Способ получения жидкой контрольной сыворотки

ОЮЗ СОВЕТСН ОЦИАЛИСТИЧЕ РЕСПУБЛИК ИХ А 3/48,1)4 С ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯН Д ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ КОИающийление 7/28-148486. Бюл, Р 28польский научно-исслединститут вакцин и сыв и атча ют ельски оток72) О.М,Головченко и С.А53) 615,373 (0888)56) Патент США У 3876375л. С 01 И 33/16, 1980,тку конациис диаениемпостоянГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) С роо(54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЖИД КОНТРОЛЬНОЙ СЬЗОРОТКИ, включ концентрацию сыворотки, доба стабилизаторов, стерилизацию тестацию компонентов, о т л щ и й с я тем, что, с цель чения сроков хранения, сывор центрируют путем ультрафильт на ацетатцеллюлозных пленках метром пор 300-500 А под давл 0,5-0;6 К 1 а при рН 6,8-8,5 и ном перемешивании.Изобретение относится к медицине,в частности к диагностическим препаратам крови, и может быть использо-вано для приготовления контрольногоматериала, необходимого для оценкикачества выполнения биохимическиханализов.Цель изобретения - увеличение- сро"ков хранения за счет концентрирования нативной.сыворотки путем ультрафильтрации наацетатцеллклозных планках,П р и м е р 1, Берут 1 л нативнойдонорской человеческой сывороткирН 6,8-8,5,заполняют ультрафильтрациойную ячейку прибора ФМ 02-1000,дно которого закрыто ацетатцеплюлозоной пленкой диаметром пор 500 А ифильтруют при постоянном перемешивании и давлении 0,6 МПа до тех пор,пока объем сыворотки не достигнет0,7 л Затем в концентрат .сывороткидобавляют в качестве консервантахлороформ и отстаивают. в течение суток при 2-4 С дпя выпадения в осадоклабильных белков, Далее осадок удаляют, а надосадочную жидкость доводят до исходного объема (1 л) добав"лением гликолей, например этиленгликоля, рН корректируют 5%-ным Н 80до 7,0-8,2.В связи с тем, что в Фильтратудаляются водорастворимые низкомолекулярные вещества таких тестируемыхкомпонентов как мочевина, глюкоза,креатинин, натрий, калий, их содержание доводят до Физиологическойнормы добавлением в необходимом количестве.Полученную сыворотку стерилизуют,разливают во Флаконы и укупориваютизвестным способом.:Аттестацию компонентов проводятв исследованиях на сходимость, воспроизводимость и правильность приучастии референтной лаббратории.Определение концентраций тестируемыхкомпонентов: общего белка; альбумина глюкозы; мочевины; креатинина;натрия калия; хлоридов; железааланинаминотрансферазы; аспартатаминотрансферазы; о-амилазы;, проводят по известным унифицированнымметодикам,П р и м е р 2. Способ полученияжидкой контрольной сыворотки с патологическим содержанием компонентовосуществляют по примеру 1.за исклю 10 чением того, что добавки к некото 1рым тестируемым компонентам вводятдо следующего. количественного содержания, вес:5 Мочевина 0,050 - 0,12Глюкоза .,0,12 - 0,40Креатинин 0,0015 - 0,0060Хлорид натрия(по калию)0,025 - 0,060П р и м е р 3. Способ полученияжидкой контрольной сыворотки осуществляют по примеру 1 за исключением того, что в качестве нативнойсыворотки используют гипериммунную:лошадиную сыворотку (отбракованнуюиз-за низкого содержания антител),которую перед ультрафильтрацией раз 2 О водят 0.,6%-ным раствором НаС 1 всоотношении 1:0,2-0,3,П р и м е р 4, Способ полученияжидкой контрольной, сыворотки осуществляют по примеру 1 за исключе 25 нием того,что в качестве нативнойсыворотки используют человеческуюплазму, непригодную для трансфузиииз-за. высокого содержания билирубина илИ с истекшим сроком годности,ЗО из которой удаляют Фибрин, а полученную сыворотку перед ультрафильтрацией разводят 0,6 -ным НаС 1 всоотношении 1:0,2-0,3.После статистической обработки35 всех результатов на правильность ивоспроизводимость по тестируемымкомпонентам составляют паспорт накаждую серию жидкой контрольной сыворотки,4 рВ табл, 1 представлено количест.венное содержание компонентов в жидкой контрольной сыворотке в различных сериях,Контроль количественного содер=,45 жания тестируемых компонентов жидких контрольных сывороток, полученных предлагаемым способом, проводили сразу же после приготовления серии и через 1,5 г хранения при +4 С.В табл,2 представлены данные стабильности одной из серий жидких .че- ,ловеческих контрольных сывороток.Как видно из табл,2, сыворотка,1полученная предлагаемым способом,55 сохраняет стабильность физико-химических свойств и концентраций тестируемых компонентов в течение 1,5лет хранения,Таблица Область концентрацийкомпонентов физиоло-гической нормы Состав жидкойсыворотки, вес.7. Область концентрацийкомпонентов патологии 6,0 - 8,5 4,0 - 8,5 Общий белок 3,0 - 5,5 1,0 - 5,5 Альбумин 0,06 - 0,12 О, 05 - 0,40Глюкоза. ОстальноеГликоль Сыворотка ОстальноеТаблица 2.Таким образом, способ получения .честв выполнения биохимических исжидких контрольных сывороток по срав- следований в фотометрическом микро- нению с существующим имеет следую- анализе значительно повысит точщие преимущества: возможность полу-ность определения тестируемых комчения жидкой прозрачной контрольной 5 понентов в клинико-диагностических сыворотки с гарантией стабильности лабораториях страны; упрощение техколичественного содержания тестируе- нологического процесса 1 исключаетмых компонентов в течение 1,5 лет, :. ся операция лиофилизации сывороприменение которой для оценки ка- ток).1247751 Продолжение табл.2 Глюкоза Мочевина Креатинин Натрий 0,0300,002 Калий+ 0,02 Составитель Л. Бонарцев Корректор О.Луговая Заказ 4118/43 Тираж 778 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5