Способ фиксации препарата глаза для гистологического исследования

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК 83878 имер изооро 3 - 5 ч. ;-ный смяг- епаранным столочения ри наИзобрете менно к фи репаратов. ии глазных апример склстичныммается. цине, а ических я фикса паратов глазных а за счет возниканной цели длясм объект и ные растворы роводят в темещают в 2- шофита на 2 афин, готовятческими краводно-солевой явнем 2 чи мягким и элаГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССРГОСПАТЕНТ СССР) 46) 30,08.93. Бюл, М. 321) Волгоградский государственный меди- инский институт 2) А. М Водовозов, А. К, Брель, Р, П, Самув, Л. С. Кондаурова и О. А, Фишер3) А, М. Водовозов, А, К, Брель, Р. П. Самуев, Л. С. Кондаурова и О. А, Фишер 6) Авторское свидетельство СССР1515091, кл. О 01 М 1/28, 1989, 54) СПОСОБ ФИКСАЦИИ ПРЕПАРАТА ЛАЗАДЛЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕ- ОВАНИЯ ние относится к меди ксаторам для гистолог Может применяться дл гистологичесКих пре еры глазного яблока.ретения - получение лее высокого качеств мкости и крошения,Цель изоб репаратов бо сключения ло щих при нарезке,Для выполнения поставл иксации берут не более 1 х омещают его в 3 - 5%-ные во иметилфосфита, Фиксацию ение 3 - 10 ч. Затем объект и о водно-солевой раствор б аса, Объект заключают в па резы и окрашивают гистоло ителями,Объект, помещенный ваствор бишофита, находит осле этого становится болеМ 33/48 // 0 01 И 1/28 гистологических препаратов, нап склеры глазного яблока. Сущност бретения: препарат глазного яблок батывают 3 - 5;4-ным раст диметилфосфита, фиксацию проводя Затем объект помещают на 2 ч в 2 - 3 водно-солевой раствор бишофита дл чения фиксированного объекта. С пр тов, обработанных предложе способом, получают качественные ги гические препараты за счет исклю ломкости и крошения, возникающих и резке. 1 табл. нарезке не крошится и не лоПриготовление водно-солевого раствора бишофита проводили следующим образом: раствор бишофита, приготовленного фабричным способом в следующих соотношениях компонентов:Хлорид магния 450 - 460 г/л твердого вещества солейБромид магния 4 - 9 г/лСульфат кальция 3-4 г/л Хлорид калия до 4 - 5 г/л Хлорид натрия до 4-5 г/л Вода до 100 мас. ч.Общая минерализация бишофита равна 450 - 460 г/л. По внешнему виду зто прозрачная бесцветная или слегка желтоватая без запаха жидкость. Раствор бишофита утвержден начальником управления по внедрению новых лекарственных средств и медицинской техники МЗ СССР Э, Бабаян 18 марта 1985 года. Бишофит применяетсяв качестве добавки в топливо при сжигании сернистых мазутов, для пропитки древесины, изготовления дефолиантов, в бальнеологических целях.Приготовление водно-солевого раствора бишофита проводили с расчетом на 100 г/л 15 растворов, см, табл. 1). Закладка объекта проводилась на 0,5, 1, 2, 3, 4, 5 ч, исследовали свойства гистологических препаратов после закладки объекта вначале в раствор бишофита до закладки в водный раствор диметилфосфита, Затем исследовали свойства гистологических препаратов приготовленных: вначале закладывали в раствор диметилфосфита, затем в водно-солевой раствор бишофита.Как показали исследования; оптимальным временем для закладки обьекта в водно-солевой раствор бишофита было 2 ч, оптимальный раствордля закладкибыл 2 - 3, что соответствовало 2-3 г фабричного бишофита .к 98 - 97 г дистиллированной воды 2-3% раствор водного бишофита). Глазные гистологические препараты, например препарат склеры глазного яблока, были высокого качества и легко проводилась нарезка после того, как объект 3-10 ч находился в 3-5% водном растворе диметилфосфита, хорошо зафиксированный, он несколько размягчался в 2-3% водно-солевом раствора бишофита в течение 2 ч, После этого кусочек склеры, заключенный в парафин, хорошо резался на микротоме. Далее проводили окраску гистологическими красителями,П р и м е р 1. Кусочек склеры глазного яблока размером 1 х 1 см погружали в.20 мл 3%-ного водного раствора диметилфосфита. Фиксацию проводили в течение 10 часов. Затем склеру переносили, в 2% водно-солевой раствор бишофита на 2 ч, Проводили нарезку при приготовлении их нет разрывов, склера не крошится, нет деформаций), Срезы окрашивали гематоксилин-эозином. Эластические волокна склеры хорошо сохранены, имеют обычную окраску.П р и м е р 2. Кусочек склеры глазного яблока размером 1 Х 1 см погружали в 20 мл 5%-ного водного раствора диметилфосфита на 3 ч. Затем склеру переносили в 3% водно-солевой раствор бишофита на 2 ч. Затем готовили срезы (при приготовлении их нет разрывов, склера не крошится, легко.режится, без деформаций. артефактов). Срезы окрашивали гематоксилин-эоэином. Эластические волокна склеры и собственноевещество хорошо сохранены, имеют обычную окраску,При использовании 0,5%, 1% растворовводно-солевого бишофита наблюдалась недостаточная мягкость склеры для приготовления срезов, склера продолжала крошится,"0 ломаться. При использовании 4% водно-солевого раствора бишофита склера сильноразволокнялась, менялась структура склеры. В связи с перечисленными недостатками использование растворов 0,5, 1 и 4%15 водно-солевого раствора бишофита представляется нецелесообразным. Кроме того,проводилось исследование на выявлениеоптимального времени закладки в растворбишофита, Недостатками в режиме работы20 0,5 и 1 ч были: недостаточная мягкость склеры, ломкость, При режиме работы 3, 4 и 5 чнаблюдалась деформация эластических волокон склеры, их разволокнение.Наилучшие результаты получены при25 использовании вначале раствора диметилфосфита и далее водно-солевого растворабишофита. В полученных микропрепаратахпри таом способе фиксации склеры и режиме фиксации была сохранена эластическая30 структура склеры, нет разрывов, артефактов, деформаций.При использовании в качестве фиксатора только одного водно-солевого растворабишофита наблюдались недостатки: склера35 была набухшей; плохо резалась, гистологические препараты недостаточно окрашивались, наблюдалась деформацияэластических волокон склеры.При использовании сначала водно-со 40 левого раствора бишофита, затем водногораствора диметилфосфита также отмечались недостатки в полученных микропрепаратах; разрывы, дефекты, деформацииэластических волокон склеры.45формула изобретенияСпособ фиксации препарата глаза длягистологического исследования, включающий его обработку 3-5%-ным водным рас 50 твором диметилфосфита,о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения качества препарата, дополнительно препарат обрабатывают 2 - 3%-ным водно-солевым растворомбишофита в течение 2 ч.55, Кулакова дак ельский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Производственно 2924 Тираж ПодписноеИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва. Ж. Раушская наб., 4/5