Способ получения покрытия

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНРЕСПУБЛИН ЯО 5484(9) 5) АРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ 0 НИЕ ИЗОБРЕТЕНИ фбе ВТОРСХОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ИМО 122:;(71) Ленинградский ордена Октякой Революции и ордена ТрудовоКрасного Знамени технологическинститут им. Ленсовета, 1-й Леградский медицинский институтим. акад. Павлова и Всесоюзныйно-исследовательский и констр.кий институт медицинской лаборторной техники(54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОКпутем нанесения на металлическподложку композиции, включающе ен ал ливиннловый спирт, органическийфермент и воду, и последующей сушки,отличающийся тем, что,с целью повышения физико-механичесова, кой прочности покрытия и его ферментативной активности, в качествефермента композиция содержит глюкозооксидазу или /3 -галактозидазу, брьс- нли глюкоамилазу и дополнительного . борную кислоту и глутаровый альдегнд ий при следующем соотношении компоненнин- . тов,мас.7:Поливиниловый спирт 5-10науч- Борная кислота0,3-0,5 укторс- Глутаровый альдегид. 0,12-0,14 а- Укаэанный фермент 0,005-0,015Вода Остальноепричем нанесение композиции на под. Под ложку проводят при пропускании элекова, трического тока через нее плотностью30-50 .А/мй в течение 5-15 с, а послесушки покрытие обрабатывают 1,5-2 чА. : композицией, включающей глутаровый Ф альдегнд,хлорнд. натрия и водупри следующем соотнош ни компонентов,мас. Х:Глутаровый ьдеРЫТИЯ гид 0,125-015 ую , Хлорид натрия 14,0-16,0 й по- Вода ОстальноеИзобретение относится к аналитической химии, в частности к методам, ферментативного анализа, основанного на применении ферментных электродов, и может быть использовано при химических и медико-биологических исследованиях.Целью изобретения является повышение физико-механической прочности покрытия и его ферментативной активности.П р и.м е .р 1. Навеску поливинилового спирта (5 г) растворяют в 70 г теплрй воды, затем добавляют глутаррвый альдегид в количестве 0,12 г. Отдельно готовят раствор борной кислоты. Ддя этого берут 0,3 г борной кислоты и растворяют ее в 20 г воды. Полученные растворы смешивают, добавляют ОьОО 5 г глюкозооксидазы (фермент) и доводят весь состав водой до 100 г. Приготовленный состав заливают в ванну для электроосаждения. Состав содержит компоненты в следующем соотношении, мас.%:Поливиниловый спирт . 5,0Борная кислота 0,3Глутаровый альдегид 0,12Глюкоэооксидаза 0,005Вода 94,575Катод - электрод, анод - корпус ванны. Температура процесса 20-25 С, Плотность тока 50 А/м . Продолжительность процесса 15 с. Полученную на электроде пленку геля поливинилового спирта высушивают в течение 1 ч при 20-25 С, затем электрод опускают на 2 ч в ванну, содержащую мас.%:Глутаровыйальдегид 0,125Хлорид натрия . 14,0Вода 85,875, (рН 2). После всех операций электрод с плен; кой геля поливинилового спирта промывают дистиллированной водой. Полученный по предлагаемому способу ферментный электрод проверяют на равномерность покрытия (3-5%, МРТУ-699-67)ь толщина слоя геля составляет 60 мкм. Кроме технических параметров определяют и ферментативную активность в гелеь поторая составляет 21%, что выше, чем по известному способу (15%).в П р и м е р 2. По примеру 1 готовят состав, содержащий, мас.%:Поливиниловыйспирт 8,.05 Борная кислота 0,4Глутаровыйальдегид 0,13Глюкозооксипаза 0,008Вода 91,462Катод в . электрод, анод - корпусванны, Температура процесса 20 о25 С. Плотность тока 40 А/м.Продолжительность процесса 10 с. Полученную на электроде пленку геляполивинилового спирта высушивают втечение 1 ч при 20-25 С, Затемоэлектрод опускают на 2 ч в ванну,содержащую раствор.по примеру 1.После всех операций электрод спленкой геля промывают дистиллиро ванной водой, Толщина слоя гелясоставляет 35 мкм, ферментативнаяактивность 23%, что выше чем поизвестному способу.П р и м е р 3. По примеру 1 готовят состав, содержащий, мас.%Поливиниловый спирт 10,00Борная кислота 0,5Глутаровый альдегид 0,14Глюкозооксидаза 0,015Вода 89 ь 345,Катод - электрод, анод - корпус З 5 ванны. Температура процесса 20:25 С. Плотность тока 30 А/м. Продолжительность процесса 5 с. Полученную на. электроде пленку высуши"овают в течение 1 ч при 20-25 С, эа тем электрод опускают иа 2 ч вванну, содержащую раствор по пример.1После всех операций электрод спленкой геля промывают дистилли рованной водой, Татщина слоя гелясоставляет 20 мкм, ферментативнаяактивность 27%ь что выше, чемпо известному способу.П р и м е р 4. Состав готовят 50 по примеру 3. Режим электроосаждения поддерживают по,примеру 1. Полу.ченную на электроде пленку геля высушивают з течение 1 ч при 20 о25 С, затем электрод опускают на 55 2 ч в ванну, содержащую раствор попримеру 1.После всех операций электрод спленкой геля промывают дистиллированной водой. Толщина слоя геля при равномерности 3-5% составляет 70 мкм, ферментативная активность 36%, т.е. выше, чем по известному способу.П р и м е р 5. Состав готовят по примеру 1 со следующим содержанием компонентов, мас.%;Поливиниловый спирт 4,00Борная кислота 0,25Глутаровый альдегид 0,10Фермент 0,005Вода 95,645 Катод - электрод, анод - корпус ванны. Температура процесса 20- .25 С. Плотность тока 50 А/м. Проодолжительность процесса 5 с. Полученную пленку геля поливинилового спирта высушивают в течение 1 ч при 20-25 С, затем электрод опус 0кают на 2 ч в ванну, .содержащую раствор по примеруПосле всех операций электрод с пленкой геля промывают. дистиллирован ной водой, в результате чего пленка геля частично растворяется. При равномерности 25-30% толщина составляет 8 мкм, ферментативная активность 5%, что ниже, чем поизвестному способу.П р и м е р 6. Состав готовят по примеру.1 со следующим содержанием компонентов,мас.%:Поливиниловыйспирт 10,0Борная кислота 0,6Глутаровый альдегид . 0,16Фермент 0,005Вода 87,235 Электроосаждение и дальнейшую обработку электрода ведут по приме-. ,ру 1,После всех операций электрод с пленкой геля промывают дистиллированной водой. Пленка геля.при равномерности 20-25% имеет толщину 20 мкм, ферментативная активность составляет 10%, что ниже, чем поизвестному способу,Результаты испытаний гель-ферментных электродов, полученных на основе известного и предлагаемого способов, приведены в табл.1.Л р и м е р 7. Приготовлениераствора и получение покрытия осу 5 ществляют по примеру 1. Состав содержит компоненты в соотношении, мас,%:Поливиниловый спирт 5,0Борная кислота 0,3Глутаровый альдегид 0,123-Галактозидаза 0,005Вода 9.4,575Полученноена металле покрытиевысушивают в течение 1 ч при 25 Си затем опускают на 1,5 ч в ванну,содержащую, мас.%:Глутаровый альдегид 0,15Хлорид натрия 16,0Вода 83,85После всех операций покрытие на20 металлической подложке промываютдистиллированной водой.Полученное по предлагаемомуспособу покрытие на металлическойподложке проверяют на равномер 25 ность и активность, Толщина покрытия55 мкм, равномерность 3-4%, фермен,тативная активность 25%.П р и м е р 8, Приготовлениераствора и получение покрытия про 30 водят по примеру 1. Состав содержит компоненты в соотношении,мас.%:Поливиниловый спирт 10,0Борная кислота 0,535 Глутаровый альдегид 0,14Глюкоамилаза 0,015Вода 89,345Полученное на металле покрытие40 высушивают.в течение 1 ч при 25 Си затем опускают на 2.ч в ванну, со.держащую, мас.%;Глутаровый альдегид 0,14Хлорид натрия . 15,0Вода 84,86После всех операций покрытиепромывают дистиллированной водой.Толщина покрытия 30 мкм, равномерность 4-5%, ферментативнаяактив 50 ность 29%.Зависимость ферментативной активности пленки геля ПВС от времени хранения в воде приведена втабл.2,1165484 Таблица 1 Метод испыта- ний Способ Показатели Предлагаемый по примерам1111 1 вестный 1 2 3 4 5 6 . 7 8 Время получения пленки геля,мин 50 0,25 0,16 0,09 0,25 0,07 0,25 0,25 0,25 Толщина,мкм 100 60 35 20 70 8 20 55 30 Равномерность толщины, Х МРТУ-10699-67 25-30 3-5 3"5 3-5 3-5 25-30 20-25 3-5 3-5 Активность фер.мента в геле,7 10 25 29 Та блица 2 Пленка геля ПВС без добавки глутарового альдегида в раствор для электроосаждения Пленка геля ПВС при введении глутарового альдегида в раствор для электроосажцения лРаствори- Активмость ность м ля Растворимость геля Растворимость гел тивость ферментав геле,7 4 2 О,Полностью Частично Не растворяется.Времяхранения вводе,сут Спектрофотометрический.метод фермента в геле,Е 15 21 23 27 36 5 без дополнительной 2-часовой выдержки в водномрастворе глутаровогоальдегида Активностьфермента вгеле,% осле дополнительной -часовой выдержки водном растворе лутарового альде- ида