Способ селекции томатов на устойчивость к альтернариозу

(56) Попкова К.В, Учентений. - МКолос, 197 5ческой генетики АН алашова и О,Б. Да тете расеоб имму9, с,272,(54) СПОСОБ СЕЛ ЕКЦ ТОЙЧИВОСТЬ КАЛЬ (57) Изобретение отно зяйству, в частности к иммунитет к фитопато ИИ ТОМАТОВ НА УСТЕРНАРИОЗУсится к сельскому хоселекции растений нагенам. Цель изобретеетение относится к сельчастности к селекции рат к фитопатогенам.изобретения - ускорениеоцесса и повышение е кому хтений н Изоб зяйству, в иммунитеЦель ОННОГО П ТИВНОСти селекцио эффекГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР САНИЕ ИЗОБ Способ заключается в том, что опыление растений проводят в присутствии культурального экстракта А 1 тегпаг 1 а ЗО 1 ап зог., затем проводят индивидуальную оценку растений по осемененности плодов, для этого сравнивают количество семян на 1 плод каждого растения со средним значением осемененности по сорту и выделяют те семьи, количество семян в плоде у которых выше среднего значения осемененности по сорту в опыте и приближению к контрольному значению, после чего полученные с выделенных растений линии опыляют вторично в присутствии культурального экстракта. Ы 1678254 ния - ускорение селекционного процесса и повышение его эффективности, В процессе опыления на рыльце пестика наносят культуральный экстракт А 1 тегпаг 1 а Яо ап 1 эог концентрацией 0,1 - 0,2 у. Затем проводят индивидуальную оценку растений по осемененности плодов, для этого сравнивают количество семян на 1 плод каждого растения со средним значением осемененности по сорту и выделяют те растения, количество семян в плоде у которых выше среднего значения осемененности по сорту в опыте и приближено к контрольному значению, после чего полученные с выделенных растений линии повторно подвергают отбору и оценке, 3 табл.й П р и м е р. Для получения препарата токсичных метаболитов гриб выращивают в погруженной культуре на среде Чапека-Докса, Для этого в колбы Эрленмейера емко- д стью 300 мл наливают по 150 мл среды, автоклавируют 40 мин при 0,5 - 0,6 атм избыточного давления, затем после охлаждения инокулируют мицелиальными дисками диа- О метром 10 мм. Диски вырезают у краев семидесятисуточных колоний наСЛ агаризованной среде Чапека-Докса. Колбыфь с грибом помещают на роторные встряхиватели уулпри 90-120 пб/мин. Спустя 12 сут инкубации при комнатной температуре отфильтровывают культуральную жидкость, подкисляют до рН 3 - 3,5 и экстрагируот равным обьемом хлороформа. После отгонки хлороформа на роторном испарителе при 30 - 40 С получают неочищенный препарат токсинов А.ЯО 1 ап 1, который используют при осуществлении способа.Из данных табл. 1 видно, что растения, полученные предлагаемым способом, зна чительно отличаются от исходного материала селекции. В то же время они были менее поражены возбудителем альтернариоза по сравнению с растениями, отобранными по известному способу, Исключение составил 55 сорт "Молдавский ранний", где вариант пыльцевой селекции не отличался от традиционного метода отбора, но значительно превосходил по устойчивости к патогену исходный материал селекции. В процессе проведения исследований было выявлено влияние экстракта А,Яоап зог. при опылении на завязываемость плодов томатов. Данные представлены в табл, 2.Из данных табл. 2 видно, что концентрация 0,1-0,2% оказала влияние на завязывание плодов, Причем именно в этих концентрациях были получены малосемянные плоды, что также подтверждает возможность отбора и на стадии пыльцы по чувствительности к экстракту, так как осемененность плодов указывает на степень конкуренции пыльцевых трубок при оплодотворении семяпочек, В случае использования концентраций, превышающих 0,2%, завязывались единичные плоды, причем они оказывались бессемянными.Следует отметить необходимость использования в качестве контроля дистиллированную воду, Культуральный экстракт А,Яоап зог. разбавляют дистиллированной водой до концентрации 0,1 и было бы не корректно сравнивать нормально опыленные цветки с цветками, где пыльцу наносили на смоченное жидким экстрактом рыльце, При нанесении жидкости на рыльце происходит разбавление вязкой среды, что, вероятно, ведет к уменьшению количества пыльцевых трубок, достигших семяпочек, Результаты по осемененности плодов томатов при влиянии токсинов А.Яоап зог. (0,1 ) приведены в табл. 3 (где К - контроль (опыление в нормальных условиях), Кд - опыление на дистиллированной воде, О - оп ыт),Использование способа обеспечивает по сравнению с известными способами следующие преимущества. Ускоряется процесс отбора при селекции на устойчивость, так как реакция растений на экстракт проявляется быстрее по сравнению с реакцией на заражение возбудителем, Отпадает необходимость применения живых патогенов в полевых условиях, что устраняет опасность распространения болезни. При длительном культивировании на искусственной питательной среде патоген часто утрачивает вирулентные свойства, токсин же можно выделить и накопить в любых необходимых количествах и хранить продолжительное время. Реакция растений на токсин в меньшей степени зависит от окружающих условий, чем реакция на внедрение патогена.Кроме того, для пыльцы не свойственны доминантно-рецессивные отношения, следовательно, в этом случае легче найти носителей рецессивных признаков; возможность использования выборок порядка 10 - 10 для отбора, не выращивая растений; экономия времени на селекцион"Молдавскийранний" 4,0 ф 02 4,0+0,1 3,7" О, 1 2,9+.О, 1 2,3 ф 0,2 3, 4 О, 1 4,00, 1 2 9 ф 0,2 4,00,2 3,10, 1 3,7+ 0,1 1,6+О, 1 2,9 ф 0,11, 6+О, 1 2 э 3 Оэ 2 2,910,2 3,4+0,1 3,1+0,1Различия достоверны на 5 Х-ном уровне значимости ный процесс, снижение его трудоемкости, поскольку растения, устойчивые к альтернариозу, удается получить в течение одного года, в то время, как по традиционному методу- 3 года. А также использование ком плекса метаболитов, а не отдельных фракций (чистых токсинов) позволяет эффективнее воздействовать патогеном на расстояние в природных условиях. Получение экстракта менее трудоемкий и не требу ющий больших затрат процесс по сравнению с выделением чистых токсинов. Следовательно, способ служит для пол учения устойчивости целевого растения (томатов) - спорофита через использование пыльцы - гаметофита - к патогену (А,Яоап 1 зог.), что открывает новые пути и возможности в селекции на устойчивость с помощью 20 нового направления биотехнологии - пыльцевой селекции. Исходный материал (элита) Традиционный метод отбораИсходный материал (элита) Пыльцевая селекция Традиционный метод отбораПыльцевая селекция Формула изобретения Способ селекции томатов на устойчивость к альтернариозу, включающий воздействие токсическим агентом и оценку ответной реакции, по результатам которой отбирают устойчивые растения, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью ускорения селекционного процесса и повышения его эффективности, воздействие осуществляют путем нанесения на рыльце пестика цветка токсического агента, в качестве которого используют культуральный экстракт Атегпага Яо 1 апзог, в концентрации 0,1 - 0,2 оь, оценку ответной реакции проводят по осемененности полученных плодов, сравнивая количество семян на плод со средним значением осемененности сорта, отбирают растения, количество семян в плодах которых выше среднего значения осемененности сорта в опыте и близко к контролю, и полученные с выделенных растений линии повторно подвергают отбору и оценке. Полевая оценка поражаемостирастений томатов сортаОпыт Количест" Сорт Дисперсия во иэу"ченных плодов,шт."Ранний 83" 3, 86 1,90 7 59 Р 1, 99+ В Раэличин достоверны на 5%-ном уровне значимости Составитель Е.Шкрадюк Редактор Н,Бобкова Техред М.Моргентал Корректор Л,БескидЗаказ 3154 Тираж 355 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 ККд0