Способ консервации аллотканей

лф делам лзввретен 53) УДК 615.36 (088.8) ткрытии 72 Авт тр,тф;,т д 1ТЕХНИЧЕСКИ, В. Зайкова и В. В. Жаро изобретен Ижевский государственный медицинский ОТ 71) Заявител инс) СПОС АЛЛОТКАНЕ ОНСЕРВА рованные из- повышенной Изобретение относится к медицине, в частности к трансплантологии, и может быть применено для консервации аллотканей с последущим применением консервированной ткани как пластического материала, при хирургических вмешательствах.Известен способ консервации аллотканей путем помещения их в консервирующую среду 1.Однако аллоткани консервивестным способом обладаютантигенной активностью.Цель изобретения - уменьшение анти- генной активности консервируемых алло- тканей и увеличение срока их хранения.Эта цель достигается тем, что в способе консервации аллотканей путем помещения их в консервирующую среду, аллоткань с консервантом помещают в однородное постоянное магнитное поле напряженностью 35 - 37 МТ при 8 - 12 С на весь срок консервации.Способ осуществляют следующим образом.Аллоткань, предназначенную для консервации, через 1 - 20 ч после смерти донора забирают и помещают в стерильный сосуд,наполненный консервирующим раствором, при 8 - 12 С. Сосуд с аллотканью помещают в однородное постоянное магнитное поле напряженностью 35 - 37 МТ и выдерживают до момента использования, Непосредствен но перед операцией консервируемую аллоткань извлекают из сосуда и используют для пересадки.Пример 1. Через 1 - 20 ч после смертидонора забирают любую из перечисленных выше видов аллотканей. Для консервации используют установку, снабженную соленоидом, внутри которого помещена камера консервации в виде полого цилиндра с внутренним диаметром 38 мм, длиной 450 мм, установленную на подставке в вертикаль ном положении, Включение в сеть переменного тока производят через понижающий трансформатор и выпрямитель с вмонтированным амперметром для регулировки напряженности постоянного магнитного поля внутри соленоида.20Для отведения тепла, образующегосяпри работе соленоида, и охлаждения камеры консервации (полого цилиндра), вокруг соленоида размещены латунные трубки с проточной водой (температура воды 6 -40 45 50 55 8 С), камера консервации плотно закрывается с обоих торцов для уменьшения влияния окружающей среды.В стерильный стеклянный сосуд помешают аллоткань, сосуд заполняют 0,2 бным раствором тимола при 8 - 10 С и помещают в камеру консервации в постоянное магнитное поле напряженностью 35 - 37 МТ.Для оценки качества консервации алло- ткани проводились гистологические исследования в различные сроки консервации (1, 3, 7, 14, 30 дней и ежемесячно в течение года).Контролем служит консервированная в 0,2 О/О- ном растворе тимола аллоткань с тем же сроком консервации без обработки алло- ткани магнитным полем. При помещении аллотканей в постоянное магнитное поле признаки распада тканей (мукоидное и фибриноидное набухание, фрагментация ядер) не наблюдались при хранении аллотканей в течение 12 - 12,5 мес. В контрольной группе признаки распада консервируемой алло- ткани наблюдались уже через 5 - 6 мес.Если принять содержание ядер в клетках тканей в часы забора аллотканей перед консервацией за 100 О/О, то в опытной группе через 12 - 12,5 мес. после консервации количество ядер составляло 79 - 85/о, в зависимости от вида аллоткани. В контрольной группе такой процент содержания ядер в клетках выявлен уже к 4 - 6 мес. консервации.Предлагаемый способ консервации алло- тканей апробирован на группе больных (70 человек), в возрасте 5 - 75 лет, с диагнозами: проникающие ранения глаз - 20 чел), сенильная катаракта (после экстракции катаракты) - 30 чел., после антиглаукоматозных операций - 20 чел, Как пластический материал использованы аллосклера, твердая мозговая оболочка и склера мертворожденных плодов, амниотическая оболочка новорожденных.При этом реакция тканей на перенесенную травму и пересадку аллоткани при использовании предлагаемого способа консервации держалась после экстракции катаракты в среднем 5, 8 дня, после алло- пластики при прободных ранениях склеры в среднем 7,5 дня, после антиглаукоматозных операций 3,7 дня, отторжение трансплантатов, консервированных предлагаемым способом, не наблюдали.Длительность пребывания больных в стационаре: после операции экстракции катаракты в среднем 9,7 дня, после прободных склеральных ранений в среднем 17,4 дня, после антиглаукоматозных операций в среднем 8,6 дня. Пример 2. Больной Н 67 лет, поступил в глазную клиническую больницу с диагнозом: сенильная зрелая катаракта правого глаза, незрелая катаракта левого глаза. Проведена экстракапсулярная экстракция 5 1 О 15 20 25 зо 35 катаракты на правом глазу с первичной аллосклеропластикой, без осложнений.Способ консервации: в 0,2 О/О-ном растворе тимола и постоянном магнитном поле напряженностью 35 - 37 МТ. Срок консервации пересаживаемой аллоткани 212 дней. Реакция тканей на травму (локальная, перикорнеальная инъекция, легкий хемиз в области раны) держалась 5 дней. При выписке глаз спокоен, ОД = 0,03 + 100 Д = 0,9. В области раны сформировался гладкий, нежный, не втянутый рубец.Для контроля использована группа больных численностью 60 человек 9 - 73 лет. По диагнозам, при которых проводилась пересадка указанных выше аллотканей, больные распределялись следующим образом: при экстракции сенильной катаракты - 30 чел., при прободных склеральных ранениях глаз, первичная хирургическая обработка склеральных ран - 15 чел., при антиглаукоматозных операциях - 20 чел. Консервация аллотканей производилась в 0,2/О- ном растворе тимола без внесения в постоянное магнитное поле. Срок консервации до 5 мес.Получены следующие результаты. Реакция тканей на травму держалась после экстракции катаракты в среднем 9,0 дней (7 дней - 4; 8 дней - 5; 9 дней - 14;10 дней - 3; 11 дней - 2; 12 дней - 2 глаза), после первичной хирургической обработки склеральных ран - в среднем 10,6 дня, после антиглаукоматозных операций - 6,2 дня.Отторжение трансплантата наблюдалось в трех случаях (5,0/О) в сроки 3 - 17 дней, с присоединением гнойной инфекции в ранние сроки отторжения (3 - 5 дней) (1 сл) и без таковой, в поздние сроки (2 сл.), что указывает на наличие повышенной антигенной активности примененных аллотканей. Длительность пребывания больных в стационаре после операции экстракции катаракты в среднем 14,3 дня, после прободных склеральных ранений - 23,8 дня, после антиглаукоматозных операций - 11,7 дня. Послеоперационное лечение больных в опытной и контрольной группах идентично.Сравнительные клинические испытания показали, что аллоткани, консервированные по предлагаемому способу, обладают сниженной антигенной активностью, Реакция тканей глаза на травму, пересадку алло- ткани проходит быстрее в среднем в 1,5 - 2 раза по сравнению с контрольной группой. (Результат достоверен: р = 0,02 после экстракции катаракты; р = 0,02 после первичной хирургической обработки склеральных ран; р = 0,05 - после антиглаукоматозных операций). Отторжение аллоткани в контроле (5 О/О) и отсутствие его в опытной группе,Длительность пребывания больных в стационаре в опытной группе в среднем в 1,5 -969220 Формула изобретения Составитель С. Малютина Редактор И. Ковальчук Техред И. Верес Корректор Н. Король Заказ 7376/2 Тираж 699 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 42 раза меньше в сравнении с контрольной группой (Р = 0,02). При этом продолжительность хранения аллотканей, консервированных по предлагаемому способу, по сравнению с известным увеличивается в два раза. 5Пример 3. Через 1 - 20 ч после смерти донора выделяют любую из перечисленных выше видов аллотканей. Ткань помещают в стерильный стеклянный тонкостенный сосуд при 8 - 10 С и помещают в описанную выше камеру консервации в постоянное маг нитное поле напряженностью 35 - 37 МТ.Для оценки качества консервации алло- тканей проводились гистологические исследования в различные сроки консервации (1, 3, 7, 10, 14, 30, 45, 60 дней).Контролем служат консервированные в сухой стерильной посуде при 2 - 4 С алло- ткани с тем же сроком консервации без обработки аллоткани магнитным полем.При помещении аллотканей в постоянное магнитное поле признаки распада тканей О (мукоидное и фибриноидное набухание, фрагментация ядер) не наблюдались пр 1 хранении аллотканей в течение 45 дней (ткань жизнеспособна). Лишь после 60 дней консервации появляются начальные признаки мукоидного набухания. В контрольной группе начальные признаки распада консервируемой аллоткани появились уже на 10-ый день консервации (начальные признаки мукоидн ого на буха ни я, фрагментация ядер), а на 14-ый день консервации - явления распада ткани явно выражены (мукоидное, умеренно-выраженное фибриноидное набухание, фрагментация ядер).Количество ядер в опытной группе через з 5 45 дней консервации - 76 - 84%. В контрольной группе такой процент содержания ядер в консервируемой аллоткани наблюдали при 7-дневном сроке консервации, Алло- ткань в момент взятия у донора содержала 100% ядер.40Предлагаемый способ консервации алло- тканей был применен на группе больных, 50 чел, при операциях по поводу: экстракция сенильной катаракты - 20 чел., про, никающих ранений склеры - 15 чел., ан 45 тиглаукоматозных операций - 15 чел. При этом реакция тканей на перенесенную травму и пересадку аллоткани при использовании предлагаемого способа консервации держалась после экстракции катаракты в среднем 5,3 дня; после аллопластики при прободных ранениях склеры в среднем 7,1 дня; после антиглаукоматозных операций - в среднем 3,4 дня. Отторжение трансплантатов аллотканей, консервированных по предлагаемому способу, не наблюдали.Длительность пребывания больных в стационаре после экстракции катаракты в среднем 9,3 дня, после прободных склеральных ранений - в среднем7,0 дня, после антиглаукоматозных операций в среднем 8,1 дня.Предлагаемый способ консервации алло- тканей позволяет увеличить срок сохранения жизнеспособности консервированной аллоткани в 2 - 4 раза по сравнению с известным. При этом антигенная активность консервированного трансплантата значительно уменьшается (уменьшение сроков реакции, например, глаза на травму и пересадку трансплантата, отсутствие отторжений трансплантатов). Это позволит сократить в 1,5 - 2 раза сроки пребывания больных в стационаре.При применении аллотканей, консервированных по предлагаемому способу, острота зрения, поле зрения и другие функциональные показатели не ниже, чем в опытной и контрольной группах. Способ консервации аллотка ней путем помещения их в консервирующую среду, отличающийся тем, что, с целью уменьшения антигенной активности консервируемых аллотканейи увеличения срока хранения их, аллоткань с консервантом помещают в однородное постоянное магнитное поле напряженностью 35 - 37 МТ при 8 - 12 С на весь срок консервации.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1, Бордюкова Г. Система реконструкции переднего отдела глаза, автореферат докт. диссерт. М., 1980, с. 7