Способ отбора растений конопли на содержание каннабиноидов

Союз Советскнк Социалнстическнк РеспубликОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИ ЕТЕЛЬСТВУ о 784838(22) Заявлено 070679 (21) 2777091/30-15с присоединением заявкн йо(51)М, Кл 3 А 01 Н 1/04 Государственный комитет СССР по делам нзобретеннй н открытий(088.8) Дата опубликования описания 0712.80(72) Автор изобретени В.П, Сорока 1) заявитель 4) СПОСОБ ОТБОРА РАСТЕНИЙ КОНОПЛИ НА СОДЕРЖАНИЕ КАННАБИНОИДОВ онопли при .на селекцион Изобретение относится к селекциирастений и может быть использованов сельском хозяйстве.Известны способы отбора растенийконопли на содержание каннабиноидов, 5при которых производят анализ верхушек соцветий растений с помощью тонкослойной хроматографии полуколичественного выявления наличия в частноститетрагидроканнабинола на пластинках 10силуфол (1 и 121,Однако известные способы оченьсложны, требуют значительных затраттруда, времени и материальных средств.Цель изобретения - удешевление и 15упрощение способа.Поставленная цель достигается тем,что отбор растений проводят по количеству железистых волосков, приходящихся на.единицу площади поверхности 20прицветников верхней части соцветия.При этом о низком содержании канНабиноидов судят по минимальному, ао большом - по максимальному количеству железистых волосков по сравнению со средними показателями сорта.Способ осуществляется следующимобразом;В период созревания куборке элитных растений ных питомниках с каждого из отобранных и зазтикетированных растений сре зают ножницами верхушку соцветия 2-3 см длиной с имеющимися семенами, обернутыми прицветниками, и помещаюрт каждую такую верхушку соцветия в заранее заготовленный отдельный бумажный пакет. На пакете записывают название сорта, номер делянки и номер растения,С питомника пакеты заполненные Фверхушками соцветий элитных растений конопли, доставляют в "лабораторию, где определяют степень опущенности прицветников железистыми волосками. Для этого на каждой срезанной верхушке соцветия с помощью пинцета выбирают два хорошо сформированных и развитых прицветника и кладут на предметный столик в поле зрения стереоскопического микроскопа системы МБС, Прицветники иэ соцветия берут вместе с семенами, потому что так они отделяются лучше и быстрее. А во избежание случайностей при подсчетах железистых волосков берут не по одному, а подва прицветника с каждой верхушкиеПри увеличении микроскопа 4 к 7 в отраженном свете на дорэальной сто"784838 роне прицветника между центральной и боковой первого порядка жилками на площади 1 кв. мм. поверхности проводя подсчет"количества железистых волосков. Необходимая рабочая площадь на йбверхности прицветников определяется с помощью окулярной сетки, кото- рая помещается в одну иэ окулярных трубок микроскопа на весь период подсчета железистых волосков. Окуляр- ная сетка, которойснабжен микроскоп, разделена на 225 квадратиков. Подсчет же количества железистых волосков-йа"прицветниках кбнопли проводят не во всех 225 квадратах окулярной сетки, а только в 16, которые в поле зрения микроскопа при данной увели чеййи как раз и ограничивают на по" верхности прицветника площадь, равную 1 кв.мм. Сетка позволяет не только точно ограничить требуемую площадь;-но и точно учесть все железис- З) тые волоски на данной площади.Подсчет количества железистых волосков на каждом из двух прицветников данной верхушки соцветия проводят один раз. данные подсчета как на Количество железистыволосков на 1 кв.ммплощади поверхностиприцветников, шт. Среднее количество железистых волосков на 1 кв.ммплощади поверхности прицветниковрастения, шт. Номеротобранногорастения Номерде- лянки первый второй при- прицветник цветник. 3,0 11,0 25,0 31226. 1 1 3 2 10 3 2423,5 ,20, 5 18,56,0 20 19,032 31,021 22,0тельно меньше среднего их количества по сорту) . В нашем процессе это растения, идущие в таблице под номерами 1, 7 и, как исключение 2. Все остальные растения данного сорта (3-6, 8-10, с большим количеством железистых волосков на прицветниках) бракуются и в дальнейшем селекционном процессе на уменьшение содержания каннаф биноидов не участвуют. 18 30 23 8 9 10Йз таблицы видно; что среднее количество железистых волосков равно18,0 шт.В дальнейшем в зависимости от необходийого направления в селекциикойбплй на содержание каннабиноидов(увеличение или уменьшение)отборрастений с малым или большим содержанием каннабйнбидовповодят соответственно по малому или большому коли"-честву"желеэйстых волосков, приходя- щйхсМ"йаединицу" площади поверхностиприцветников.П р и м е р 1. При селекции ко"нопли на уменьшение содержания каинабиноидов отбирают и иопользуют вдальнейшем Селекционном процессетолько те растения, йа прицветнйкахкоторых содержится минимальное коли" " чество железистых волосков (значиодном, так и на другом прицветниках, а также среднее между ними записывают в журнал под номером, соответствующим номеру растения. Таким образом, подсчет количества железистых волосков на прицветниках проводят на всех верхушках соцветий, срезанных с отобранных и заэтикетированных элитных растений данного сорта. Затем на основани( уже полученных данных для каждого растения (среднее из двух подсчетов) вводят среднее арифметическое для всей группы растений данного сорта количества железистых волосков на 1 кв.мм. площади поверхности прицветников.Среднее арифметическое значение .количества железистых волосков позволяет провести четкую границу между .малым и большим их значениям среди проанализированных растений. Особен-. но это важно, когда в группах имеется по несколько сот растений. В таблице приведена примерная запись в журнал при подсчете железистых волос.ков на прицветниках конопли (сорт ЮСО). П р и м е р 2. При селекции конопли на увеличение содержания каннабиноидов отбирают и используют в селекционном процессе только те растения, на прицветниках которых содержится макСимальное количество жели-. эистых волосков (растения, идущие в таблице 2 под номерами 9, 3 и 4). Всеостальные растения данного сорта784838 Составитель Л.МарченковаРедактор Н.Тимонина Техред Н.майорош Корректор М. Шароши ЮЮ тщ е тЗаказ 8691/2 Тираж,723 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5(с малым количеством железистых волосков на прицветниках) бракуются ив дальнейшем селекционном процессена увеличение содержания каннабиноидов не участвуют. Сравнительное параллельиое испытание предложенного способа отбора растений с различным содержанием каннабиноидов по железистым волоскам и существующего сгособа тонкослойной хроматографии на пластинках показало полное совпадение полученных данных. Однако использование предлагаемого способа отбора растений конопли с различным содержанием каннабиноидов упрощает анализы и позволяет, по сравнению с существующим способом, значительно упростить процесс, сократить затраты труда, времени и исклю;чить расходование дорогостоящих ма- териальных средств. ФоРмула изобретенияСпособ отбора растений конопли насодержание каннабиноидов, включающийанализ верхушек соцветий растений наналичие этих веществ, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью снижения затрат, анализ и отбор растенийпроводят по количеству железистыхволосков, приходящихся на единицуплощади поверхности прицветниковверхней части соцветия и сравниваютэто количество со средним значениеманализируемого сорта.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе,1. Лазурьевский Г.В., Николаев П.А.15 фКаннабиноиды", Кишинев, изд. "Штиинцаф, 1979.2. Кисин М.Ви др. "Применениехроматографии в тонких слоях при исследовании вещественных доказательств"М., 1973 (прототип).