Способ определения токсичности водных сред

(51 И 33 ТЕН очной таксиколо я является по 13 кращение временисти определения,а ругЫогшз ательнализа ий и 1 а аптичесной) стеклянную эле помещают в кую ячейку и исследуе вергают воз контрол ай) водо постоянна :ецностью ть прямолт В случае а и и подго элект 7-10 В/см,ои (опьщ пействию рическо Регистр движени о поля напр руют скора тельство СССР 33/18, 1986,НИЯ ТОКСИЧНОСТнеино досто корос инйузории.отклонения зинФузорий в сследуемую начения пыте о воду то верного движени контрасичнай. считают и2 табл,а раз в 10 дне х, на среде с 0 мл дистилли етан 2 глюкоз кт 0,1 морссос-. а и снижени Эксич остиедвари-объектапп. зотой пем п ест 1 Га ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР САНИЕ ИЗОБР А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(57) Изобретение относитс Изобретение относится к охране окружающей среди, а именно к способам определения токсичности водных сред, и может быть использовано при определении токсичности исходных, очищенных сточных вад, мутных (не-прозрачных), окращенных, содержащих загрязняющие вещества в растворенном, коллоидном, взвешенном состоянии, отдельных компонентов сточных вод,также при контроле работы очистных сооружений по токсикалогическому показателя.Цель изобретения - повьнпение точости, сокращение временирудоемкости определенияСпособ определения тоодних сред проводят путельного культивированияНАузории ТеТгаЬунепа ру0термостате при 25 С, с окружающей среди и гии. Целью изобрете вынение точности, с и снижение трудоемк ИнАузорий ТегаЬуще ресева один й, в стер ных условия ледующего тава (на 10 рованной воды), г: п а 0,5; дрожжевой экстра кая соль О, 1; рН среды 7-7,5,В опыте используют культуру Те 1 гаЬупепа ругГогпп.з на третьи сутки после пересева на свежую питательную ,среду, Культуру Тегапугпепа руг 1. - Гогппз смеиивают вмикробиологических пробирках с исследуемой средой (опыт) и пептонной средой (контроль)о и экспонируют инАузорий при 25 С в термостате в течение 60 мин. После этого часть содержимого пробирок в опыте и контроле при помощи вакуумного отсоса поочередно, начиная с кон троля, перекап 1 вают в проточную стеклянную электролнтическую ячейку длиной 100 мм, внутренним диаметром2 мм,содержащую на конпах электролитцне камерн с электродами, н которые подают от Источника постоянноготока напряжение 70-100 В при этомсоздается напряженность постоянногоэлектрического поля 7-10 В/см, ипроводят визуальное (под стереоскопйческим микроскопом) определениескоростей движения каждой из десятипроизвольно выбранных клеток, вручную включая секундомер, как тольковыбранная для наблюдения клетка достигает стартовой линии, нанесенной наизмерительную шкалу окуляра микроскопа,и выключая секундомер по достижении клеткой Аинишной линии (концашкалы) .Строго прямолинейное движение инАузорий Те 1 гайупепа ругдйогпц.в обеспечивается в интервале напряженностипостоянного электрического поля7-10 В/см, при этом не оказываетсяотрицательное влияние на жизнедеятельность тест-объектов в течение10-минутного непрерывного воздействияэлектрического поля. При значении напряженности ниже указанного интервала движения инфузорий непрямолинейно, при превьппении напряженности10 В/см скорость прямолинейного движения резко возрастает, затем падаетдо нуля, погибшие клетки Т. ругз. -Гоггпз электронейтральны.Критерием токсического действияисследуемой среды является достоверное отклонение от контроля скоростипрямолинейного движения инАузорийв опыте,П р и м е р 1. Определяют токсичность исходной прооа 1) и очи 40щенной (проба 2) сточной воды маппностроительного завода. Пробы характеризуются следующими основными показателями:45проба 1: РП - 9,8, прозрачность4,0 см,ХПК 248 мг/л, БПК 111 мг/л,АосАатн 5,4 мг/л, Аенолн 0,02 мг/л,неАтепродукты 0,035 мг/л, взвешенные вещества 200 мг/л, СЛАВ анионо 50активные 1,67 мг/л, никель О,Об мг/л,1 хром 0,05 мг/л; проба 2: рН 7,4, прозрачность 32 с;., ХПК 31 мг/л, БП 1 7 мг/л, АосАаты 5,2 .ег/и, Аенолы 0,003 мг/л,5неАтепродукты 0,004 мг/л, взвешенные частицн 11,0 м /л, СПАВ анионоактивнне 0,41 мг/л, ьикель н/о, хром н/о,В микробиологические пробирки емкостью 25 мп помещают 19 мл ис - следуемой среды (пробы 1 и 2), в контрольную пробирку - 19 мл пептонной среды. Е 19 мл исследуемой среды в каждую пробирку добавляют 1 мл культуры ТеггаЬунепа ругГогтдз с концентрацией клеток б 000 кл/мл (при большей исходноц концентрации клеток культуру разбавляют пептонной средой) и перемешивают содержимое пробирок вращательными движениями, После 60- минутной экспозиции тест-объектов в исследуемых средах и контроле проводят измерение скорости прямолинейного движения ТеГгаЬущепа ругГогщз в постоянном электрическом поле с напряженностью 7 В/см.Проба 1 токсична, поскольку вызывлет достоверное отклонение от контроля скорости прямолинейного движения инАузорий, Проба 2 нетоксична, поскольку не вызывает достоверного отклонения от контроля скорости прямолинейного движения инфузорий (табл,1),П р и м е р 2. Способ осуществляют аналогично примеру 1, но измерение проводят при напряженности 8,5 В/см,Проба 1 токсична, поскольку вызывает достоверное отклонение от контроля скорости прямолинейного движения инАузорий. Проба 2 нетоксична, поскольку не вызывает достоверного отклонения от контроля скорости прямолинейного движения инАузорий.П р и м е р 3. Способ осуществляют аналогично примеру 1, но измерение проводят при напряженности 1 О В/см.Проба 1 токсична, поскольку вызывает достоверное отклонение от контроля скорости прямолинейного движения инфузорий, Проба 2 нетоксична, поскольку не вызывает достоверного отклонения от контроля скорости прямолинейного движения инАузорий.П р и м е р 4. Исследуют токсичность раствора двуххромовокислого ка 64 лия в концентрации иона Сг 0,04 мг/л,В микробиологической пробирке емкостью 15 мл готовят рабочую концентрацию двуххромовокислого калия, используя для разбавления пептонную среду. В пробирку помещают 9 мл раствора двуххромовокислого калия с концентрацией иона Сг0,045 мг/л, затем приливают 1 мл культуры инАузорий ТеггайущепаругГоггц.в с конпентрацие клеток 3000 кл/мл и перемеипвают вращатель10 35 5 15977 ныьп дважецяьп, В опптной цробц 1 не создается коццецтрацця иоца Сг д 0,04 мг/л. В контрольную пробирку помещают 9 мл пептоццой среды и 1 мл культуры ицфузорий. После б 0-минутной5 экспозиции инАузориц Ь исследуемой среде и контроле проводят измерение скорости движения ГеГгаЬупела руг.Гогпйя в постоянном электрическом поле с напряженностью 10 В/см. Концентрация иона Сг 0,04 мг/л токсична, поскольку вызывает достоверное отклонение от контроля скорости прямолинейного движения инАузорийВ табл. 1 приведены результаты определения токсичности для ТеГгаЬупепа ругз.йопчз.я сточньх вод маппностроительного завода по показателю скорости прямолинейного движения и клеток 20 инфузорий в постоянном электрическом поле (г = 2,57).П р и м е р 5, Исследуют токсич - ность раствора двуххромовокислого калия с концентрацией иона Сг 25 0,001 мг/л, Способ осуществляют аналогично примеру 2. Концентрация иона6+Сг 0,001 мг/л цетоксичца, поскольку не вызываеТ достоверного отклонения от контроля скорости прямолиней. З 0 ного движения инАузорий.В табл, 2 приведены результаты определения токсичности для ТеггаЬущепа ругдГогппя по показателю скорости прямолинейного движения клеток иноузорий в пес.,,ццоэлектрическом поле при напряженности 1 О В/см (г ,2,57).При 60-мицутной экспозиции, одновРеменном исследовании 10 различных 4 О сред в 5 параллельных сериях и 10 измерениях в каждой серии экспрессцость,способа 90 мин.Предлагаемьп способ определения водных сред по сравнению с известным повьппает точность за счет обеспечения прямолинейного характера движения 22 6ицАузорий и, следовательно, цояцлеция возможности непосредственного ц мерения его скорости (в то время,как в известном рещсциц провсд 1 ласькосвенная регистрация скорости хаотичного движения путем определенияскорости осветления водной среды, чтоснижает точность определения), сокращает время и трудоемкость определения за счет осуществления процессав проточном режиме, обеспечивает возможность более точной обработки результатов.Кроме того, преимуществом является расппрение области применения способа для определения токсичности мутных (не прозрачных) окращецных водных сред, содержащих загрязняющие вещества в растворенном, коллоидном ивзвещенном состоянии,в том числе сточных вод любого состава. формула изобретениящСпособ определения токсичности водных сред, предусматривающий помещение тест-объекта - инАузории Те 1 гаЬупепа ругдГогппя - в емкости с чистой - контроль и исследуемой - опыт средой, выдерживание в них, регистрацию параметра двигательной активности инфузории в опыте и контроле и отнесение исследуемой среды к токсичной при достоверном отклонении данных в опыте от контрольных, о т - л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повьппения точности, сокращения времени и снижения трудоемкости определения, тест-объект из обеих емкостей после его выдерживания помещают в стеклянную проточную электролитическую ячейку.и подвергают воздействию постоянного электрического поля напряженностью 7-10 В/см, а в качестве параметра двигательной активности регистрируют скорость прямолинейного движения тест-объекта,1597722 Та блица 1 Скорость прямолинейного движения клеток при напряженности постоянного электрического поля 8,5 В/см 10 В/см 7 В/см мкм/с мкм/с Критерий мкм/с достоверногти Контроль 500 Проба 1 320 .Проба 2 453 Та блица 2 ГИсследуемая среда Скорость прямолинеиного движения клеток 3мкм/с ; Критерич достоверности Составитель О.Корженко Редактор А.Нандор Техред М.Дидык Корректор Л.ПатайЗаказ 3049 Тираж 510 Подпис ноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат"Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101 ф, Исследуемая среда Контроль0,04 мг0,001 мг Критерий достоверности