Способ диагностики сенсибилизации к лекарственным препаратам

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскикСоцивлистииескинРеспублик пц 943576(22) За я влеио 26.08.80, (21) 2982165/28 - 13с присоединением заявки РЬпо делам нэабретеннй н открытнйОпубликовано 15,07,82. бюллетень 26 Дата опубликования описания 15,07,82 П. М. Сараджишвили, В. М. Габашвили, В. С, Мухаринская, ф. Г. Ветрогон и Н. А, Татишвфи(72) Авторы изобретения Институт клинической и экспериментальной неврологии:,.(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ К ЛЕКАРСТВЕННЫМ ПРЕПАРАТАМ 1Изобретение относится к медицине и может быть использовано для.диагностики сенсибилизации к лекарственным препаратам.Известен способ диагностики сенсибилизации к лекарственным преларатам путем обиаруже. ния антител в биологической жидкости с ло мощью реакции микропреципитации с последующим измерением оптической плотности реагирующих систем 1).Однако известный способ не обеспечивает достаточной точности диагностики.Цель изобретения - определение нейросинсибилизации к противосудорожным препаратам.Укаэанная цель достигается тем, что нри осуществлении способа диагностики сенснбилизации к лекарственным препаратам лутем обна. ружения антител в биологической, жидкости с помощью реакции микропрецинитации с последующим измерением оптической плотности реагирующих систем, отличительной особен о ностью является то, что реакцию микропреципитации проводят смешиванием спинно-мозговой жидкости с растворами противосудорожного препарата. 2На фиг. 1 и 2 изображены графики зависимости оптической плотности от разведения антигена,Сяособ осуществляют следующим образом.Проводят клиническое исследование больного и устанавливают показания для взятия слинномоэговой жидкости. Затем проводят спинномозговую пункцию, Для выявления нейросенсибилиэирующего воздействия принимаемогобольным противосудорожного препарата проводят следующие исследования спинномозговой жид. кости, Готовят аллерген-суточную дозу исследуемого лекарственного противосудорожного препарата, разводят в 100 мл дистиллированной воды, Раствор лекарственного препарата должен быть визуально прозрачным и бесцвет. ным. В штатив ставят 10 пробирок, и в первые 9 пробирок наливают по 1,0 мл дистиллированной воды, В десятую пробирку наливают 10 мл дистиллированной воды и добавляют в нее 1;0 мл (из 100 мл) приготовленного раствора противосудорожного препарата. Содержимое десятой пробирки перемешивают стеклянной палочкой, и лриступают к дальнейшему3 943576разделению, 1,0 мл раствора из десятой пробирки переносят э : девятую пробирку, из нее,повторяя процедуру, 1 мл жидкости переносятв восьмую пробирку и т. д вклю.ф чая первую пробирку, в результате чего раз.ведения аллергена увеличиваются в геометрической прогрессии, На следующем этапе иссле.дования проводят определение оптической плот.ности полученных растворов с помощью фотоэлектроколориметра (например, ФКМ - 56), 16Для этого берут 2 кюветы с рабочей длиной30-50 мм, в левую (контрольную) кюветуналивают 2,8 мл дистйллированной воды, вправую кювету (опытную) наливают 2,8 млспинномозговой жидкости. Обе кюветы помеща ют в кюветодержатели фотоэлектроколориметраи с зеленым светофильтром определяют исходную величину оптической плотности испытуемойспинномозговой жидкости, Затем в обе кюветывносит по 0,1 мл предварительно разведенноголекарственного препарата, начиная с минималь.ной его концентрации (первая пробирка) и содержимое кювет перемешивают стекляннойпалочкой,Спустя 2 мин после добавления лекарственного препарата каждого из разведений, фиксируют цифровые показатели со шкалы фотоэлектро.колориметра, которые отображают изменениеоптической плотности спинномозговой жидкостив результате внесения растворов лекарственныхпрепаратов различного разведения (с первойпо десятую пробирку).Из полученных значений оптической плотное.ти строят график зависимостей оптической плот.ности спинномозговой жидкости от разведениялекарственного препарата (фиг. 1 и 2), причем Зиа оси ординат откладывают оптическую плотность, а на оси;абсцисс - разведение препарата.Если испытываемая спинномоэговая жидкостьие содержит антител по отношению в данномулекарственному препарату (отрицательная реак.ция), то график зависимости оптическойплотности спинномозговой жидкости от разведения препарата представляет собой наклоннуюпрямую линию. Если испытываемая спинномозговая жидкость содержит антитела по отноше 4нию к данному лекарственному препарату (по. ложительная реакция), то на графике зависи.мости оптической плотности спинномозговой жидкости от разведения лекарственного препарата появляются пики или плато, параллельные оси абсцисс, при этом наличие пиков указывает на более интенсивную реакцию антител, чем пла. то.Необходимость взятия суточной дозы проти. восудорожного препарата и разведение его в 100 мл дистиллированной воды при исследова нии спинномозговой жидкости, а не в 1000 мл дистиллированной воды, как принято приисследовании крови, связано с проницаемостью гистоэнцефалического барьера для лекарственных веществ. Количество взятой для исследования пробы спинномозговой жидкости (1,8 мл) обьясняем тем, что при меньшей ее концентрации постановка реакции невозможна. Необходимость постановки пробы в 10 пробирках обусловлена фиксированием определенного разведения для количественного учета характера реакции. Предлагаемый способ позволяет диагностировать нейросенсибилизацию к таким противосудорожным препаратам, к которым при исследовании крови она не выявляется.Формула изобретенияСпособ сенсибилизации к лекарственным препаратам путем обнаружения антител в биологической жидкости с помощью реакции микропреципитации с последующим измерением оптической плотности реагирующих систем, о тл и ч а ю. щ и й с я . тем, что, с целью апре. деления нейросенсибилизации к противосудорожным препаратам, реакцию микропреципитации проводят смешиванием спинномоэговой жидкос.- ти с растворами противосудорожного препарата.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Реакция пассивной гемагглютинации для обнаружения антигел к лекарственным препаратам. - Лабораторные методы исследования в неинфекционной иммунологии, Под, ред. О. Е. Вя-. зова. М., Медгиз, 1967, с. 99-100.