фосфатногобуфера с рН 8,0 при 120 С в течение 3 ч,Затем на центрифуге отделяют экстракт от45 жмыха, который повторно подвергают экстракции Фосфатным буфером при тех же условиях. Экстракт обоих экстракцийобъединяют в реакторе и подвергают высаливанию сернокислым аммонием в количе 50 стве 550 г на 1 л экстракта с рН 5,5, чтосоставляет 987 кг на весь объем экстракта,а затем фильтруют на рамном фильтр-прессе, Осадок-высол помещают в реактор иподвергают пятикратной обработке 65055 ным этиловым спиртом при 60 С в течение1 ч, Спиртовой экстракт высола от пяти экстракций (2380 л) объединяют в реакторе иотстаивают в течение 12 ч, затем выпаривают на вакуум-выпарной установке "Ротофильтр" до 110 обьема экстракта.Полученный водный концентрат высола обрабатывают эфиром в течение 30 мин для обезжиривания в колоне из расчета 0,5 л эфира на 1 л высола. Обезжиренный водный концентрат высола (225 л) обрабатывают в 5 реакторе с мешалкой активированным углем марки ОУ-А в качестве сорбента при обьемом соотношении высола и сорбента 4,5:1, На 225,0 л обезжиренного водного концентрата высола необходимо 50 кг акти вированного угля, Сорбент разделяют на две части по 25 кг. Сначала вносят первую часть сорбента 25 кг) и смесь перемешивают в течение 1,5 ч, затем вносят вторую часть сорбента (25 кг) и смесь перемешива ют в течение 1,5 ч. Затем из смеси выделяют сорбент фильтрованием на друк-фильтре, отмывают 600 л дистиллированной воды для удаления сульфат-ионов. Отмытый сорбент трижды элюируют 77%-ным этиловым спир том при 79 С, Элюат трех элюций обьединяют и фильтруют на друк-фильтре и подвергают вакуум-выпарке при 30 - 35 С и вакууме 0,09-0,096 МПа до 1/10 объема элюата.Кроме этого, в концентрат добавляют 25 фенол в количестве 0,3 от объема концентрата и устанавливают рН 6 с помощью соляной кислоты и выдерживают в холодной камере при 5 С в течение 5 суток. Затем концентрат фильтруют и 30 отстаивают 10 суток при 5 С и рН 6. Из кон це нтрата гото вят лекарственную форму, содержащую 10 мкг/мл витамина Вц. Приведение одного примера получения витогепата в промышленных условиях является достаточным, т.к. интервал времени перемешивания высола с сорбентом невелик и возможность проведения процесса при его граничных значениях очевидна,Формула изобретенияСпособ получения витогепата из печени крупного рогатого скота, включающий гомогенизацию сырья, экстракцию гомогената фосфатным буфером, центрифугирование, обработку центрифугата сернокислым аммонием, многократную обработку осадка этиловым спиртом, выпаривание спиртового экстракта до получения водного концентрата, обезжиривание его эфиром, обработку активированным углем при обьемоном соотношении концентрат;сорбент 4,5:1, отделение сорбента, промывание его этиловым спиртом при 79-80 С, фильтрацию раствора с последующим выпариванием фильтрата, содержащего целевой продукт, о т л.и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью интенсификации способа, при обработке концентрата сорбент разделяют на две части, сначала добавляют в концентрат первую часть, перемешивают смесь 1,5-2 ч, а затем добавляют вторую часть сорбента и перемешивают в течение такого же времени,1821213 Продолжение таблицы ь А. Чехольскгий оргентал Корр Сост Техр С. Пв ева экт и Г 1 рьиэводотаейно издательский комбинат"патант", г. Умгород, уп.Гагарина, 1 О.Ред срр.А.Хор на ед М,М ектоР тРУш Закаэ 2078, . Тираж: . .;. Подписное ВНИИПИ Государственного комитета пр йзобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035. Москва, Ж, Раушская наб., 4/5