Способ изучения задних путей оттока глазного яблока

(я)5 А 61 Г 9/00 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Туркменский .научно-исследовательский институт глазных болезней(54) СПОСОБ ИЗУЧЕНИЯ ЗАДНИХ ПУТЕЙОТТОКА ГЛАЗНОГО ЯБЛОКА(57) Изобретение относится к медицине, вболее конкретно к офтальмологии, и может Изобретение относится к медицине, а более конкретно к офтальмологии, и может быть использовано в научных исследованиях для изучения состояния заднего дренажа глаза при различных видах патологии.Существуют методы выявления. задних путей оттока иэ глаза, включающие введение метки в стекловидное тело (СТ) с дальнейшим морфологическим исследованием заднего отдела глаза и зрительного нерва.Однако эти методы не позволяют выявить морфологические структуры, несущив маркер, Методы сложные, дорогостоящие, так как для их выполнения нужны радиожтивнце изотопы,Существует также способ выявления задних путей оттока из глаза, включающий введение морфологического маркера (туаь, масса Герота) в СТ, фиксацию глаза и зрительного иерее в формалине. вскрытие его,быть использовано в научных исследованиях для изучения состояния заднего дренажа глаза при различных видах патологии, Изобретение позволяет эа счет энуклеации обоих глаз с хиазмой, микропрепаровки оболочек зрительного нерва, перевязкидистального конца зрительного нерва позади места распространения маркера, вырезания склерального "окна" в зоне зрительного нерва гистологического и электронно-микроскопического исследования получать более полную информацию с исключением артефактов о задних путях оттока глаза. 3 ил. приготовление препаратов, обезвоживание в спиртах восходящей крепости, заливку в целлоидин, парафин, приготовление срезов, окрашивание их и микроскопирование."ф 4Однако этот способ, требующий вскры- а.тия глаза, не позволяет сохранить маркер в( ) несущих его структурах. Он не дает возмож ности проследить на нативнцх препаратах эа расположением туши в СТ и путь попада-, р ния маркера в зрительный нерв, поскольку даже после Фиксации глазного яблока в формалине при вскрытии глаза тушь вцливается из СТ и из крупных несущих ее в коллекторов и окрашивает структуры артефициально. Кроме того, этот способ не позволяет выявить ультрамикроскопическую структуру задних путей оттока.Цель изобретения - повышение информативности е задних путях оттока, включающей представление о расположении тушив СТ, распространении ее в орбиту с сохранением маркера в крупных коллекторнцх путях, выявлении ультраструктуры задних путей оттока и получении данных о связи между задним отделом глаза и межоболочечным пространством мозга, а также исключение артефактов,Поставленная цель достигается тем, что в способе изучения задних путей оттока глазного яблока, включающем прижизненное введение морфологического маркера в СТ, последующее макромикроскопическое исследование глазного яблока и зрительного нерва с оболочками, согласно изобретению, после декапитации животного удаляются оба глаза вместе с хиазмой, с сохраненными зрительными нервами и их оболочками, производится микропрепаровка оболочек зрительного нерва за зоной распространения маркера, вырезается "окно" в склеральной капсуле глаза у зрительного нерва, проводится ультрамикроскопическое исследование зрительного нерва с оболочками.При изучении других известных технических решений в данной области признаки, отличающие заявляемое изобретение от известного, не были выявлены и потому они обеспечивают заявляемому техническому решению соответствие критерию "существенные отличия",Способ осуществляется следующим образом,На подопытном животном, например кролике-альбиносе, после наркотиэировзния животного делается пзрацентоз, выводится влага передней камеры и в СТ глаз вводится маркер, Количество вводимого маркера должно соответствовать количеству удаленной из передней камеры влаги для ,поддержания исходного внутриглазного давления. Через заданные промежутки времени животные декапитируются, после чего оба глаза энуклеируются вместе с хиаэмой.Ретробульбарную ткань м оболочку зрительного нерва позади склеры с вентральной и дерзальной стороны расслаивает под микроскопом типа МБС. Одновременно позади места распространения маркера осуществляется перевязка диставьного конца зрительно о нерва. Позади зоны расщастранения маркера берется препарат для электронной микроскопии. Для визуального установления связи СТ и диска зрительното нерва (ДЗН) е скяеральной , капсуле каждого глаза вырезаются лосКут вокруг зрительного нерва и выверачиваетсл наружу. 6 результате этого обнажается воронка зрительного нерва и прослеживаются контрастируемые маркером связи СТ с20 25 ДЗН, после чего весь препарат фиксируетсяв формалине и подготавливается для. гистологических исследований.П р и м е р. Под наркозом (промедол, анзлгин, димедрол) на обоих глазах кролика произведен парацентоэ и удалена влага передней камеры по 0,3 мл из каждого глаза, после чего в СТ был введен маркер (тушь с желатиной по Камахидзе) в количестве, равном количеству удаленной влаги. Маркер вводится с помощью иглы, склера прокалывалась у экватора. Причем игле со шприцем после введения туши оставалась в СТ в течение 3-4 мин. После введения маркера в СТшприц снимался с иглы, игла была оставлена в глазу и ее просвет ззкрывали лаком. Внутриглазное давление после введения маркера осталось без изменений. Поистечении 30 мин производилась декзпитзция, обз глаза вместе с хиаэмой энуклеировались путем вскрытия черепной коробки и разрушения задней стенки орбиты. Подмикроскопом МБСбыла произведена отсепаровкз оболочек каждого. зрительного нерва и окружающей их ретробульбзрной ткани и устанавливалась глубина проникновения маркера по зрительным задним, попериневрзльным йутям (фиг, 1), Затем была произведена перевязка зрительного нерва нз каждом глазу шелковой нитью позади места распространения туши (фиг, 2), Позади места перевязки на расстоянии 11,5 мм от последней был отделен препарат зрительного нерва для электронной микроскопии, Склера обоих глаз надреззлась нз расстоянии 5 мм от заднего полюса. С помощью ножниц был выкроен лоскут вблизизаднего полюса в виде "окна", при открытии которого производились осмотр и фотографирование СТ, ДЗН и внутренних оболочек глаза (фиг. 3). Далее весь препарат фиксировался в формзлине, Участок зрительного нерва вместе с его диском был отделен от глазного яблока, после чего обычным путем приготавливались пзрзфиновые срезы, которые окрашивали гематоксилинэозином,Обычным методом подготовлены препараты для электронной микроскопии. 8 реэультате исследования было выявлено, что тушь через полчаса введения ее в стекловидное тело проникает иэ СТ в периневральноепространство зрительного нерва на глубину1,5 мм от выхода зрительного нерва из склеры. При отгибании склерального лоскута была видна тушь, в СТ сообщающаяся в зоне 55 ДЗН, а также прозрачная сетчатка и подлежащие оболочкиНеобходимость проведения комплексного метода с сохранением маркера при анзтомическом и гистологическом анализах различных моделей болезнидиктуется отсутствием .анатомических данных о том, как в различных условиях, по каким структурам оттекает внутриглазная жидкость из стекловидного тела и отсутствуют данные о патологических изменениях самих путей. Кроме того, нет в литературе данных о том, каков характер структур в межоболочечных пространствах зрительного нерва, по которым идет отток жидкости из глаза, так как нет данных об ультраструктуре клеток, выстилающих эти пути.Обнажение заднего полюса дает возможность получить болев полную инфОрмацию о связи стекловидного тела с воронкой зрительного нерва и о задних путях оттока, Удаление обоих глаз вместе с хиазмой, отсепаровка под микроскопом оболочек зрительного нерва и межоболочечных пространств, перевязка зрительного нерва позади зоны распространения маркера + все эти приемы позволяют обнаружить,структуры, несущие маркер без их повреждения; при этом удается сохранить маркер (тушь с желатиной) в крупных коллекторных путях и .при приготовлении парафиновых препаратов зрительного нерва. Комбинация микроскопического исследования позволяет судить о характере путей, несущих маркер, а также о связи между задним отделом глаза 5 и межоболочечными пространствами мозга.Предлагаемый способ может быть использован для изучения задних ликворных и лимфатических путей оттока из глазного яблока в норме и при патологии. а также при 10 воздействии различных препаратов.Формула изобретения Способ изучения задних путей оттокаглазного яблока в эксперименте путем прижизненного введения животному морфоло гического маркера в стекловидное тело споследующими декапитацией животного, энуклеацией глаза с его оболочками и их исследованием, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения информативности, 20 удаляют оба глаза с хиазмой, сохраняя целостными зрительные нервы с оболочками.после расслоения ретробульбарной ткани и оболочек зрительного нерва перевязывают дистальный конец зрительного нерва и исс ледуют воронку зрительного нерва.1710036Составитель Е. Мостовойдактор Е, Савина Техред М.Моргентал Корректор Т. Палий аказ 285 Тираж ГЬдписное ВНИИХИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС113035, Москва. Ж-ЗЬ, Рауаскаю на 64/водственно-издательский комбинат "Патент". г. Ужгород, ул. Гагарина, 1