Способ определения устойчивости злаков к насекомым, повреждающим зерно

Союз Советскнх Соцналнстнческнх Реслублнк(23) ПриоритетОпубликовано 071081, Бюллетень М 37 А 01 Н 1/04 Государственный комитет СССР по делам изобретений н открытий(088,8) Дата опубликования описания 07. 10. 81 Н.В. Буринская, Н.А. Вилкова и И.Д. Шапиро(72) Авторы изобретения Всесоюзный научно-исследовательский институт защиты растений(54 ) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УСТОИЧИВОСТИ ЗЛАКОВ К НАСЕКОМЫМ, ПОВРЕЖДАЮЩИМ ЗЕРНО Изобретение относится к сельскомухозяйству и может быть использованов селекции растений для созданияустойчивых к насекомым сортов злаков.Известен способ определения устойчивости злаков к вредной черепашке,основанный на физиологических особенностях питания черепашки на разныхпо устойчивости сортах злаков попроисходящим у насекомого изменениямв функциональном состоянии слюнныхжелез 1 1ДанНыи способ не раскрывает конкретных факторов устойчивости. 15Известен также способ прямого определения устойчивости злаков к вредной черепашке по атакуемости натив"ного крахмала муки ферментами вред,ной черепашки при проведении инкубирования с ферментной вытяжкой из насекомого 2),Однако такой способ трудоемок,требует дорогостоящего оборудованияи значительного количества зерновогоматериала. Размол зерна на мельницетравмирует крупные крахмальные зер-на, изменяя их атакуемость Ферментаминасекомого и искажая тем самым конечную оценку устойчивости. Кроме 30 того, способ не позволяет оценитьатакуемость ферментами насекомогоФракций различных по величине крахмальных зерен.Цель изобретения - упрощение способа и устранение травмирования зерна при подготовке к анализу,Это достигается тем, что инкубирование ферментного экстракта пищеварительных органов насекомого проводят с частью эндосперма, после чего в пробу добавляют 3 капли 96 этилового спирта, высушивают, наносят0,1 мл 0,1-ного раствора Люголя,повторно подсушивают, прилйвают0,1 мл дистиллированной воды и по интенсивностиокраски крахмальных зерен судят об устойчивости растений.К части эндосперма зерна, помещенного на предметное стекло с углублением, для размягчения приливаютпо 0,01 мл дистиллированной воды.Через 15 мин размягшие образцы растирают препаровальными иглами и приливают 0,1 мл ферментного экстракта пищеварительных органов насекомоого иинкубируют при температуре 37 С. Че-рез определенные интервалы вреиени кпробе приливают три капли.96 этилового спирта. После этого пробу под869704 Темно-фиолетовыйСи ний Темно-лиловый Лиловый Светло-лиловый Темно-сиреневый СиреневыйСветло-сиреневыйРозовый Светло-роэовыйОкраски нет Таблица 2 Баллы Непрозрачные Полупрозрачные ПрозрачныеПолупрозрачные Прозрачные Прозрачные 2 3 ПолупрозрачныеПрозрачные Прозрачные Прозрачные Прозрачные сушивают. Температуру нагрева подбирают таким образом, чтобы не происходило клейстеризации крахмала. На сухое крахмальное пятно наносят 0,1 мл О,И-ного раствора Люголя с последующим подсушиванием пробы, После подсушивания к пробе приливают 0,1 мл воды, Всю суспенэию переносят на предметное стекло и под покровным стеклом просматривают под микроскопом при увеличении 9 х 10. Устойчивость образца устанавливают по разрушению крахмала ферментами насекомых,кореллирующего с интенсивностью окраски крахмальных зерен иодом.В табл.1 показана шкала оценки в баллах окраски крахмальных зерен. В табл. 2 приведена шкала оценки степени прозрачности крахмальных зерен.,Нвет крахмальных зерен Баллы Прозрачность крахмальных зерен5 30 5 20 25 30 35 При оценке в баллах учитывают крайние окраски крахмальных зерен самую темную и самую светлую, степень их прозрачности н преобладающее достояние крахмальных зерен, Например, имеются крахмальные зерна следующих видов: темно-Фиолетовые непрозрачные, лиловые полупрозрачные, сиреневые полупрозрачные, светло- сиреневые прозрачные, розовые прозрачные, бесцветные прозрачные. Преобладают сиреневые полупрозрачные крахмальные зерна. Оценка; самые темные - темно-фиолетовые непрозрачные (1 + 1 балла); самые светлые - бесцветные прозрачные (11 + 3 балла); преобладающие - сиреневые полупрозрачные (7 + 2 балла). Общий балл (1 + 1) + (11 + 3) + (7 + 2) - 25 баллов.В каждой паре цифр первая оценивает цвет, вторая - степень прозрачности, Контроль - образец, не подвергавшийся перевариванию. Перевариваемость равна разности между опытной и контрольной пробами.П р и м е р. Проводят определение устойчивости сортов ячменя к вредной черепашке и личинкам зерновой моли; определяют оптимальные зерновые культуры для разведения в лабораторных условиях вредной черепашки и личинок зерновой моли. Установлено,что испытанные сорта ячменя имеют различную устойчивость к вредителям.Так, наиболее устойчив к вредной черепашке сорт ячменя Колониэл, и наименее устойчив - сорт Краснодарский 1. К личинкам зерновой моли иэ исследованных сортов ячменя наиболее устойчив сорт Краснодарский 1 б и наименее устойчив сорт Шагинский 395. При разведении вредной черепашки в лабораторных условиях зерно пшеницы сорта Беэостая 1 и зерно ячменя Краснодарский 1 наиболее оптимальны в качестве корма данного вредителя. Зерно кукурузы, риса и гороха непригодны для кормления вредной черепашки. При разведении в лабораторных условиях зерновой моли в качестве кормового субстрата следует испольэовать зерно кукурузы и пшеницы Безостая 1, так как крахмал данных видов наиболее легко переваривается ферментами личинок зерновой моли. Зерно риса и гороха непригодно для разведения зерновой моли.Анализ полученных данных позволяет сделать вывод о преимуществах данного способа определения устойчивости злаков к насекомым, повреждающим зерно, по сравнению с известным.Предложенный способ проще, чем известный и обеспечивает удешевление определения устойчивости, уменьшение количества селекционного материала869704 Формула изобретения Составитель Л, МарчеыковаТехредМ.Рейвес Корректор Г, Назарова Редактор С. Суркова Тираж 703 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д 4/5Заказ 8685/5 Филиал ППП "Патентф, г. Ужгород, ул. Проектная,4 и устранение травмирования зерна приподготовке его к анализу. Способ определения устойчивости злаков к насекомым, повреждающим зерно, включающий проведение инкубирования с Ферментной вытяжкой из насекомого, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения способа и устранения травмирования зерна, инкубирование Ферментного экстракта пищеварительных органов насекомого проводят с частью эндосперма, послечего в пробу добавляют 3 капли 96этилового спирта, высушивают, наносят 0,1 мл 0,1-ного раствора ЛЮголя,повторно подсушивают, приливают0,1 мл дистиллированной воды и поинтенсивности окраски крахмальныхзерен судят об устойчивости растений.Источники инФормации,принятые во внимание при экспертизе1. Авторское свидетельство СССРМ 298886, кл. А 01 Н 1/04, 1971.2. Авторское свидетельство СССРР 336004, кл. А 01 Н 1/04, 1972