Способ получения антибиотиков

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республик(23) Приоритет -Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытий(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИБИОТИКОВ 20 10 Кукурузная мука Соевая мукаГидрол (по редуцирующим веще" ст вам)Хлорид натрия Углекислый кальцийвода, л 10 5Изобретение относится к медицинской промышленности, в частности кполучению антибиотиков,Известен способ стимулированиябиосинтеза леворина путем совместного культивирования продуцента антибиотика и дрожжеподобных грибов.Для повышения выхода целевого продукта предлается к ферментационной Ясреде добавлять фильтрат культуральной жидкости дрожжеподобных грибов,например, Сапа 1 аа или Впоаосогц 1 а .Можно также использовать предварительно лиофильно высушенный Фильтрат. 1Предлагаемый способ получения антибиотиков включает два этапа: первый заключается в приготовлении биостимулятора, а второй - в проведенииферментации продуцентов антибиотиковна средах, содержащих биостимулятор,Для получения биостимулятора.применяют один из видов дрожжеподобныхгрибов родов: Сапата, Иоао 1 огц 1 а,например СапаЫа 1 гор 1 са 11 з, Сапа 1 аа 25Ш 111 з, Сапа 1 аа 1 уро 1 ус 1 са, ВЬоао 1 огц 1 а ацгапс 1 са Иоаосогц 1 а пцс 11 ад 1 лоза, или какой"либо другой организм этих родов, Один из указанныхмикроорганизмов выращивают на суслоагаре в пробирках или бактериологических матрацах при 37 еС в течение24 ч и затем смывают физиологическимраствором для получения суспензии,содержащей 10 млрд. микробных клеток. в 1 мл, Приготовленную суспенэиювносят в количестве 1-2 в качалочные колбы со средой рН 6,8-7,0 следующего состава, гг Колбы .устанавливают на качалку и инкубируют 24-48 ч при 27-28 фС. Полученную культуральную жидкость сливают и отделяют фильтрованием или центрифугированием от взвешенных частиц. Для лучшей Фильтрации или центрифугирования культураЛьвую жидкость предварительно эамораживают при минус 10-15 фС и оттаивают при комнатной температуре. Для удаления пигментов фильтрат обрабатывают активиГ ванным углем. Для этого к нему добав" ляют 1 осветляющего угля марки А и перемешивают его с помоцью мешалки в течение 30 мин, после чего уголь отфильтровывают на плотной фильтровальной бумаге. Получают осветленный фильтрат, содержащий в растворенном виде биостимулятор (продукт 1). Осветленный фильтрат разливают по пробиркам или флаконам и лиофилируют. Остаток после лиофильной сушки, выход которого составляет 12-14 г на1 л культуральной жидкости (продукт 2), используют как биостимулятор.Лиофильно высушенный остаток является многокомпонентной смесью. .и содержит, Ъ: редуцирующие веществаНеорганический фосфорБелокОрганические кислотыЗолаВлажность порошка 20-232 О30-352,25-2,5 4-530-408-10 600 млДо 1 6 О 7,3-7,4 После стерилизации и охлаждениясреды в нее вносят 5 мл двусуточногоинокулюма культуры Ас 11 повусев Важной особенностью биостимулятора является его термостабильность, благодаря чему свойства вецества сохраняются после добавления его в сре ды и их стерилизации.Для проведения ферментации используют регламентные Культуры и среды, а также известные способы подготовки посевного материала, выращивания 35 микроорганизмов и стерилизации сред.П р и м е р 1. Ферментация Ас 11- пощусев 1 ечог 1 в штамм 28 продуцента леворина. В качалочные колбы емкостью 5.л, содержащие 1 л соево-кукурузно-гидрольной среды вносят 10 мл 10 млрд.ед,взвеси Сапйдйа 1 гор 1 са 11 в. Колбы устанавливают на качалку и культивируют при 27-28 С в течение 2 сут. Затем клетки отделяют центрифугированием и получают биостимуля тор в виде продукта 1. В качалочные колбы на 750 мл, каждая из которых содержит 50 мл соево-кукурузно-гидрольнойсреды следующего состава, г:Кукурузная мука 205 ОСоевая мука 10Гидрол (по рейуцируюцим вецествам ) 10Хлорид натрия 5 55Углекислый кальций 1Биостимуляторечег 1 в, выращенного при 27-28 фС насреде следующего состава, г: Соевая мукаГлюкозаХлорид натрияУглекислый кальцийВода, л 10 10 5Затем проводят ферментацию приобычном режиме в течение 120 ч. Активность культуральной жидкости по окончании процесса ферментации составляет 61000 ед/кп, при ферментации на той же среде беэ биостимулятора активность культуральной жидкости составляет 45200 ед/мл. П р и м е р 2. Ферментация АсС 1- повусев пойовцв штамм 510/13 продуцента амфотерицина В. В качалочные колбы емкостью 5 л, содержащие 1 л соево-. кукурузно-гидрольной среды, вносят 10 мл 10 млрд. ед. взвеси ВйойоСогц 1 а ацгап 11 са. Колбы устанавливают на качалку и выращивают культуру при 27-28 С в течение 2 сут, Затем центрифугируют и иэ недостаточной жидкости получают биостимулятор (продукт 1), После этого готовят ферментационную среду следующего состава, г: 50 10 Кукурузная мукаГлюкозаСернокислый аммоний 5Кукурузный экстракт 5 (по весу)Углекислый кальций 5Биостимулятор(продукт 1) 600 млВода, л До 1рН среды до стерилилизации 6,9-7,1 Среду разливают в качалочные кол" бы емкостью 750 мл по 50 мл. После стерилизации и охлаждения среды в нее вносят 5 мп двусуточного посевного материала Ас 1 пощусев пойовцв, выращенного при 27-28"С на среде, г: 30 20 Соевая мукаГлюкозаУглекислый кальций 2,5Хлорид натрия 1Вода, л 1рН 7,2-7,3. до стерилизации Ферментацию при обычном режимепроводят в течение 96 ч,Активность культуральной жидкости по окончании процесса ферментации ,составляет 5500 мкг/мл против4100 мкг/мп в контрольной ферментации беэ биостимулятора.457342 формула изобретения Составитель С.МалютинаТехредО,ЛегеэаКорректор Ж,.Шароши Редактор Л,Письман Заказ 10023/8 Тираж 522 ПодписноеБНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Филиал ЛПП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 1, Способ получения антибиотиков путем глубинного биосинтеза, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, к ферментационной среде добавляют фильтрат культуральной жидкости дрожжеподобных грибов, например , рода СапЖЙа или ВЬойо 1 оги 1 а.2. Способ по п.1, о т л и ч а ю,щ и й с я тем, что фильтрат культу- ральной жидкости предварительно лиофильно высушивают,