Способ лечения аутоиммунных гемоцитопений

Союз Советских Социалистических РеспубликОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(61) Дополнительное к авт, сеид-ву(22) Заявлено 19, Об. 78 (21) 2657205/28-13с присоединением заявки йо -(51)М. Кл,з А 61 В 10/00 Государствеииый. комитет СССР ио делам изобретеиий и открытий(72) Авторь изобретения И,П, Сарницкий и Л.М. Тищенко Киевский государственный институт усовершенствования врачей(54) СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ АУТОИММУННЫХ ГЕМОЦИТОПЕНИЙИзобретение относится к медицине, а именно к иммуногематологии.Известен способ лечения аутоиммунных гемоцитопений путем введения в организм больного иммунодепрессантов 1 1.Однако известный способ. не обеспечивает индивидуального подбора препарата. 10Цель изобретения - индивидуальный подбор препарата.Цель достигается тем, что предварительно исследуют чувствительность взаимодействия Т- и В-лимфоцитов крови больного с антигеном или ком 15 плексом антиген-антитело к иммунодепрессанту и йбследний выбирают по степени наибольшего угнетения феномена розеткообразования.П р и м е р. Для проведения Й,.мунодепрессантной терапии препарат цик= лофосфан используют в дозах1-3,5 мг/кг/сут, что в среднй. тавляет 200 мг. Вес больного 60 кг. Следовательно, по известным формулам пересчета объем циркулирующей крови у больного составляет около 4800 мл, количество лейкоцитов периферической крови - 10 т 10 на 1 л, из них 20 . -лимфоциты, абсолютное количестволимфоцитов - 2.10 на 1 л, Лимфовзвесь для исследований у данногобольного должна быть приготовленатак, чтобы клеточное число также со-.ответствовало 210 на 1 л. Рассчитывают, какое количество пре парата (циклофосфана)при.введении его в организм приходится на 2 к 109 на 1 л лимфоцитов (те,на 1 л циркулирую- щей крови): если на 4,8 л крови вво дится 200 мг ЦФ, то на 1,0 л 41,7 мг.Далее количество иммунодепрессанта рассчитывают на объем лимфовзвеси, используемый в реакции розеткообразования: если на 1,0 л .(1000 мл) вводится 41,7 мг ЦФ, то на 0,1 мл - 0,0417 мг.По такому же принципу рассчитывают необходимые количества других препаратов, которые используются в качестве иммунодепрессантов при индивидуальном подборе данному больному (преднизолон, б-меркаптопурин, имуран, (азатиоприн), метотрексат, винбластим, винкристин, цитозинарабинозид и др.)766585 Исходноеколичеств 6 клофосфан, мг/кг веса Затем выделяют лимфоциты периферической крови в градиенте плотности фикол-урографина (или фикол-верографы на) проводят обычным, широко используемым методом по ЬапдИ апс)з,).Р.Определяют содержания Т-лимфоцитов и степени влияния Нммунодепрессан тов на образование Т-розеток.Для исследования используют метод прямого розеткообраэования, После определения содержания Т-лимфоцитов проводят подбор иммунодепрессан ф тного средства. Для этого к 0,1 мл лимфовзвеси добавляют рассчитанную дозу препарата, инкубируют при ком - натной температуре в течение 5 мин. Затем лимфовзвесь с иммунодепрес сантом соединяют с 0,1 мл 0,5-ной взвесью эритроцитов барана. Дальнейший ход исследования обычный. Подсчет. образовавшиХся розеток производят в камере Горяева. 20Определяют. содержание В-лимфоцитов и степени влияния иммунодепрессантов на образование В-розетокДля исследования используют метод непрямого (иммунного) роэеткообразования. Рассчитанную дозу иммунодепрессанта добавляют к 0,1 мл лимфовзвеси, и после 5-минутной экспозиции при комнатной температуре вносят 0,1 мл гемолитической системы. Дальнейший ход исследования обычный. Количество образовавшихся В-розеток сосчитывают в камере Горяева.П р и м е р. Больная К., 59 лет. Поступила в гематологическое отделение больницы с жалобой на частые 35 носовые кровотечения, появление геморрагий на коже туловища и конечностей, прогрессирующую слабость, повышенную утомляемость. Впервые появление геморрагий отметила весной 40 1974 г., в это же время при анализе периферической крови обнаружена выраженная тромбоцитопения (до 6 Х 109 тромбоцитов на 1 л крови). По поводу своего заболевания неодно кратно проходила курсы лечения в различных стационарах. После тщательного клинико-гематологического и иммунологического исследования установлен диагноз - аутоиммуная тромбоцитопеническая пурпураПосле этого больной проведен курс лечения препаратами кортикостероидных гормонов(преднизолон в дозе 100 мг/сут в течение 7 дней, затем постепенное снижение суточной дозы препарата до полной отмены в течение 30 дней) в сочетании с цитостатическим препаратом из группы антиметаболитов - 6-меркаптопурином (по 150 мг в день в течение 26 дней), Уже к концу второй недели преднизолонотерапии у больной отмечалось повышение содержания сахара в крови до 1,45 мг В, которое прогрессировало и, несмотря на проводимую отмену препарата, к 21 дню достигло 352 мг%. В это же время отмечалось повышение уровня сахара в моче до 3,2. Клинически явления стероидного диабета. сопровождались резкой слабостью, жаждой, повышением дневного и но 4 ного диуреза. Кроме того, обнаружено повышение кровяного давления до 200/100 мм рт.ст. Больной была назначена инсулинотерапия, на фоне которой отмеченные осложнения терапии кортикостероидами исчезли, Содержание тромбоцитов крови к моменту окончания курса терапии - 151109 на 1 л. На поддерживающее лечение больной назначен 6-меркаптопурин по 100.мг 2 раза в неделю в течение месяца, затем иммунодепрессантная терапия была отменена. При контрольной амбулаторной проверке количество тромбоцитов крови - 118 л 10) на 1 л, Полная клинико-гематологическая ремиссия сохранялась в течение 10 мес. Затем вновь началось постепенное снижение тромбоцитов периферической крови, клинические проявления геморрагического диатеза, Однако ольная наблюдалась амбулаторно, отказываясь от госпитализации. К январю 1977 г. состояние ее значитель но ухудшилось - появились головные боли, резко усилились проявления геморрагического диатеза, прогрессирующая общая слабость. Тромбоциты в периферической крови в это время - единичные в препаратах, Больная была госпитализирована в стационар.Учитывая наличие в анамнезе осложйений при лечении больной препаратами кортикостероидных гормонов и в связи с этим невозможность повторного применения терапии глюкокортикоидными гормонами, был проведен индивидуальный подбор иммунодепрессанта по описанному способу. Результаты исследования приведены втаблице.766585 Продолжение таблицы Винбластин,01 мг/кг веса 12 6-Меркаптопурин 18 21 33 Преднизолон, 2 мг/кг веса 26 Формула изобретения Составитель С. Малютина Редактор Е, Лушникова Техред М,Петко Корр р . екто Г. Назарова Заказ 6760/1 Тираж 673 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035 Москва ЖРаушская .наб., д. 4/ 4/5 Ю 4Филиал ППП "Патент", гУжгород, ул. Проектная,Анализ полученных результатов показывает, что преднизолон оказывает наи-о менее выраженный иммунодепрессантный эффект у этой больной. Из всех примененных в данном случае для индивидуального подбора средств с иммунодепрессантным эффектом наиболее вы Ь раженное действие ин витро отмечено у циклофосфана. Этот препарат и был выбран для проведения курса иммунодепрессантной терапии у данной больной. Лечение циклофосфаном проводи- рО лось по схеме запоя К.К, Реппег ,А, в течение 45 дней. Курсовая доза препарата составила 6700 мг. В процессе терапии отмечалось постепенное нарастание содержания тромбоцитов (до 180"10 на 1 л к моменту выписки), исчезновение проявлений геморрагического диатеза. Осложнений в течение и после курса терапии не отмечено. достигнутая полная клинико-гематологическая ремиссия поддерживается у этой больной в течение 15 месяцев.Выл также проведен индивидуальный подбор препарата для иммунодепрессантной терапии описанным мето- З 5 дом и последующее лечение подобранным цитостатическим средством у 14 больных аутоиммунными гемоцито - пениями (10 больных - аутоиммуниой тромбоцитопенической пурпурой и 4 - 4 О аутоиммунной гемолитической анемией). Во всех случаях получен вы, сокий терапевтический эффект, не отмечалось проявлений токсичного действия химиотерапевтических средств на организм больного, получена длительная клинико-гематологическая ремиссия.Предлагаемый способ позволяет под бирать индивидуально препарат для иммунодепрессантной терапии с учетом его влияния на иммунокомпетент- . ную систему больного. Таким образом повышается специфическое действие иммунодепрессанта, с чем связано повышение клинического эффекта проводимой терапии и снижение побочного влияния цитостатических средств, применяемых в качестве иммуносупрессоров. Способ лечения аутоиммунныхгемоцитопений путем введения в организм больного иммунодепрессантов,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью индивидуального подбора препарата, предварительно исследуют чувствительность взаимодействия Т- иВ-лимфоцитов крови больного с антигеном или комплексом антиген-антитело к иммунодепрессанту и последний выбирают по степени наибольшегоугнетения феномена розеткообразования.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. 5 иапьоп М.А, е а 1. 1 ввопоьцргеьь(че ййегару, ахеи.Еп 91.,).Мед.1967, 277. 163-170.