Способ определения концентрации декстрана в крови

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советскик Социалистическик Республик.0283, Бюллетень Мо 7 ния описания 23.02 В 3 и открыти ата опублик а кб.вд," ,72) АвторыизобретенияВсесоюзный научно-исследовательскийкровезаменителей и гормональных препаратисследовательский институт медицинской(71) Заявители логи 4) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ДЕКСТРАНА В КРОВИ е в п с 20лм Способ ообразом.Центридержащийстабилизи ивают сокрови,раствофугирую декстра рованно ли отсрепара,8-ным 3 Изобретение относится к аналитической биохимии; а именно к способамопределения концентрации декстрана вкрови и может быть использовано в медицинской практике для определенияконцентрации кровозаменяющих средствдекстрановой природы полиглюкина иреополиглюкина.Известен способ опред ления кон.центрации декстрана,осно анный наосаждении из щелочного фильтрата,полученного после удаления белков плазмы, медного комплекса с последующимо ределением меди, остающейся надО адком(1,Однако этот способ весьма трудоемок и неточен, так как в крови всегда присутствуют и другие вещества,обраэукщие комплекс с медью.Известен также способ определенияконцентрации декстрана в крови методом Меткалфа и Русло. Способ включаетцентрифугирование содержащей декстран крови, взятой с генерином, добавление к полученной плазме равногообъема 10-ной трихлоруксусной кислоты; второе центрифугирование раствора, добавление к центрифугату 94 ного этилового спирта,колориметрирова.ние раствора, и вычисление по калибровочной кривой искомой концентрациираствора декстрана (.2Однако известный способ трудоемоки занимает довольно длительное(время 1 ч на пробу), Кроме того, способ,недостаточно точен, так как после до"бавления,спирта оптическая плотность раствора не остается постоянной, а быстро изменяется.Цель изобретения - сокращение времени определения декстрана и повышение точности этого определения.Поставленная цель достигается теМ,что согласно способу определения койцентрации декстрана в крови, включающему обработку цельной крови или ев плазмы химическим реагентом, пробу обрабатывают раствором тромбина опеделяют тромбиновое время и коицентацию декстрана определяют по форму998953 КоэФфициенты для опр декстрана в кр Пре 0,146 0,234 ПолиглюкинРеополиглюкин-10,15 53,13110,0 Таблица 2 Время заб проб кров лиглюкин 6 До введени,препаратачерез 10 ми2 ч 195+0,2 10,3+0,1 124+0,2 15,1+0,1 1,34+1,036 28+1,52,47+0,6 1 6 4 Ополиглюкин 10 До введенипрепаратачерез 10 м2 ч24 ч 8Ю05 24,9+0,28 13,2+1,350 2,83+0,35 21,7+111,5+1 14,0+О19,0+1 н 24,2 3,76 1,62 ром цитрата Мд в соотношении 9:1,.добавляют к 0,2 мл исследуемой плазмы 0,1 мл предварительно приготовленного раствора тромбина с актив"остью 2, 5 ед/мл в 0,9%-ном раствое НаС 1. Определяют под влиянием 5ромбина время свертывания плазмы(тромбиновое время).Вычисляют искомую концентрациюдекстрана по формуле,Конкретные значения коэффициентов, 10полученные на ЭВМ-М"6000 методом наименьших квадратов по 4 экспериментальным точкам, приведены в таб. 1.. П р и м е р 1. Берут 0,2 мл плазмы, содержащей полиглюкин. Приливают 150,1 мл раствора тромбина. Определяюттромбиновое время по секундомеру.Оно равно 15,1 с. Вычисляют концентрацию полиглюкина в крови по Формуле 1полиглюкий): 0,146- 5,57+53,13 33или : 0,14622801-5,57 15,1+53,13 т.ви, содержашей реополиглюкин.,Отстаивают ее. К 0,2 мл плазмы приливают 0,1 мл раствора тромбина. Определяют тромбиновое время (й) по секундомерУ. Оно равно 15 с. Вычисляют концентра" ,цию реополиглюкина в крови по Формулереополиглюкин а 0,234 х,15 х+ +110 йли :0,234" 225-10,1515+110" 53-153+110 а 10, следовательно, концентрация декстрана в крови равна 10 мг/мл.Способ позволяет сократить время исследования до нескольких минут. Кро" ме того, способ менее трудоемок, так как отпадает необходимость второгоцентрифугирования и построение калибровочной кривой, Повышение точности способа обусловлено тем, что при выводе формулы используют усредненные значения концентрации декстрана в крови, измеренные ранее известным способом. В табл, 2 представлены результаты сопоставительного анализа определения концентрации препаратов декстрана. в крови после внутривенного введения в динамике по предложенному и известному способам.Т а б л и ц а 1 еделения концентрацииови998953 формула изобретения Составитель А.ДонцовРедактор :С.Патрушева Техред А.Бабннец Корректор Е.Рошко Заказ 1146/67 Тираж 871 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5филиал ППП Патент 1, г. ужгород, ул, Проектная 4 Способ определения концентрации декстрана в крови, включающий обра" ботку цельной крови или ее плазмы химическим реагентом, о т л н ч аю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности и сокращения времени исследования, пробу обрабатывают раствором тромбина; определяют тромбиновое время н концентрацию декстрана по формуледекстран)аа +аС +а где 1 - тромбиновое время в секундах 1 а,а и а - коэффициенты,учитывгпацие природу;дек.страна.Источники информациипринятые во внимание прн экспертизе1. Полушина Т.В., фром А.А. О сроках циркуляции в крови и выведенииполиглюкина с мочой.-фЕлиническаямедицина,1959, В 3, с. 118-123.10 2. Полушина Т.В.Синтетический кровезаменитель полиглюкин.,Разработка метода получения и изучение химических,физико-химических и биологическихсвойств. Докторская диссертация.15 М., 1968, (прототип)