Способ восстановления жизнедеятельности лабораторных животных

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 1,0 536827 Союз. Советских Социалистических Республик(23) ПриоритетОпубликовано 30.11.76. Бюллетень4Дата опубликовання описания 16.12.76 51) М. Кл.- А 61)т 1 1,0 Государственныи комитет Совета Министров СССР оЗ)ДЬ, 612 1(о делам изобретен открытн 2) Авторы изобретени Погосова(71) Заявитель шневского ЖИЗНЕ ИВОТНЪ ВОССТАН О ВЛ ЕН ЛАЬОРАТО РНЫХ 54) СП НО Изобретение относится к медицине и может нанти применение в клинической практике.известен сосоо восстановления жизнедеятельности лаоораторных животных, заключающиися в охлаждении и искусственном кровоооращении 11.однако при известном способе восстановления жизнедеятельности живовных удается реанимировать только после коротких периодов смерти.целью изобретения является увеличение периода, в тече ие которого возможно оживление организма, а также возможность восстановления жизнедеятельности организма мелких животных.дто достигается тем, что охлаждение проводят:постмортально со скоростью О,о - О,о смин до У - 21-1. а искусственное кровоооращение проводят путем подключения венозной магистрали к нижнеи полой вене через левую почечную вену, а артериальной - через тройник к артерии и к вене,пособ восстановления жизнедеятельности лаоораторных животных осуществляют следующим образом.1 этап - предварительная подготовка животного.Под вводным внутривенным тиопенталовым и основным ингаляционным эфирным наркозом (стадии 1 з - -111.) проводят выделение и интубацию трахеи, а з; тем выделение и канюлирование яремной вены и сонной артерии. К бедреннои артерии для измерения давления присоединяюг ртутный манометр. 11 еред этим 5 внутривенно вводят генарин 10, - О,тб мл(кгвеса). 11 осле внутривенного введения реляксантов деполяризующего действия гнапример, дитилина - 2 - б мг 1 кг веса) начинают принудительную вентиляцию легких. ь этом сосгоя нии животному проводят срединную продольную лапаротомию, выделяют левую ночку и вместе с неи ее вену, через последнюю в заднюю полу вену проксимально на протяжении о - а см вводят канюлю, диамер которой 4 мм.1 1 редварительно устанавливают, что при гравитационном (синхронном) методе оттока по канюле упомянутого диаметра в минуту свободно проходит не менее 300 мл жидкости (крови), .высота сифона при этом должна быть не 20 менее 25 - 30 см, а длина канюли - 0 см, Иззадней полой вены наружу канюлю выводят через брюшную стенку. брюшную полость швами закрывают наглухо. Животное помещают на весы и к нему присоединяют электроды 2", элек 1 рокардиографа 1 электрокардиоскопа).И этап - умерщвление животного.Выключают искусственное дыхание и производят кровопускание; из задней полой вены через введенную ранее канюлю эвакуируют 30 60 - 70 мл,крови. При этом артериальное дав 536827ление быстро снижается до 20 мм рт. ст., а затем и до нуля. В последующие 2 - 3 мин наблюдается 15 - 20 агональных дыхательных движений, сердечная деятельность нарушает. ся, вскоре спонтанное дыхание и роговичный рефлекс исчезают, на электрокардиограмме появляется изолиния. Наступает клиническая смерть. От начала кровопускания до последнего дыхательного движения обычно проходит 5 - 6 мин. В последующие 10 мин животное находится в состоянии смерти. За это время от животного отключают электрокардиограф, манометр и аппарат для искусственной вентиляции легких,П 1 этаи - охлаждение животного,По прошествии 10 мин смерти (а от начала кровопускания 15 - 16 мин) животное подвергают искусственному охлаждению. Его проводят в двух видах - или путем внешнето, или внутрисосудистого охлаждения организма.При внешнем охлаждении заранее подготавливают ванну, в,которую наливают холодную воду и добавляют лед. Температуру воды доводят до 2"С. После 10 мин смерти животное погружают в приготовленную ванну (погружение большей части головы в воду обязательно), Охлаждение проводят быстро, особенно толовы. Для этого слегка перемешивают воду у внешнего:покрова животного.Обязательно измеряют температуру во рту и в прямой кишке, градиент между этими показателями не должен быть более 2 - 3"С. В течение 25 - 30 мин температура во рту снижается до 22 - 23 С, а в кишке - до 24 - 25"С, Затем животное извлекают из воды, насухо вытирают, фиксируют к станку и помещают на весы. Вновь подключают электрокардиоскоп, аппарат для искусственной вентиляции легких, ртутный манометр и заранее подтотовленный аппарат для искусственного кровообращения, в который предварительно заливают 140 в 1 мл кроличьей донорской крови.Кровь предварительно оксигенируют и с помощью теплообменника температуру ее доводят до 24 С.При внутрисосудистом охлаждении заранее готовят аппарат искусственного кровообращения, в который заливают 90 - 100 мл кроличьей донорской крови. Этот аппарат присоединяют к ранее введенным в сонную артерию и полую вену канюлям после начала смерти жи. вотного. С помощью теплообменника темпера. туру крови в аппарате доводят до 7 - 8 С. По прошествии 10 мин смерти (а от начала кровопускания 15 - 16 мин) включают аппарат искусственного кровообращения, начинают перфузию организма холодной венозной кро. вью и внутрисосудистое охлаждение животно го. Объемная скорость перфузии при этом со. ставляет 60 - 70 мл/мин. Перфузию проводят без оксигенации крови. За 20 - 25 мин перфузии температура во рту снижается до 22 - 23 С, а в кишке - до 25 - 26 С: После этого аппарат искусственного, кровообращения вы 4ключают, перфузию и дальнейшее охлаждение животного прекращают и выжидают в течение 25 - 30 минживотное продолжает, находиться в состоянии смерти, За это время в выключен ном аппарате искусственного кровообращенияпроводят предварительную оксигенацию крови и согревание ее с помощью теплообменника до 24 С.И этап - реанимация.10 Реанимацию начинают через 60 мии послесмерти животного. Сначала из аппарата сердце - легкие по артериальной канюле в животное равномерно, дозированно подают такое количество кровикоторое у него было 15 изъято при кровопускании, т. е. 60 - 70 мл.Затем под животное подкладывают трелку, температура воды в которой 38 - 40 С. Производят уравновешивание на весах.После этого включают аппарат искусствен ного кровообращения и снимают зажим с канюли, идущей из задней полой вены. Начинают искусственную вентиляцию легких. В течение первых 15 - 20 мин перфузии объемы ее сравнительно небольшие - 50 - 70 мл/мин. В 25 последующее время объемы перфузии постепенно увеличиваются и их доводят до 100, редко до 120 мл/мин, По мере повышения температуры тела животного, постепенно увеличивают температуру подаваемой в него крови.3 О При этом градиент между температурами ворту и в кишке не должен превышать 2 - 3 С.В эксперименте стремятся равномерно согревать все тело животного.Через 30 - 35 мин от начала искусственногокровообращения появляются отдельные сердечные сокращения, затем они становятся ритмичными и эффективными, артериальное давление повышается до 60 - 70 мм, а потом и до 90 - 100 - 120 мм рт. ст. Через 60 - 90 мин от начала искусственного кровообращения животное временами удерживает артериальное давление на уровне 70 - 80 мм рт. ст, самостоятельно. Иногда животным для получения эффективных сокращений сердца и достаточно- го уровня артериального давления вводятраствор глюкозы (1 мл 40%-ното раствора/кг веса) и адреналина (0,01 мл 0,1%-ного раствора/кг веса). Введение этих веществ периодически повторяют. Если животное в состоя.нии самостоятельно длительное время удерживать артериальное давление на уровне 80 - 90 мм рт. ст., то дальнейшее согревание его кровью производят путем вено венозной пер фузии.Через 1,5 - 2,0 час искусственного кровообращения у животното появляются сначала редкие спонтанные дыхательные движения, а затем спонтанное дыхание учащается, На третьем часу перфузии появляется корнеалв 6 О ный рефлекс, животное начинает реагироватьна болевое раздражение (укол иглой), самопроизвольно поворачивает голову, стойко дер.- жится роговичный рефлекс. Все это свидетельствует о том, что эффект реанимации мелкотд65 лабораторного животного, находившегосй дли536827 Формула изобретения Составитель С. Малютина Редактор М. Дмитриева Корректор О. Тюрина Техред М, Семенов Заказ 268717 Изд.1819 Тираж 630 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская набд. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 тельное время в состоянии смерти (без дыхания и без кровообращения), является отчетливым. 1. Способ восстановления жизнедеятельности лабораторных животных, заключающийся в охлаждении и искусственном кровообращении, отличающийся тем, что, с целью увеличения периода, в течение которого возможно оживление организма, охлаждение проводят постмортально со скоростью 0,5 - 0,75 С/ /мин до 19 - 21 С. 2. Способ по и. 1, отл и ч а ю щий ся тем,что, с целью возможности восстановления жизнедеятельности организма мелких животных, искусственное кровообращение проводят 5 путем, подключения венозной магистрали книжней полой вене через левую почечную вену, а артериальной - через тройник к артерии и к вене.Источники информации, принятые во вни мание при экспертизе:1. Долгушин Ю, Генератор чудес, Профтехиздат, 19 бО, с. 380 - 401.