Способ диагностики гетерозиготногоносительства при вульгарномихтиозе

ОПИСАНИЕ) 8523 БИЗОБРЕТЕН ИЯ Союэ Сооетскпх Социалистических Республик(45) Дата опубликования описания 07.08.81 1) М КлзА 61 В 10/00 сударственный комите о делам иаабретении 3) УДК 616-06В. Т. Куклин, Г. Г. Рункова и 3. Л. Степа Свердловский научно-исследовательск кожно-венерологический институт и Инстит растений и животных Уральского научног АН СССР(54) СПОСОБ ДИ НОСИТЕЛЪСТВА ых и неитральных т,с,25 4,2 го рног С( 53вных аминокислоты, см 8атный зом.У птелей,рых имской л Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в медицинской генетике.Известен способ диагностики гетерозиготного носительства при вульгарном ихтио. зе путем выявления женщин, имеющих в родословной заболевание вульгарным ихтиозом с рецессивным сцепленным с полом типом наследования по мужской линии 11.Однако известный способ не обеспечивает высокой точности диагностики.Целью изобретения является повышение точности диагностики способа. Эта цель достигается тем, что выявляют женщин, имеющих в родословной заболевание вульгарным ихтиозом с рецессивным, сцепленным с полом типом наследования по мужской линии, при этом в сыворотке крови женщин определяют содержание фенилаланина, на правой ладони в 111 и 1 Ч межпальцевом промежутке наличие кожного узора в виде петли и при повышенном содержании фенилаланина диагностируют гетерозиготное ноаительство,Способ осуществляют следующим обраедполагаемых гетерозиготных носие, у женщин, в родословной кото- ется заболевание ихтиозом по муж. ии с рецессивным, сцепленным с по 2лом типом наследования, берут кровь нз вены и сыворотку крови обрабатывают по методу 3. С. Чулковой и Н, И. Гуминой.При определении содержания свобод ных аминокислот для осаждения белков всыворотку вводят 4%-ную сульфосалициловую кислоту (1: 10), пробу центрифугируют в течение 10 мин при 8000 об/мин и полученный супернатант наносят на колонку 10 автоматического анализатора аминокислот,Количество аминокислот находят по методу Спекмана, Параметры ионообменного хроматографического анализа следующие: 16 При определении кисаминокислотВысота столбика смол 1-й буферный натрийцитратный раствор, м20 2-й буферный натрийцитратный раствор, м Время замены буферн раствора, мин Скорость движения б раствора, мл/ч Температура колонки При определении осн Высота столбика смол Буферный натрийцитр ЗО раствор, млОбследуемые группы 1,41.0,15 0 74 й 0,20 Гетерозиготные носителиКонтрольные Из табл. 1 следует, что у гетерозиготных носителей, т. е. у женщин, дети которых страдают вульгарным ихтиозом с рецессив. ным, сцепленным с полом типом наследования, обнаружено содержание фенилаланина в сыворотке крови (Р(0,05),Однако одни лишь показатели повышенного содержания аминокислоты фенилала. нина не позволяют с достоверностью устанавливать данный диагноз.Поэтому для выявления гетерозиготного носительства используют дерматоглифические признаки, характерные для женщин, дети которых больны вульгарным ихтиозом 3Скорость движения буферногораствора, мл/ч 60 Скорость движениянингидрина, мл/ч 30 Температура колонки, С 53 Для определения аминокислотного состава сывороточных белков их подвергают гидролизу: к 1 мл сыворотки добавляют 10 мл 6% соляной кислоты, пробу выдерживают в автоклаве в течение 4 ч при 134 С и выпаривают на водяной бане при температуре 60 - 70 С для удаления следов соляной кислоты. Сухой остаток растворяют в натрийцитратном буферном растворе (рН 2,20) и пробу наносят на колонку анализатора, определяя количественно все аминокислоты, содержащиеся в исследуемой сыворотке после гидролиза белков. Так как свободные аминокислоты исследованных сывороток составляют только 0,3% по отношению к сумме связанных (или белковых) аминокислот, количество всех аминокислот, найденных в сыворотке после ее гидролиза, принимают за общий белок.Режим определения белковых аминокислот на анализаторе такой же, как режим при определении свободных аминокислот.Характеризуя аминокислотный состав сывороточных белков, рассчитывают не только абсолютное содержание аминокислот в белке, но и содержание каждой из аминокислот в процентах к сумме белковых аминокислот.Статистическую обработку результатов проводят стандартным методом, используя температурный критерий.Результаты исследования приведены в табл. 1.852315 с рецессивным, сцепленным с полом типомнаследования.Отпечатки правой ладонной поверхностиполучают методом типографической краски, о и в 111 и 1 Ч междупальцевом промежуткеустанавливают наличие узора петли.В табл. 2 приведена частота встречаемости типа узора петли в 111 или 1 Ч междупальцевом промежутке правой ладони, 10 Таблица 2 Частота встречаемости узора в промежутках между пальцами правой руки, %П 5 Обследуемыегруппы Типузора 20ГетерозиготныеносителиКонтрольные 57 й 7 40 й 7 Петля Петля 54 50 48+ 7 226 Формула изобретения 60 Способ диагностики гетерозиготного носительства при вульгарном ихтиозе путем выявления женщин, имеющих в родословной заболевание вульгарным ихтиозом с рецессивным, сцепленным с полом типом на следования по мужской линии, о т л и ч а ю 25 Из табл. 2 видно, что у гетерозиготныхносителей узор петли в 111 или 1 У между- пальцевом промежутке правой ладони наблюдается во всех случаях; при этом возможно одновременное наличие петли в Ш 80 или 1 Ъ" междупальцевом промежутке. У контрольных женщин узор петли в соответствующих промежутках составляет 62%.По наличию узора петли в 111 или 1 Чмеждупальцевом промежутке правой ладо ни невозможно достоверно установить диагноз гетерозиготного носительства. Одновременное сопоставление результатов исследования сыворотки крови на свободную аминокислоту-фенилаланин и установление на личия узора петли в П 1 или 1 Ч междупальцевом промежутке правой ладони у жен.щин, в родословной которых имеется заболевание вульгарным ихтиозом по мужской линии с рецессивным, сцепленным с полом 45 типом наследования, позволяют с достоверностью установить диагноз гетерозиготного носительства вульгарного ихтиоза.Предложенный способ обеспечивает высокую точность диагностики и позволяет 50 предупредить рождение больного ихтиозомребенка после медико-генетического консультирования,Последующий генеалогический анализ вмедико-генетических консультациях позво ляет установить возможные вариации заболевания ихтиозом в будущих поколениях.Заказ 4831 Изд. 461 Тираж 694 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж.35, Раушская наб., д. 4/5Подписное Загорская типография Упрполиграфиздата Мособлисполкома 5щ и Й с я тем, что, с целью повышения точности диагностики способа, в сыворотке крови женщин определяют содержание фенилаланина, на правой ладони в 111 или 1 Ч межпальцввом промежутке наличие кожного узора в виде петли и при повышенном сдержании фенилаланина диагностируют гетерозиготное носительство. 6 Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Кряжева С. С., Ведрова И. Н Елец кий А, Ю. Клинико-генетические особенности различных форм ихтиоза, Журнал Вестник дерматологии и венерологии, 1977,9, с. 17 - 23.