Способ диагностики острого сепсиса

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 61 В 10 00 ОПИСАНИЕ ИЗО 6 РЕТЕНИЯН АВТОБУСНОМУ СВЩЕТВЪСТВУ а Ленинаий институт ева Э.Л.цинафф, 1980,лабораторныхМ., ффМеди(прототип),ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО СЕПСИСА путем исследования крови, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения диагностики и повышения (ее точности, кровь разделяют в градиейте фикол-уротраста, выделяют фрак-: цию с плотностью 1,065-1,080 г/л, далее выявляют в ней лимФоциты с на" личием участков синтеза рибонуклеи.- новой кислоты в ядрышках и при повьааении их количества на 10-20 по сравнению с нормой диагносцируют острый сепсис.Изобретение относится к клинической биохимии и может быть использованодля диагностики острого сепсиса.Известен микробиологический спо"соб диагностики, сепсиса. Метод заключается в посеве крови напитательные.среды, выделении чистой культуры возбудителя и его идентификации. Определение вида и типа возбудителя производят по ряду признаков: морфологии способности окрашиваться различ- оными красителями (тинкториальные свойства)характеру ро"та на.искусственных питательных средах (культуральные свойства), ферментации углеводови белков (биохимические свойства) . 15Окончательно принадлежность выделенной культуры к определенному виду(типу) микроорганизмов устанавливаютпосле изучения антигенной структурыиспользуя различные иммунологические реакции (агглютинации, преципитации, нейтрализации и др;),В первый день кровь засевают начашки с агаром Посевы выдерживаютв термостате при 37 С 18-20 ч.Навторой день просматривают колонии,делают мазки, Микроскопируют колонии,окруженные зоной гемолиэа, отсеваютв пробирку с бульоном. На третийдень учитывают характерный рост ипроводят определение серологическойгруппы, изучают, определяя признакипатогенности. В зависимости от всехэтих качеств культивирование продолжается 5 - 7 дней 1) .Известен также способ диагностики сепсиса путем клинического анализа крови, В мазках крови наблюдаютлейкоцитаз с нейтрофилезом, ядерныйсцвиг влево за счет миелобластов,ниелоцитов," анемию "гипохромного типа. 401Однако аналогичные изменения бываютпри любом тяжелом воспалительном процессе и, следовательно, этот способне может быть специфическим при данном заболевании (2 . 45Известные способы характеризуются недостаточной точностью, малой информативностью, длительностью исследования, в тр время как сепсис может воэникнуть практически при любом бактери" альном заболевании, лечебных и диагностических манипуляциях, и летальность составляет 35 - 71Цель изобретения - ускорение диаг ностики и повышение ее точности.Поставленная цель достигается тем, что согласно способу диагностики острого сепсиса путем исследования крови кровь разделяют в градиенте фиколуротраста, выделяют фракцию с плотностью 1,065-1,080 г/л, далее выявляют в ней лимфоциты с наличием участков синтеза рибонуклеиновой кислоты (РНК) в ядрышках и при повышении их 65 количества на 10-20 по сравнению снормой диагносцируют острый сепсис.Способ осуществляют следующимобразом,В силикониэированнуюпробирку на3 мл фикол"уротраста с плотностью1,065-1,080 г/л наслаивают 3 мл цельной крови, взятой у пациента, центрифугируют при 4 С и 1500 об/мин в течение 20 мин. Получают чистую популяцию лимфоцитов. Взвесь клеток наносят на предметное стекло, сушат, красят 30 мин, считают 100 лимфоцитов ивычисляют процент лимфоцитов с наличием участков синтеза РНК (активированных) . Содержание активированныхлимфоцитов (АЛ) у практически здорового человека 2.П р и м е р 1. Больной А. поступитв клинику по поводу мочекаменной болезни, состояния после ушивания дефекта правого мочеточника.Больному произведена операция удаление камня из правого мочеточника.Через месяц после операции мочевойзатек забрюшинного пространства. Наэкскреторных урограммах функции почекудовлетворительная, пассаж мочи ненарушен, структура чашечно-лоханочной системы не изменена. В верхнейтрети правого мочеточника имеетсядефект примерно 3 см. Больному произведена срочная операцйя - ревизиязабрюшинного прОстранства справа,вскрытие мочевого затека, нефростомия, ушивание дефекта верхней третимочеточника, дренирование забрюшинного пространства.У больного после операции беруткровь.Б силиконизированную центрифужнуюпробирку на 3 мл раствора фикол-уротраста пло.".ностью 1,080 г/л наслаивают 3,0 мя крови, центрифугйруютпри 0 С и 1000 об/мин в течениеО15 мин, считают в иммерсионной сис.теме микроскопа 100 лимфоцитарныхклеток, В исследуемой крови содержание АЛ 3. Количество АЛ близко кнорме сегментоядерных нейтрофилов3720 в 1 мнл (60), эозинофилов 62 в 1мкл (1), лимфоцитов 1738 в 1 мкл(28), моноцитов 1736 в 1 мкл (10) .С первых дней после операции праваяпочка перестала функционировать,чтоподтверждено данными йефросцинтиграфии, У больного на 18 сутки послеоперации температура поднялась до38,4 С, озноб. Область почки безбоолезнена. Рекомендовано провести исследование крови на содержание АЛ.Проводят наслаивание крови на градиент фикол-уротраста плотностью1. 075 г/л и центрифугированием при4 С, 1500 об/мин в течение 10 мин.Содержание)АЛ 11. Дано заключение - у больного острый сепсис. Втот же день . взята кровь на посев,На ангиограмме обнаружен тромбоз справа, релюмботомия, декапсуляцияартерии еяобз справа. Больному про- нижнего полюса правой почки .изведена срочная нефрэктомия., В послеоперапионном периоде суб;Через семь дней получены резуль- Фебри .зная температура. В крови лей-.таты посева кРови. ОбнаРУжена ишеч-коциты до 9000 в 1 мкл. Боли в об-ная палочка и сапрофиты, повторный 5 ласти почки, слабость, через 10 днейанализ крови показывает, что процент состояние больной без положительнойАЛ составляет 11,лейкоциты 9250 в динамики.1 мкл, палочкоядерные нейтрофилы В силиконизированную пробирку на92,5 в 1 мкл (1), сегментоядерные раствор Фикол-уротраста с плотностьюнейтрофилы 4995 в 1 мкл (54), лимфо 1070 г/л наслаивают 3 мл крови,циты 3977,5 в 1 мкл (43), моноциты центрифугируют при 0 С, 1000 об/мин185 в 1 мкл (2) . Температура 38 в течение 10 мин, просчитывали 10039 С по веч.ерам. лимфоцитов.Больному назначен декарис по150 мг день, общая доза 600 мг. Количество АЛ 19, диагностируютЧерез 4 дня процент АЛ равен 5, остРый сепсис. При этом содержаниеЛейкоциты 9100 в 1 мклпалочкоядер- в 1 мкл лейкоцитов 9300, палочкояных нейтрофилов 91 в 1 мкл (1), дерных нейтрофилов 558 (6), сегменсегментоядерных нейтрофилов 5551 тоядерных нейтрофилов б 510 (70),(53), зозинофилов 637 в 1 мкл (7), ро зозинофилов 93 (1), лимфоцитов 186лимфоцитов 2912 в 1 мкл (32), моно- (20)моноцитов 219 (3) т При посецитов 637 в 1 мкл (7) . ве крови роста микроорганизмов нет,Температура по вечерам 37 - 37,С. Больной ) назначена усиленная антиВ последующем больному были про . бактериальная терапия, однако половедены еще два курса декариса и уси жительной динамики нет, наступилалена противовоспалительная терапия смерть. Патоморфологический диагноз:в течение месяца. Количество АЛ 2, причина смерти сепсис, септическаялейкоцитов 5600 в 1 мкл, палочко- интоксикация, менингит,ядерных нейтрофилов 22,4 в 1 мкл,сегментоядерных нейтрофилов 2856Таким образом, несмотря на то,1 (51), ин Ф ло 56 30 что осев крови оказался отрицательл (1) лимфоцитов 904 в 1 ным(34), моноцитов 560 в 1 глкл (10) . тельствовал о наличии острого сепсиса,При посеве крови роста нет. Состоячто было подтверждено при патсморфо- ние больного удовлетворительноелогическом исследовании.35 Ри Гнойно-воспалительных осложчто содержание Форменных элементовнениях процент АЛ не превыдал 6,было в норме и по клиническим даннымнельзя отдифференцировать воспалительный процесс от сепсиса, тем чеменее содержание активированных лимфоцитов свидетельствует о наличии информативным так как гнойострого сепсиса, который развилс лительные осложнения сопровождалисьвследствие тромбоза артри гзф;з,лейкоцитозом и следовательночто потребовало срочной нефрэктомии, он не имел диагностической ценности.Данные посева подтвердили наличие 45 Всего обследовано 230 больных.микроорганизма в крови.Из них 55з них 55 больных - реципиентов трупной аллопочки. У 17 (30,9) больныхПриме 2 Бое р . ольная О. постус помощью метода АЛ установлен упила с диагнозом: свсех сепсис (100) . Посев крови окаострый правосто-зался положительным у 5 больныронний. пиелонефрит, бактериемйчдский 50ьным у больныхшок, мочеточниково-влагалищный свищ(23,5), кото ыч,алР удален транспланкамень пРавой почки, У больной бе тсвищ тат и получена положитесь."яте." :, динамиберут ка в лечении, 12 умерло. На секциина аствокровь в силиконизированную пробирку у всех подтве жденр ено, что смерть натью 1065 глна раствор Фикол-уротраста с плотнос- ступила вследстви, у 9г/л наслаивают 3 мл крови, 55 больных с хронической почечной нецентрифугируют при 0 С и 1000 об/мин достаточностью (ХПН)в течение 15в терминальноймин, взвесь клеток кра- стадии сепсис развился 23сят 15 мин. Соде жанне/. 123 больнылимфоцитов 1352 1цито 520 1в мкл (26), моно- ное зурологическими заболеваниями. Основ-,в в мкл (10) . 4/)Ч 1981 ге заболевание осложнилось сепсисомпроизведена операция - пиелостомияу 26 больных (21) . АЛ положительныыея 65 у 26 больных (100) . Посев крови по:1060172 Составитель Н.ХрусталеваРедактор Т.Веселова Техред М Тапер Корректор Л.патай Заказ 9899/3 Тираа 713 ВНИИПИ Государственного каеетета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Й, Рауаюсая наб., д.4/5Подписное Филиап ППП ф Патент , г. ужгород, ул. Проектная, 4 ложительный у 14 больных (53,8) .Летательным исходом закончилось заболевание среди реципиентов трупной аллопочки у 12 больных (70,6), среди больных ХНП - у 6 больных (21,4), среди урологическнх больных - у 25 (7,7) . Способ является информативным и точныа, позволяет диагностировать на личие сепсиса и тем самым дает возможность своевременно внести коррекцию в лечение, сократить с)ок лечения и уменыають летальность при столь серь" езном осложнении.