Способ исследования кинетики реакций
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 432194
Авторы: Изобретени, Казначеев, Каменска, Колонда
Текст
(32) ПриоритетОпубликовано 15,06,74. Бюллетень22 121 с 1 51) М Кл Гасударственный комитетСовета Министров СССРао делам изобретенийи аткрытий К 576.8.097,3(71) Заявитель арственный медицинский инсти восибирски 54) СПОСОБ ИССЛЕДОВАНИЯ КИНЕТИКИ Р где пв (1) - концентрация комплексов антиген - антитело в момент времени ;(ав)- равновесная концентрация комплексов антиген - антитело;К 2 - константа скорости реакции.С другой стороны, концентрация комплексов антиген - антитело связана с теплопроводностью среды, в которой протекает серологическая реакция, установленной зависимостьюК: КвР) (2) где К(1) - коэффициент теплопроводностисреды в момент времени 1 после начала комплексообразования;Ко - коэффициент теплопроводностисреды в начальной момент времени;пв (1) - концентрация комплексов антиген - антитело в момент времени 1;Е - параметр, зависящий от структуры, характерной для данного типа серологической реакции,Подставляя в уравнение (2) значение пв из формулы (1) учитывая, что К=хрс (здесь х - коэффициент температуропроводности среды, р и с - плотность и удельная теплоемкость среды), получаемГ( 1Х = хравн. + е(х, - хравн,)р (3) е кинетика серологичебыть описана выражекои ние а :-. (и), (1 - еИзвестен способ исследования серологических реакций, путем определения интенсивности образования комплексов антиген + анти- тело по изменению теплофизических характеристик среды, регистрируемых терморезистором.Целью изобретения является получение количественной характеристики кинетики реакции. Это достигается тем, что источник тепла и детектор, работающие в импульсном режиме, помещают непосредственно под поверхностью раствора, в качестве источника тепла и детектора используют два разных элемента, и по скорости прохождения тепловых импульсов между ними судят о кинетике реакции.В исследуемую среду непосредственно под ее поверхностью помещают точечный источник тепла и точечный температурный детектор и, подавая кратковременные тепловые импульсы через равные промежутки времени, регистрируют моменты наступления максимума температуры в микрорайоне температурного детектора; по скорости прохождения тепловых импульсов судят о кинетике протекающей серо- логической реакции.В простейшем случас " реакции может рР 1 -"Ю(4) ГИ) = Травн (1 е ) где х(1) - значение коэффициента температуропроводности в момент времени 1;х, - начальное значение коэффициентатемпературопроводности;хр - зна ение коэффициента температуропроводности в момент наступления равновесной концентрации комплексов антиген - антитело.При этом предполагают, что изменения р и с пренебрежимо малы,Значсние коэффициента температуропроводности для любого заданного момента времени легко определяется по скорости прохождения теплового импульса для этого моменза вре- мени где г - расстояние между точечным источником тепла и точечным температурным детектором;- время наступления максимума температуры в микрорайоне детектора;Г - для 1 етгйость теплового импульса.формулу (4) получается при решении уравнения теплопроводности в предположении импульсного точечного источника тепла.Изменение скорости прохождения теплового импульса в среде для заданного момента времени занимает не более 20 - 25 сек. Это позволяет производить многократные замеры в течение времени протекания серологической реакции (15 - 30 мин), Размещение точечного источника тепла и температурного детектора непосредственно под поверхностью среды исключает влияние тепловой конвекции жидкости.Пример исследования кинетики при постановке реакций для трех иммунологических пар: цельная сыворотка больного туберкулезом + сухой очищенный туберкулин, взятый в разведении 1: 10; цельная сыворотка кролика, иммунизированного альбумнном + альбумин в разведении 1; 1000; гипериммунная сыворотка + диагностикум клещевого энцефалита в разведении 1: 1 б.В качестве точечного источника тепла используют микротерморезистор типа МТ(сопротивление Рю с =500 - 700), способный выдерживать кратковременные токи большой мощности (до 1,0 - 1,5 вт). Точечным температурным детектором служит также микротерморезистор МТ, работающий в режиме электротермометра.В фарфоровую кювету заливают по 0,5 см сыворотки и антигена и тщательно перемешивают, Микротерморезисторы укрепляют в стационарной подставке на расстоянии 4 мм один от другого и погружают и реакционную смесь на глубину 1 - 2 мм от поверхности. Терморезистор, работающий в условиях точечного источника тепла, подключают через электронное реле времени к источнику питания. Терморезистор - детектор включают в мостовую схего 25 зо 35 40 45 50 55 60 65 му Витстона, к диагонали которой подключают регистрирующий прибор.Перед началом измерений мост уравновешивают. Затем на терморезистор - источник тепла, подают в течение 2 сек ток мощностью 1,2 вт и, терморезистором - термометром, измеряют время наступления максимума температуры. Тепловые импульсы подают через равные промежутки времени 2 - 3 мин. Измерения производят в течение 30 мин.В жидкостях, в которых нет серологической реакции (контроль), время 1, остается почти постоянным. Например, для физраствора 1=21,0-+0,2 сек, для нормальной сыворотки+ диагностикум - 1 =-20,30,3 сек. В жидкостях, где протекает серологическая реакция, время 1, постепенно возрастает, что указывает на уменьшение коэффициента температуропроводности среды.Полученные в результате замеров данные г,и 1, подставляют в формулу (4) и вычисленные значения х(1) наносят на график, где по оси абсцисс откладывают время, по оси ординат - значение х.Математическая обработка экспериментальных кривых дает эмпирические формулы вида где у (1) = - пк (1) - относительная конценКтрация комплексов: для первой иммунологической пары у(1) =0,27(1 - е - о 47); для второй иммунологической пары у(1) =0,2 (1 - е - ); для третьей иммунологической пары у(1) = =0 27(1 - е-О,о 4 з).Исследуя полученные результаты, можно сделать следующие выводы; равновесная относительная концентрация комплексов антиген - антитело оказалась одинаковой для первой и третьей иммунологических пар: ураган=0,27, Для второй иммунологической пары она оказалась ниже 7 рдн=0,1 б 5; наибольшая константа скорости реакции характерна для первой иммунологической пары (К= = 0,147 мин - ), а наименьшая - для третьей иммунологической пары (К= 0,043 мин - ).Анализ кривых показывает, что через 30 мин после начала реакции для первой пары реакция практически закончилась, а для второй и третьей пар она еще далека до завершения.Обычные серологические методы титрования дают конечную величину преципитации (что эквивалентно равновесной концентрации комплексов), и они показали бы обыкновенную характеристику для первой и третьей иммунологических пар. Исследование кинетики реакций и определение констант скорости реакции указывают на существенную разницу в реакциях первой и третьей иммунологических пар, которая, повидимому, связана с различной разновидностью антигенов и антител,432194 личественной характеристики кинетики реакции, источник тепла и детектор, работающие в импульсном режиме, помещают непосредственно под поверхность раствора, в качестве 5 источника тепла и детектора используют дваразных элемента, и по скорости прохождения тепловых импульсов между ш 1 ми судят о кинетике реакции. Составитель Т. ГоловинаТехред Г. Васильева Корректор М. Лейзерман Редактор Л. Тюрина Заказ 2955,6 Изд.1736ЦНИИПИ Государственного комитетапо делам изобретений и Москва, Ж, Раушская Типография, пр. Сапунова, 2 Предмет изобретения Способ исследования кинетики реакций, например серологических, путем определения интенсивности образования в растворе комплексов антигсп + антитело по изменению теплофизических характеристик раствора с помощью источника тепла и детектора, о тл ич а ю ш, и й с я ем, по, с целью получения коТираж 456 ПодписноеСовета Министров СССРоткрытийнаб., д. 4/5
СмотретьЗаявка
1699401, 23.09.1971
Новосибирский государственный медицинский институт
изобретени Ю. А. Старикин, Г. Г. Колонда, В. П. Казначеев, В. В. Каменска
МПК / Метки
МПК: C12Q 3/00
Метки: исследования, кинетики, реакций
Опубликовано: 15.06.1974
Код ссылки
<a href="https://patents.su/3-432194-sposob-issledovaniya-kinetiki-reakcijj.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ исследования кинетики реакций</a>
Предыдущий патент: Способ постановки серологических реакций
Следующий патент: Устройство для культивирования клещей
Случайный патент: Способ воспроизведения магнитной записи фазомодулированных сигналов