Способ индикации микобактерий

(19) г И 1/О ТЕНИЯ ОР СКОМУ ЕЛЬСТВУ го Красмедиашова удная Л.В. огичес-.лезе. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ ПИСАНИЕ ИЗО(7 1) Казанский ордена Трудовоного Знамени государственныйцинский институт имени С.В.Кур(56) Финкель Е.А. и ИихайловаГидрокортизонный метод в биолких исследованиях при туберкуФрунзе, 1976, с. 3-5.(54) (57) СПОСОБ ИНДИКАЦИИ МИКОБАКТЕРИЙ, путем парэнтерального введениялабораторным животным вещества, снижающего резнстентность организма, споследующим введением исследуемогоматериала и анализом органов животного, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что с целью повышения чувствительности способа, животным в качествевещества, снижающего резистентностьорганизма, вводят однократно коклюшную моновакцину в дозе 20-30 млрдмикробных клеток за 6-7 дней до введения исследуемого материала.,57-+0,47 1, 12-0,5 Изобретение относится к области микробиологии и может найти применение в медицине и ветеринарии при исследовании микобактерий.Известен способ индикации мико- бактерий путем парэнтерального введения лабораторным животным вещества, снижающего резистентность организма с последующим введением исследуемого материала и анализом органов животного.Однако известный способ является недостаточно чувствительным.Целью изобретения является повышение чувствительности способа.Эта цель достигается тем, что способ индикации микобактерий осуществляют путем парэнтерального введения лабораторным животным вещества, снижающего резистентность организма, с последующим введением исследуемого материала и анализом органов животного, при этом животным в качестве вещества, снижающего ре-. зистентность организма, вводят однократно коклюшную моновакцину в дозе 20-30 млрд микробных клеток за 6- 7 дней до введения исследуемого материала.Предложенный способ осуществляют следующим образом.Используют белых мьппей обоего пола массой 16-18 г, Животным внутри брюшинно однократно вводят коклюш - ную моновакцину в дозе 20-30 млрд микробных тел. Заражение животных культурой микобактерий производят через 6-7 дней после введения вакцины, внутривенно, по 0,5 мг сухой массы культуры в объеме 0,5 мл физиологического раствора. По истечении 1 мес после заражения животных забивают. Трупы погибших ранее и забитых животных вскрывают и делают следующие анализы: микроскопия мазков- отпечатков внутренних органов, посевсуспензии этих органов на питательные среды, патогистологические ис следования.1П р и м е р 1. Беспородные белыемыши обоего пола маосой 16-18 г былиразделены на 3 группы по 10 мьппей вкаждой. Первой группе животных сцелью сенсибилизации организма одновременно внутрибрюшинно вводят коклюшную моновакцину в дозе 20 млрдмикробных тел в объеме 1 мл за 6 днейдо заражения исследуемой культурой. 8 3Второй группе животных в течение 5 дней до заражения ежедневно подкожно вводят гидрокортизон в дозе 1,0 мг. Третью группу составляли интактные животные (контроль).Животным всех трех групп внутривенно вводят фотохромогенную культуру М.Еапзазд (эталонный штамм) в дозе 0,5 мг сухой массы в объеме 0,5 мл физиологического раствора. Зараженных животных наблюдают один месяц.П р и м е р 2. Для заражения используют скотохроммогенную культуру микобактерий, штамм 9 55, свежевыделенный от больного. Методика опыта была такой же, как в первом примере.По истечении сроков наблюдениявыживших животных, зараженных обеими культурами, забивают. Трупы животных, забитых и погибших ранее, вскрывают. Приготовляют мазки-отпечатки из легкого, печени, селезенки каждого животного; мазки окрашивают по методу Циля-Нильсена. При микроскопии подсчитывают количество кислотоупорных микобактерий в 100 полях зрения. Из тех же внутренних органов приготовляют суспензии в физиологическом растворе 1:5 и засевают по 0,2 мл на 3 пробирки среды Левенштейна-Йенсена. Посевы выдерживают в термостате до 2-3 месяцев, далее подсчитывают количество колоний в каждой пробирке. Результаты опытов оценивают по четырехбальной системе.В каждой группе животных определяют среднее значение индекса вегетации микобактерий.Полученные данные приведены в таблице.Средние индексы вегетации мико- бактерий у зараженных животных по данным микроскопии и посева3 786328 4Продолжение таблицы Как видно из таблицы, показателивегетирования микобактерий у живот 2 3 ных интактных (контрольная группа)значительно ниже, чем при использо 5 ванин коклюшной моновакцины и гидрокортизона. Различие с контролем ста,41+0,78 0,68+0,6 тистически достоверно (р 0,01)Введение гидрокортизона Редактор П,Горькова Техред И.Попович Корректор Е.Сирохман Заказ 4033/2 Тираж 490 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Интактные животные (контроль) ,0,47+0,23 0,34 ф 0,33 П р и м е ч а н и е: индекс указан с предельной ошибкой, при достоверности р=95 Х. Предложенный способ позволяет по-, высить чувствительность лабораторных животных к микобактериям с.ослабленной вирулентностью по сравнению с интактными животными в 2-3 раза.